Миэп рф: Абитуриенту - Управленческое образование - ЕГЭ, ОГЭ, общеобразовательные предметы

Содержание

Международному институту экономики и права в 2022 году исполняется 30 лет

Три десятилетия – повод для обобщения, анализа достигнутых результатов и подведения итогов в сфере образовательной деятельности Международного института экономики и права.

История МИЭП берёт своё начало в период смены общественно-политической системы Российского государства и перехода всех сфер жизни на рыночные отношения. Международный институт экономики и права был основан в числе первых пяти негосударственных высших учебных заведений России и ведёт образовательную деятельность c 1992 года.

Международный институт экономики и права имеет солидный научный потенциал, лучшие профессорско-преподавательские кадры Москвы и зарубежных преподавателей – партнёров ВУЗа, специалистов в области юриспруденции, экономики, менеджмента, информатики, иностранных языков. В МИЭП обучаются многие тысячи студентов из России, ближнего и дальнего зарубежья. В подготовке специалистов мирового уровня наш институт активно сотрудничает с научными организациями и учебными заведениями многих стран, поддерживает двусторонние контакты с научными и образовательными учреждениями.

МИЭП — один из первых ВУЗов России, которым Федеральная служба по надзору в сфере образования и науки РФ предоставила право на реализацию образовательных программ с использованием дистанционных технологий. Классическое обучение в МИЭП дополнено современными дистанционными технологиями. Нашим студентам, независимо от места их проживания или нахождения, предоставлены постоянный доступ к образовательным ресурсам сайта МИЭП и возможность общения в режиме онлайн с преподавателями кафедр института, расположенного в Москве – в одном из крупнейших мировых научных и вузовских центров. Неоднократно деятельность МИЭП получала высокие оценки профильных министерств и ведомств РФ.

Более 70 000 наших выпускников уверенно реализуют полученные знания на практике, успешно работают как в бизнесе, так и на ответственных государственных постах. По данным кадровых рейтингов, МИЭП входит в число лидеров по трудоустройству выпускников среди вузов Российской Федерации.

Достижения МИЭП стали возможны благодаря эффективной деятельности всего многотысячного коллектива нашего ВУЗа: сотрудников и преподавателей, которые строили историю института с первых лет его существования, и тех, кто гармонично влился в коллектив в последующие годы; благодаря успехам студентов, проходящих обучение в институте и выпускников, окончивших МИЭП и получивших диплом о высшем образовании.

Мы гордимся нашими достижениями и приглашаем для обучения в МИЭП всех желающих получить фундаментальные знания в области юриспруденции, экономики, менеджмента, государственного и муниципального управления!

МИЭП в регионах

Перечень направлений и профилей для Бакалавриата

40.03.01 «Юриспруденция»
с присвоением квалификации БАКАЛАВР.
Профили подготовки:

Государственно-правовой;
Гражданско-правовой;
Уголовно-правовой;
Международно-правовой.

38.03.01 «Экономика»
с присвоением квалификации БАКАЛАВР.
Профили подготовки:

Финансы и кредит;
Экономика предприятий и организаций;
Налоги и налогообложение;
Бухгалтерский учет, анализ и аудит;
Мировая экономика.

38.03.02 «Менеджмент»
с присвоением квалификации БАКАЛАВР.

Профили подготовки:

Маркетинг;
Управление проектами;
Управленческий и финансовый учет;
Финансовый менеджмент.

38.03.04 «Государственное и муниципальное управление»
с присвоением квалификации БАКАЛАВР.
Профили подготовки:

Муниципальное управление

Перечень направлений и профилей для Магистратуры

^*:

38.04.01 «Экономика»
с присвоением квалификации МАГИСТР.

Магистерские программы:

Международная экономика.
Бухгалтерский учёт, анализ и аудит в коммерческих организациях.
Финансовые рынки и институты.

38. 04.02 «Менеджмент»
с присвоением квалификации МАГИСТР.

Магистерские программы:

Маркетинг.
Финансовый менеджмент.
Управление проектами.

* Обучение ведется только в головном институте

Формы обучения

Заочная с применением дистанционных образовательных технологий

Дополнительно

Обучение по двум направлениям: oдновременное освоение двух основных образовательных программ высшего профессионального образования в один срок обучения.

Учебно-материальная база: компьютерный мультимедийный класс; современная учебная литература, периодика и учебно-методические пособия, разработанные профессорско-преподавательским составом МИЭП, электронная библиотека, электронная почта, Интернет.

Дополнительные сведения: обучение ведут высококвалифицированные преподаватели (доктора и кандидаты наук) Москвы.

Тысячи выпускников МИЭП успешно работают в государственных и региональных органах, бизнес структурах.

Среди них:

Антонов Сергей Александрович

Василевич Денис Николаевич

Говор Людмила Леонидовна

Проневич Владислав Олегович

Стоян Юрий Владимирович

Пищик Игнатий Владимирович

Абдо Ромео Абдо

Жданович Людмила Чеславовна

Сазонов Вадим Альбердович

Шевчёнок Александр Николаевич

Семёнова Татьяна Владимировна

Шафаренко Андрей Владимирович

Львова Ольга Евгеньевна

Ющенко Михаил Васильевич

Вежновец Константин Николаевич

Вы мечтаете о современном высшем образовании?

Тогда Вам – в Международный институт экономики и права (МИЭП)!

Обучение ведётся по заочной форме, а условия обучения самые что ни на есть подходящие.

Заочное обучение в МИЭП имеет не только свои особенности, но и преимущества перед другими вузами:

МИЭП – московский вуз. Студенты, обучающиеся в регионах, являются студентами головного института: в дипломе указывается город Москва.
МИЭП имеет лицензию и государственную аккредитацию: выпускные экзамены принимает государственная комиссия, а выпускники получают диплом государственного образца.
В МИЭП используется столичный научный потенциал.
Студенты МИЭП в своём городе имеют постоянную возможность консультаций с московскими преподавателями.
Студенты имеют доступ к электронной библиотеке МИЭП, в которой собрана современная научная и учебная литература, вышедшая в свет в московских издательствах за последние два года. Также обучающимся предоставляются разработанные в МИЭП уникальные авторские учебно-методические пособия по каждой дисциплине.
В МИЭП используются самые современные дистанционные технологии. Нашим студентам доступны образовательные ресурсы сайта, интернет-ресурсы, рекомендуемые институтом, текстовые материалы.

Значительная часть студентов МИЭП – люди работающие, поэтому обучение с применением дистанционных технологий позволяет совмещать трудовую жизнь с учёбой.

Обучение с применением дистанционных технологий даёт студентам МИЭП преимущество получать образование, самостоятельно планируя личное время.

Вперёд, в МИЭП!

МИЭП, Международный институт экономики и права — Учёба.ру

Высшее образование онлайн

Федеральный проект дистанционного образования.

Я б в нефтяники пошел!

Пройди тест, узнай свою будущую профессию и как её получить.

Химия и биотехнологии в РТУ МИРЭА

120 лет опыта подготовки

Международный колледж искусств и коммуникаций

МКИК — современный колледж

Английский язык

Совместно с экспертами Wall Street English мы решили рассказать об английском языке так, чтобы его захотелось выучить.

15 правил безопасного поведения в интернете

Простые, но важные правила безопасного поведения в Сети.

Олимпиады для школьников

Перечень, календарь, уровни, льготы.

Первый экономический

Рассказываем о том, чем живёт и как устроен РЭУ имени Г.В. Плеханова.

Билет в Голландию

Участвуй в конкурсе и выиграй поездку в Голландию на обучение в одной из летних школ Университета Радбауд.

Цифровые герои

Они создают интернет-сервисы, социальные сети, игры и приложения, которыми ежедневно пользуются миллионы людей во всём мире.

Работа будущего

Как новые технологии, научные открытия и инновации изменят ландшафт на рынке труда в ближайшие 20-30 лет

Профессии мечты

Совместно с центром онлайн-обучения Фоксфорд мы решили узнать у школьников, кем они мечтают стать и куда планируют поступать.

Экономическое образование

О том, что собой представляет современная экономика, и какие карьерные перспективы открываются перед будущими экономистами.

Гуманитарная сфера

Разговариваем с экспертами о важности гуманитарного образования и областях его применения на практике.

Молодые инженеры

Инженерные специальности становятся всё более востребованными и перспективными.

Табель о рангах

Что такое гражданская служба, кто такие госслужащие и какое образование является хорошим стартом для будущих чиновников.

Карьера в нефтехимии

Нефтехимия — это инновации, реальное производство продукции, которая есть в каждом доме.

Международный институт энергетической политики и дипломатии

Информация

English version

Международный институт энергетической политики и дипломатии (МИЭП) МГИМО МИД России — единственный в России и мире учебный центр, осуществляющий подготовку уникальных востребованных специалистов в области энергетической дипломатии и геополитики, развития инновационной и цифровой экономики, международного сотрудничества.

Особенности подготовки кадров в МИЭП МГИМО:

сочетание фундаментального образования в сфере международных отношений, мировой экономики, международного права, менеджмента, финансов, связей с общественностью и практико-ориентированной подготовки в области энергетической дипломатии и геополитики, международного сотрудничества, развития инновационной и цифровой экономики;
эффективная профессионально ориентированная подготовка в партнерстве с ведущими корпорациями «Роснефть», «Транснефть», «Норильский никель», Газпромбанк и др.;
мастер-классы руководителей компаний, ведущих российских и мировых экспертов, практики и стажировки в ключевых государственных и международных структурах, ведущих корпорациях мира;
углубленная специализированная языковая подготовка в области энергетической дипломатии и геополитики для работы в иноязычной профессиональной среде, возможность изучения 53 иностранных языков;
международные магистерские программы двух дипломов и программы МВА, реализуемые в партнерстве с ведущими университетами и бизнес-школами Великобритании, Германии, Италии, Норвегии;
участие студентов в международных форумах, конференциях совместно с ООН, ОПЕК, МАГАТЭ и др. ;
активное участие студентов в выполнении аналитических проектов на базе Центра стратегических исследований в области энергетики и цифровой экономики МИЭП МГИМО совместно с ведущими учеными Российской академии наук, международными организациями, по заказам крупных компаний и государственных структур.

Образовательные программы Международного института энергетической политики и дипломатии

Программы бакалавриата МИЭП:

«Международные отношения и энергетическая дипломатия»
«Международное право и юридическое обеспечение международного энергетического сотрудничества»
«Мировая экономика и международное энергетическое сотрудничество»
«Международный бизнес и международное энергетическое сотрудничество»
«Связи с общественностью и международное энергетическое сотрудничество»

Международные и практико-ориентированные магистерские программы МИЭП в партнерстве с ведущими университетами Европы и крупнейшими корпорациями:

«Международная энергетическая экономика и деловое администрирование» (в партнерстве с Лейпцигским университетом, Германия)
«Экономика нефтегазовой отрасли и проблемы энергетической политики» (в партнерстве с Университетом Боккони, Италия)
«Устойчивое развитие и стратегическое управление в энергетике» по направлению «Менеджмент» (в партнерстве с Университетом Сент-Эндрюс, Великобритания)
«Международный нефтегазовый бизнес» (в партнерстве с Университетом Норд и Высшей школой бизнеса, Норвегия)
«Экономические стратегии международных нефтегазовых компаний» (в сотрудничестве с ПАО «НК «Роснефть»)
«Международный менеджмент в области транспорта нефти и нефтепродуктов» (в сотрудничестве с ПАО «Транснефть»)
«Международный банковский бизнес» (в сотрудничестве с Газпромбанком)
«Стратегический менеджмент международных минерально-сырьевых компаний»
«Правовое обеспечение международных проектов и энергетического бизнеса»

Программы МВА:

«Международный бизнес в нефтегазовой отрасли» (в партнерстве с Высшей школой бизнеса Университета Норд, Норвегия, и Туринским политехническим университетом, Италия)
«Управление и регулирование экономической деятельности в международной электроэнергетике»

Программы МИЭП в Одинцовском филиале МГИМО:

Бакалавриат:

«Мировая экономика и инновации»
«Международный бизнес и управление инновациями»

Магистратура:

«Экономика и управление инновациями»

Последнее обновление — июнь 2020

Полный текст

Скрыть текст

«НОРНИКЕЛЬ» и МИЭП вручают дипломы молодым бакалаврам МГИМО

20 июня состоялась торжественная церемония, посвященная вручению дипломов выпускникам бакалавриата Международного института энергетической политики и дипломатии МГИМО МИД России.

В 2017 году дипломы бакалавров получили 193 выпускника, 38 выпускникам вручены дипломы с отличием.

Наряду с выпускниками и преподавателями, в мероприятии приняли участие представители ведущих российских корпораций, которые связывают с МГИМО долговременные партнерские отношения.

По словам вице-президента «Норникеля» — заведующего Базовой кафедрой корпоративной безопасности МИЭП МГИМО РФ Владислава Гасумянова, компания крайне заинтересована в подготовке молодых кадров, способных вывести отечественный бизнес к новым горизонтам развития.

«Влияние российских корпораций на мировую экономику, их роль в глобальных экономических процессах уже не отрицается никем. Стабильность рынков, их сбалансированное развитие невозможно без учета национальных экономических интересов. Инвестиции в человеческий капитал всегда были и будут приоритетом «Норникеля». И если система подготовки специалистов производственного профиля в целом отлажена, то профессионалы в сфере международной экономической политики, представляющие всю сложность и актуальность работы на глобальных сырьевых рынках, по прежнему остаются «штучным товаром». Мы искренне рады, что МГИМО МИД России с нашим участием восполняет этот пробел, обучая и выпуская будущих «полномочных представителей» российской экономики», отметил Владислав Гасумянов.

Директор – научный руководитель МИЭП МГИМО МИД России, член-корреспондент РАН Валерий Салыгин тепло поздравил выпускников.

«Я убежден, – сказал профессор В.И.Салыгин, – что в будущем вас ждет интересная работа, участие в ключевых энергопроектах как в России, так и за рубежом, в различных регионах мира. И я искренне верю, что знания, которые вы получили в МИЭП МГИМО, свою студенческую дружбу, которую вы здесь приобрели, вы сохраните на долгие годы».

СПРАВКА

Базовая кафедра корпоративной безопасности ПАО «ГМК «Норильский никель» создана решением Ученого совета МГИМО МИД России от 14 февраля 2017 г.

Основные направления деятельности: подготовка специалистов в области экономической, корпоративной, информационной, объектовой, внутренней безопасности, а также международного сотрудничества в профильной сфере.

Международный институт энергетической политики и дипломатии (МИЭП) МГИМО МИД России создан в 2000 г. Ведет подготовку кадров со специализацией в сфере энергетической дипломатии и международного энергетического сотрудничества и углубленной профессионально ориентированной языковой подготовкой. Обучение ведется по пяти направлениям: «Международные отношения», «Юриспруденция», «Экономика», «Менеджмент», «Реклама и связи с общественностью».

В структуру МИЭП МГИМО входят базовые кафедры ведущих российских корпораций: ПАО «НК «Роснефть», ПАО «Транснефть», ПАО «ГМК «Норильский никель», АО «Росгеология», а также «Газпромбанк» (АО).

На базе МИЭП МГИМО действуют Центр стратегических исследований и геополитики в области энергетики, научно-студенческие клубы «Мировая энергетическая политика» и «Арктика».

16 выпускников целевой программы Холдинга МРСК в Международном институте энергетической политики и дипломатии (МИЭП) МГИМО (У) МИД РФ успешно защитили квалификационные работы

Согласие на обработку персональных данных

В соответствии с требованиями Федерального Закона от 27. 07.2006 №152-ФЗ «О персональных данных» принимаю решение о предоставлении моих персональных данных и даю согласие на их обработку свободно, своей волей и в своем интересе.

Наименование и адрес оператора, получающего согласие субъекта на обработку его персональных данных:

ОАО «МРСК Урала», 620026, г. Екатеринбург, ул. Мамина-Сибиряка, 140 Телефон: 8-800-2200-220.

Цель обработки персональных данных:

Обеспечение выполнения уставной деятельности «МРСК Урала».

Перечень персональных данных, на обработку которых дается согласие субъекта персональных данных:

— фамилия, имя, отчество;
— место работы и должность;
— электронная почта;
— адрес;
— номер контактного телефона.

Перечень действий с персональными данными, на совершение которых дается согласие:

Любое действие (операция) или совокупность действий (операций) с персональными данными, включая сбор, запись, систематизацию, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передачу, обезличивание, блокирование, удаление, уничтожение.

Персональные данные в ОАО «МРСК Урала» могут обрабатываться как на бумажных носителях, так и в электронном виде только в информационной системе персональных данных ОАО «МРСК Урала» согласно требованиям Положения о порядке обработки персональных данных контрагентов в ОАО «МРСК Урала», с которым я ознакомлен(а).

Согласие на обработку персональных данных вступает в силу со дня передачи мною в ОАО «МРСК Урала» моих персональных данных.

Согласие на обработку персональных данных может быть отозвано мной в письменной форме. В случае отзыва согласия на обработку персональных данных.

ОАО «МРСК Урала» вправе продолжить обработку персональных данных при наличии оснований, предусмотренных в п. 2-11 ч. 1 ст. 6 Федерального Закона от 27.07.2006 №152-ФЗ «О персональных данных».

Срок хранения моих персональных данных – 5 лет.

В случае отсутствия согласия субъекта персональных данных на обработку и хранение своих персональных данных ОАО «МРСК Урала» не имеет возможности принятия к рассмотрению заявлений (заявок).

Сдача тестов МИЭП

Если оценка для вас – это не просто цифра, но и Ваша репутация.

Консультация по написанию дипломных и курсовых работ на заказ студентам высших учебных заведений.

Процесс подготовки различных видов студенческих работ может быть затруднителен для многих учащихся.
Это, как известно, является весьма сложной задачей, которую, к сожалению, нельзя игнорировать.

Студент обязан показать свои знания и желание двигаться вперед, периодически предоставляяи различные авторские сочинения в письменной форме: рефераты, курсовые работы, дипломные и творческие.
Следовательно, нужно оставаться в постоянном напряжении, чтобы получить оценки, которыми можно гордиться. VK:67768

Основным преимуществом нашего сервиса является то, что мы знаем проблемы, с которыми Вы сталкиваетесь и ежедневно помогаем тысячам студентов.

Препятствия, мешающие написать дипломную/курсовую работу самостоятельно:

Вы не знаете, где найти все необходимые практические и теоретические материалы.
Одна вещь, которая заставляет материал выглядеть действительно мощно – это исследование.
Без исследования, труд будет обычным. Так что, если вы не можете провести тщательное исследование, то вы, соответственно, не сможете написать качественную работу.
Из-за отсутствия интереса, вы не уверены, что хотите начинать пыхтеть над задачей.
Это самая распространенная проблема, с которой сталкиваются студенты, когда они начинают планировать.
Если вы не заинтересованы в теме, то Вы не сможете вообще что-нибудь написать.
Вы сомневаетесь, что сможете написать грамотную и интересную работу.
Вам осталась не самая простая тема курсовой и у Вас нет возможности поменять ее.
Если требования к курсовой кажутся Вам слишком жесткими, то вряд ли Вы добьетесь успеха в ее написании.
Вы постоянно заняты делами и не знаете, как выкроить время для учебы.
Многие студенты имеют напряженный график, поэтому заниматься учебой просто невозможно.
Но если Вы все-таки рискнете готовить курсовую или дипломную работу после трудового дня, то Вас ждет постоянный недосып и нервное истощение.
Вы не уверены, что успеете вовремя подготовить диплом.
Самостоятельная работа обычно происходит достаточно медленно, так как студент должен найти хорошие теоретические материалы, прочитать их и сделать выводы в письменной форме.
Начинать следует в начале учебного года, иначе Вы не уложитесь в конкретные сроки.

Эти проблемы могут раздражать любого студента. Если Вы не можете найти правильное решение, Вы будете страдать вместе с вашими оценками.

Итак, что нужно сделать, чтобы немедленно прекратить страдания?
Ответ: заказать консультацию по работе у сервиса Fiveorfive и позволить ему решить Вашу проблему быстро и эффективно!

Не беспокойтесь, мы предлагаем квалифицированную помощь, которая позволяет нашим клиентам взаимодействовать нашей компанией в очень удобной форме.
Вам не придется беспокоиться ни о чем, потому что после того, как вы сообщите нам о том, что Вы хотите получить, мы сразу же приступим к выполнению заказа.

Ждать больше нет смысла – позвольте нам помочь Вам с подготовкой курсовика уже сегодня!

Оформляйте заказ на консультацию по дипломной и курсовой работам прямо сейчас:

Мы внимательно следим за соблюдением всех инструкций и сроков.
Таким образом, вы получите уникальную консультацию в кратчайшие сроки.
Наша команда будет собирать данные для исследования точно так, как вы хотите.
Мы проверяем текст на плагиат и качество с помощью целого набора инструментов.
Наряду с содержанием, мы будем заботиться о корректном форматировании в word’е.
Бесплатные правки позволяют получить готовый вариант, который полностью готов к сдаче и оценке.
Вне зависимости от объема и глубины материала, она будет завершена своевременно.

В отличие от других сервисов, мы не завышаем цены.
Наша система ценообразования наглядна и понятна.
Мы уверены, что Вы найдете ее доступной.

Воспользуйтесь нашим сервисом уже сегодня и избегите проблем с учебой!

границ | Расширение известного функционального репертуара белка

pp71 цитомегаловируса человека

Введение

Вирусы герпеса, такие как цитомегаловирус человека (ЦМВ), имеют два различных типа инфекции: продуктивный (литический) и латентный. Ключевым шагом в определении того, какой тип инфекции будет инициирован при заражении, является транскрипция вирусных генов немедленного раннего (IE), которые должны быть активированы для инициации продуктивной инфекции, но подавлены, когда устанавливается латентный период.Промотор, который управляет транскрипцией основных генов IE, Major Immediate Early Promoter (MIEP), не является полностью конститутивно активным в контексте вирусного генома, а скорее трансактивируется кодируемым вирусом белком, который упакован внутри слоя тегумента. инфекционных вирионов и совместно доставляется клеткам при проникновении вириона. Для HCMV таким трансактиватором тегумента является белок pp71, который стимулирует MIEP в репортерных анализах (Liu and Stinski, 1992) и транслоцируется в ядро в литически инфицированных клетках (Hensel et al., 1996) для активации MIEP и индукции транскрипции генов, кодирующих вирусные белки IE1 и IE2. Рекомбинантный HCMV с нулевым pp71 (Bresnahan and Shenk, 2000) имеет серьезный дефект в экспрессии гена IE и продуктивной репликации. Во время продуктивной литической инфекции доставляемый тегументом pp71 инициирует и поддерживает транскрипцию MIEP достаточно долго, чтобы белок IE1, синтезированный de novo , способствовал пролонгированной экспрессии генов литической фазы (Vardi et al., 2018) и завершению продуктивной репликации.

Но pp71 является не просто активатором транскрипции IE в начале литических инфекций. Этот белок также контролирует состояние вирусного хроматина, уклонение от внутреннего, врожденного и адаптивного иммунитета, установление латентности, клеточный цикл и, вероятно, другие вирусные и клеточные процессы, которые способствуют инфекциям HCMV (рис. 1). Здесь обсуждаются многочисленные действия pp71 с особым вниманием к особенностям, недавно обнаруженным или недостаточно рассмотренным в предыдущих обзорах (Kalejta, 2004, 2008a,b; Saffert and Kalejta, 2008; Penkert and Kalejta, 2011, 2012).

Рисунок 1 . Обзор основных ролей pp71 во время инфекции HCMV. Основные функции pp71 включают контроль экспрессии вирусных генов, уклонение от иммунитета и регуляцию клеточного цикла. pp71 регулирует экспрессию вирусных генов, предотвращая сборку транскрипционно-репрессивного гетерохроматина на вирусных геномах, ингибируя внутренние клеточные факторы и стимулируя трансляцию. pp71 способствует уклонению от иммунного ответа, подавляя компоненты внутреннего, врожденного и адаптивного иммунного ответа.pp71 также контролирует прогрессирование клеточного цикла путем ингибирования семейства Rb белков-супрессоров опухолей и онко-микроРНК miR21.

pp71 Модификации, взаимодействия, функции и действия

pp71, кодируемый геном UL82, представляет собой фосфорилированный белок с кажущейся молекулярной массой 71 кДа. Он фосфорилирован по нескольким остаткам (Shen et al., 2008), и эти остатки, фосфорилированные или нет, контролируют субклеточную локализацию эктопически экспрессируемого pp71.Неясно, как фосфорилирование влияет на локализацию или функцию pp71 при естественной экспрессии из вирусного генома во время инфекции. Рр71 также является SUMOилированным (Hwang and Kalejta, 2009), хотя роль этой модификации не была продемонстрирована. Также недавно сообщалось, что pp71 подвергается S-нитрозилированию белка, что может изменить его способность нарушать врожденную иммунную защиту хозяина (см. ниже) (Nukui et al., 2020). О других посттрансляционных модификациях pp71 не сообщалось.

Белки, которые взаимодействуют с pp71, были определены несколькими методами, включая двухгибридный скрининг дрожжей, масс-спектрометрию с вытягиванием и ко-иммунопреципитацию.Функции большинства вирусных (Phillips and Bresnahan, 2011; Nobre et al., 2019) и клеточных (Hofmann et al., 2002; Lee et al., 2012; Nobre et al. , 2019) взаимодействий неизвестны. Основные взаимодействующие факторы pp71, функции которых установлены и описаны ниже, включают Daxx, STING и семейство опухолевых супрессоров ретинобластомы (Rb).

Основными функциями pp71, по-видимому, являются контроль транскрипции вирусного ИЭ, регуляция клеточного цикла и уклонение от иммунитета.pp71 не обладает известной ферментативной активностью, хотя этот белок обладает гомологией с членами семейства dUTPase, но не имеет остатков, критических для каталитической функции (Davison and Stow, 2005). Ферментативной функцией, наиболее связанной с pp71, является протеолиз, при котором pp71 опосредует протеасомозависимую деградацию по крайней мере части белков, с которыми он связывается, включая Daxx (Saffert and Kalejta, 2006), BclAF1 (Lee et al., 2012) , и члены семейства Rb (Kalejta et al., 2003). В то время как для опосредованной pp71 деградации требуется убиквитин-связывающая регуляторная частица 19S протеасомы (Winkler et al., 2013), его субстраты разлагаются убиквитин-независимым образом (Kalejta, Shenk, 2003a; Hwang, Kalejta, 2007). Степень деградации других интеракторов pp71 и механизм убиквитин-независимой деградации еще предстоит выяснить.

В дополнение к опосредованию протеолиза других белков, сам pp71 подвергается протеолизу с помощью Granzyme M (Van Domselaar et al., 2010). Гранзимы секретируются иммунными клетками. Их проникновение в инфицированные клетки поддерживается совместно секретируемым перфорином.Внутри инфицированных клеток гранзимы расщепляют белковые субстраты и в конечном итоге приводят к гибели клеток путем апоптоза. Расщепление pp71 гранзимом М ингибирует его способность активировать репортерную конструкцию MIEP (Van Domselaar et al., 2010) и, таким образом, предположительно будет ингибировать продуктивную репликацию HCMV. Granzyme M расщепляет pp71 после аминокислоты лейцина в положении 439 (Van Domselaar et al., 2010) в области pp71, не имеющей известного функционального значения. Вирус, в котором лейцин в положении 439 pp71 заменен аланином (HCMV-pp71-L439A), чтобы сделать его нерасщепляемым Granzyme M, растет без комплементации в фибробластах in vitro (Лаура Винклер и Роб Калейта, неопубликованные наблюдения) , что приводит к вопросам, почему этот остаток, который придает иммунную восприимчивость, не подвергается отбору. Возможно, расщепление, опосредованное гранзимом М, инактивирует pp71 в контексте вирусной латентности, во время которой функция pp71 вредна для вируса (см. ниже). HCMV может использовать протеолиз pp71 как средство для определения того, является ли локальная иммунная среда негостеприимной для продуктивной репликации, и, если это так (если pp71 расщепляется гранзимом М), избегать реактивации. Следовательно, возможно, лейцин в положении 439 pp71 действительно был выбран для, а не против отбора.

Вход и снятие покрытия

Хотя он не играет известной или ожидаемой роли в процессе проникновения HCMV, судьба белка pp71, доставляемого в клетки инфекционными вирионами, играет важную роль в определении исхода инфекции HCMV.В дифференцированных клетках, таких как фибробласты и эпителиальные клетки, доставляемый тегументом pp71 быстро мигрирует в ядро и остается в нем (Hensel et al., 1996; Weng et al., 2018). Однако в моделях недифференцированных клеточных линий, используемых для изучения латентности (Lee et al. , 2019), а также в первичных гемопоэтических клетках-предшественниках CD34+, которые поддерживают латентность in vitro и in vivo , доставляемый тегументом pp71 остается в ловушке. в эндосомах, через которые проникает вирус, никогда не достигая ядра (Lee and Kalejta, 2019).Эти различные субклеточные локализации pp71, доставляемого тегументом, оказывают сильное влияние на способность белка влиять на вирусную транскрипцию (см. разделы «Хроматин и транскрипция» и «Латентность» ниже).

Хроматинизация и транскрипция

pp71 играет ключевую роль в стимулировании транскрипции вирусных генов IE в начале продуктивной репликации. Рекомбинантные вирусы, лишенные pp71, имеют нарушенную экспрессию гена IE и выраженный дефект репликации, особенно при низкой множественности заражения (Bresnahan, Shenk, 2000; Cantrell, Bresnahan, 2005).Хотя было показано, что pp71 трансактивирует MIEP (Liu and Stinski, 1992), механизм, который он использовал для этого, оставался неуловимым более десяти лет. Прорыв в том, как pp71 трансактивирует транскрипцию IE, произошел, когда было обнаружено, что pp71 взаимодействует с клеточным белком Daxx (Hofmann et al., 2002). Daxx, наряду с PML и Sp100, является важным компонентом ядерных тел PML (PML-NB), первоначально наблюдаемых как ядерные точки, реагирующие с аутоантигеном (Rothfield and Rodnan, 1968; Bernstein et al., 1984; Fritzler et al., 1984) и антитела Sp100 (Szostecki et al., 1990). В то время, когда было обнаружено, что pp71 взаимодействует с Daxx, PML-NB представляли собой загадку, потому что, хотя структуры в конечном итоге разрушались во время продуктивных инфекций герпесвирусами (Maul et al., 1993; Kelly et al., 1995) и аденовирусами (Korioth et al., 1995). al., 1995), вирусные геномы, по-видимому, специфически локализуются в этих структурах (Ishov and Maul, 1996) и инициируют вирусную транскрипцию рядом с ними (Ishov et al., 1997).Таким образом, PML-NB имели свойства, которые можно было рассматривать как провирусные, и другие, которые можно было рассматривать как противовирусные (Maul, 1998). Важно, что мутанты pp71, которым не удалось взаимодействовать с Daxx, также не смогли активировать репортер MIEP (Hofmann et al., 2002), показывая, что взаимодействие между pp71 и Daxx является критическим для функции трансактивации pp71. Повышение репортерной активности MIEP и локализации pp71 в PML-NB наблюдалось при совместной трансфекции Daxx и pp71, что привело к модели, в которой Daxx играл провирусную роль, рекрутируя pp71 в PML-NB, где pp71 трансактивировал экспрессию вирусного гена. (Хофманн и др., 2002). Впоследствии была подтверждена совместная локализация pp71 и Daxx в PML-NB (Ishov et al., 2002; Marshall et al., 2002), что привело к предположению, что pp71 способствует отложению генома HCMV и последующей транскрипции в PML-NB.

Хотя в ранних исследованиях были созданы модели, в которых ПМЛ-НБ действовали провирусным образом, поддерживая инфекцию ЦМВ (Hofmann et al., 2002; Ishov et al., 2002; Marshall et al., 2002), были также данные что указывает на то, что белки PML-NB могут быть противовирусными. Ингибирование клеточных гистоновых деацетилаз (HDAC), некоторые из которых частично локализованы в PML-NB, улучшало экспрессию генов литической фазы герпесвируса (Murphy et al., 2002; Tang and Maul, 2003). Более того, было обнаружено, что Daxx рекрутирует HDACs в интегрированные копии репортеров на основе Avian Sarcoma Virus (ASV) и репрессирует их транскрипцию (Greger et al., 2005). Кроме того, было замечено, что компоненты PML-NB повторно локализуются в поступающих геномах вируса простого герпеса типа 1 (HSV-1) (Everett and Murray, 2005), в отличие от вирусных геномов, ищущих существующие PML-NB.Действительно, более поздние работы (Diner et al., 2016; Everett, 2016) подтвердили, что белки PML-NB, а также ДНК-сенсор IFI16 мобилизуются к поступающим вирусным геномам во время инфекций HSV-1 и HCMV. Таким образом, ранние исследования также подразумевали ингибирующую роль белков PML-NB в отношении репликации вируса.

Помимо связывания Daxx, независимая работа показала, что pp71 также связывается с другими клеточными репрессорами транскрипции, а именно с опухолевыми супрессорами семейства Rb, Rb, p107 и p130, и индуцирует их протеасомозависимую, убиквитиннезависимую деградацию (Kalejta and Shenk , 2003a,b; Kalejta et al. , 2003). Когда было изучено влияние pp71 на устойчивые уровни Daxx, стало ясно, что pp71 достаточно для деградации Daxx при эктопической экспрессии в клетках и необходимо для деградации Daxx во время инфицирования HCMV (Saffert and Kalejta, 2006). Кроме того, нокдаун Daxx способствовал экспрессии гена IE HCMV (Cantrell and Bresnahan, 2006; Preston and Nicholl, 2006; Saffert and Kalejta, 2006; Woodhall et al., 2006). Эти эксперименты были одними из первых, в которых использовалась РНК-интерференция для изучения инфекции HCMV (Wiebusch et al., 2004; Wills et al., 2005) и предоставил первое убедительное доказательство того, что белок PML-NB (Daxx) не является провирусным, как предполагалось (Hofmann et al., 2002; Ishov et al., 2002), а на самом деле является противовирусное средство. Daxx был описан как ингибитор внутреннего иммунитета против HCMV (Saffert and Kalejta, 2006). Эти негативные эффекты Daxx на инфекции ЦМВ были быстро подтверждены и распространены на дополнительные белки PML-NB (рис. 2) ATRX, BclAF1, PML и Sp100 несколькими независимыми группами (Cantrell and Bresnahan, 2006; Everett et al., 2006; Престон и Николл, 2006 г.; Тавалай и др., 2006 г.; Лукащук и др., 2008; Адлер и др., 2011; Ли и др., 2012). С тех пор ингибирующее действие PML-NB на вирусные инфекции было систематизировано (Everett and Chelbi-Alix, 2007; Scherer and Stamminger, 2016), и теперь мы понимаем, что все вирусы герпеса человека, вероятно, кодируют белок тегумента, который может инактивировать внутреннюю защиту. (Либерман, 2016).

Рисунок 2 . Роль pp71 в контроле экспрессии и латентности вирусных генов.При инфицировании терминально дифференцированных клеток, таких как фибробласты и эпителиальные клетки (слева), тегумент, доставленный pp71, локализуется в ядре, где он инактивирует внутренние защитные белки Daxx, ATRX и BclAF1, ограничивая отложение гистонов и образование гетерохроматина на вирусном геноме, чтобы обеспечить транскрипционная активация генов вирусного ИЭ и продуктивная вирусная инфекция. Напротив, после инфицирования неполностью дифференцированных миелоидных клеток, таких как CD34+ HPC и моноциты (справа), доставленный тегументом pp71 остается захваченным в цитоплазматических эндосомах.В результате Daxx не подвергается деградации и способствует отложению гистонов и сборке репрессивного гетерохроматина на вирусных геномах в сочетании с ATRX и корепрессорным комплексом KAP1/SetDB1/HDAC. Сборка гетерохроматина приводит к репрессии MIEP, что позволяет установить латентность. MIEP: крупный немедленный ранний промоутер. Ac: ацетилирование гистонов. Я: метилирование гистонов.

Вместе Daxx и ATRX образуют комплекс гистоновых шаперонов, который откладывает независимый от репликации вариант гистонов h4.3 на ДНК (Drané et al., 2010; Lewis et al., 2010). Несмотря на отсутствие гистонов внутри вирионов, геномы HCMV быстро собираются в нуклеосомы при проникновении в ядро клеток-хозяев как во время продуктивной, так и во время латентной инфекции (Murphy et al., 2002; Nitzsche et al. , 2008). Этот процесс хроматинизации не требует ни экспрессии вирусных генов, ни репликации вирусной ДНК (Nitzsche et al., 2008; Albright and Kalejta, 2016). Поскольку эта начальная хроматинизация заражающих вирусных геномов опосредуется внутренними защитными белками, она может представлять собой предписанный клеточный ответ, направленный на подавление экспрессии чужеродной или ненуклеосомной ДНК (Penkert and Kalejta, 2012; Knipe, 2015).Гистон h4.3 ассоциирован с геномами HCMV как при продуктивной, так и при латентной инфекции (Albright and Kalejta, 2016). Нокдаун Daxx перед латентной инфекцией моноцитов THP-1 снижал занятость h4.3 вирусных геномов и повышал устойчивые уровни вирусных IE1/2 мРНК, которые обычно остаются низкими или отсутствуют в течение латентного периода (Albright and Kalejta, 2016). Интересно, что зависимые от репликации гистоны h4.1 и h4.2 также откладываются на латентных вирусных геномах Daxx-зависимым образом (Albright and Kalejta, 2016).h4.1 и h4.2 также депонируются на вирусных геномах при продуктивном инфицировании фибробластов (Albright, Kalejta, 2016). В соответствии с ролью pp71 в контроле отложения гистонов на вирусных геномах, рекомбинантный pp71-null вирус увеличивает занятость гистона h4 во время инфекции фибробластов (Albright and Kalejta, неопубликованные наблюдения).

Помимо своей роли шаперона гистонов, Daxx также взаимодействует с деацетилазами гистонов (HDAC), а также с корепрессором KAP1 и гистонметилтрансферазой h4K9 SetDB1, способствуя образованию гетерохроматина и репрессии транскрипции (Elsässer et al., 2015; Хелпер и др., 2017). Как во время продуктивной, так и во время латентной инфекции HCMV гистоны, связанные с вирусными геномами, изначально несут метки транскрипционно-репрессивного гетерохроматина, включая гипоацетилированные гистоны и метилирование в h4K9 и h4K27 (Murphy et al., 2002; Groves et al., 2009; Sourvinos et al., 2014; Ли и др., 2015). Нокдаун Daxx приводил к повышенным уровням ацетилированных гистонов и снижению уровней меток метилирования h4K9, связанных с геномами HCMV, как во время литического периода (Woodhall et al. , 2006) и латентной (Олбрайт и Калейта, неопубликованные наблюдения) инфекции ЦМВ. Как KAP1, так и SetDB1 связаны с латентными вирусными геномами, и нокдаун KAP1 приводил к снижению h4K9me3 и повышению уровней транскриптов IE1/2 и продуктивной репликации после инфицирования CD34+ HPC, в которых HCMV обычно устанавливает латентную инфекцию (Rauwel et al., 2015). . Т.о., ингибирование отложения гистонов и образования гетерохроматина с помощью pp71-опосредованной инактивации Daxx и ATRX, по-видимому, способствует созданию структуры вирусного хроматина, благоприятной для транскрипции, и является одним из способов, которым pp71 стимулирует экспрессию генов продуктивной фазы.

В дополнение к опосредованию деградации Daxx, pp71 также индуцирует SUMOylation Daxx (Hwang and Kalejta, 2009). Значение Daxx SUMOylation для инфекции HCMV неясно, поскольку эта модификация Daxx не требуется для деградации Daxx с помощью pp71 и, по-видимому, не оказывает существенного влияния на индукцию экспрессии гена IE, по крайней мере, в фибробластах (Hwang and Kalejta, 2009) . Однако Daxx SUMOylation предотвращает его связывание с NFkB и ингибирование ацетилирования и активации NFkB (Croxton et al., 2006; Парк и др., 2007 г.; Ким и др., 2017). MIEP HCMV содержит несколько сайтов связывания для NFkB (Meier and Stinski, 1996), а NFkB является общепризнанным активатором активности MIEP (DeMeritt et al., 2004; Liu et al., 2010; Yuan et al., 2015; Hancock). and Nelson, 2017), хотя сайты связывания NFkB в MIEP не требуются для продуктивной репликации в фибробластах (Gustems et al., 2006). Таким образом, pp71-опосредованное Daxx SUMOylation может способствовать NFkB-опосредованной активации MIEP, что может быть важно для эффективной экспрессии гена IE в определенных контекстах.

Задержка

Daxx-опосредованное замалчивание MIEP, которое ингибирует продуктивную литическую инфекцию (см. выше), фактически поддерживает установление латентности (Рис. 2). Во время латентного периода продуктивная репликация частично ингибируется за счет поддержания низкой или отсутствующей транскрипции и трансляции вирусных генов IE1 и IE2 (Sinclair and Reeves, 2013). Нокдаун Daxx активирует экспрессию генов продуктивной фазы во время латентного периода в недифференцированных миелоидных клетках (Saffert and Kalejta, 2007; Saffert et al., 2010), указывая на то, что Daxx подавляет экспрессию гена IE, чтобы поддерживать латентность HCMV. Следует отметить, что временного нокдауна Daxx было недостаточно для стимулирования экспрессии гена IE из штамма Toledo HCMV в модели латентности NT2 (Groves and Sinclair, 2007), вероятно, потому, что штаммы с низким пассажем сохраняют дополнительные вирусные факторы, способные подавлять MIEP, независимую активности Daxx и HDAC, которые могут маскировать эффекты нокдауна Daxx (Saffert et al., 2010; Lee et al., 2015). Таким образом, несмотря на то, что Daxx является противовирусным против продуктивной инфекции, он на самом деле является провирусным для установления латентного периода (Saffert and Kalejta, 2008).Однако эта провирусная роль Daxx (и, возможно, других белков PML-NB) во время латентного периода должна быть преодолена, чтобы позволить реактивацию к продуктивной репликации. Интересно, что вирусный белок, кодируемый цепью ДНК, комплементарной и частично перекрывающейся с геном UL82, который кодирует pp71, по-видимому, отвечает за инактивацию PML-NB во время реактивации. Белок LUNA (латентный уникальный природный антиген) (Bego et al., 2011) экспрессируется из транскрипта, антисмыслового по отношению к вирусным генам UL81 и UL82 (Bego et al., 2005), который, несмотря на название, не является уникальным для латентного периода, а экспрессируется и при литической инфекции (Keyes et al., 2012). LUNA необходима для реактивации (Keyes et al., 2012) и обладает деСУМОилазной активностью, которая разрушает PML-NB во время реактивации (Poole et al., 2018). Открытие того, что PML-NB разрушаются во время реактивации, подтверждает предыдущие результаты, показывающие, что основной компонент PML-NB, Daxx, подавляет экспрессию генов продуктивной фазы вируса во время латентного периода (Saffert and Kalejta, 2007, 2008; Saffert et al., 2010).

Daxx способен подавлять продуктивную фазу транскрипции HCMV во время латентного периода, поскольку он защищен от деградации доставляемым тегументом pp71, который остается в цитоплазме недифференцированных клеток, поддерживающих латентный период HCMV (Saffert and Kalejta, 2007; Saffert et al. , 2010). ; Олбрайт и Калейта, 2013; Пенкерт и Калейта, 2013; Ли и Калейта, 2019; Ли и др., 2019). Цитоплазматическая локализация pp71, доставляемого тегументом, была продемонстрирована во всех типах клеток, которые поддерживают экспериментальную латентность HCMV in vitro (Lee et al., 2019), включая первичные CD34+ гемопоэтические клетки-предшественники (Saffert et al., 2010; Lee and Kalejta, 2019). Ядерный импорт pp71, доставляемого тегументом, блокируется (Penkert and Kalejta, 2010), и белок остается связанным с эндосомами, через которые вирионы HCMV проникают в недифференцированные миелоидные клетки, в которых устанавливается латентность (Lee and Kalejta, 2019; Lee et al. , 2019). В то время как содержащие геном капсиды высвобождаются из эндосом, через которые вирус проникает как в дифференцированные клетки (продуктивная инфекция), так и в недифференцированные клетки (латентность) (Lee and Kalejta, 2019; Lee et al., 2019), оказывается, что еще не идентифицированный фактор, экспрессируемый только в дифференцированных клетках (Penkert and Kalejta, 2010), необходим для того, чтобы pp71 избежал эндосом, мигрировал в ядро, трансактивировал MIEP и инициировал продуктивную инфекцию. Важность опосредованной pp71 деградации Daxx и последующей инициации вирусной транскрипции для успешной продуктивной репликации и предотвращения этих событий для установления латентности делает понимание механизма цитоплазматической секвестрации pp71 первостепенным.

Хотя ясно, что pp71 играет решающую роль в инициации экспрессии вирусного гена IE в начале литической инфекции de novo , еще предстоит определить, играет ли он аналогичную роль во время реактивации из латентного периода. Как обсуждалось выше, доставляемый тегументом pp71 локализуется в эндосомах внутри не полностью дифференцированных клеток, в которых HCMV устанавливает и поддерживает латентность (Lee and Kalejta, 2019; Lee et al., 2019). Предположительно, HCMV может сохранять латентность в течение недель, месяцев или лет до реактивации.Маловероятно, чтобы pp71, доставленный тегументом, оставался бы присутствующим и способным индуцировать реактивацию после такого продолжительного периода времени. Интересно, что исследования реактивации HSV1 предполагают наличие двухфазного процесса реактивации, при котором за временной низкоуровневой дерепрессией всего вирусного генома следует классический регулируемый во времени каскад литической экспрессии генов, приводящий к амплификации вирусного генома и продуктивная репликация (Du et al. , 2011; Kim et al., 2012; Cliffe et al., 2015). Если такой процесс также происходит во время реактивации HCMV, он может обеспечить экспрессию de novo pp71, которая делает белок способным транслоцироваться в ядро (Saffert and Kalejta, 2007; Saffert et al., 2010), индуцируя деградацию Daxx. и трансактивация MIEP для облегчения устойчивой экспрессии генов литической фазы и полноценной реактивации. Такой сценарий будет аналогичен сценарию трансактиватора тегумента HSV-1 VP16, который экспрессируется de novo до реактивации и локализуется в ядре, чтобы способствовать эффективной реактивации (Thompson et al., 2009; Ким и др., 2012). Однако также возможно, что активация экспрессии гена IE во время реактивации HCMV происходит посредством механизмов, которые обходят требование pp71, либо потому, что LUNA-опосредованного нарушения PML-NB (Poole et al., 2018) достаточно для подавления MIEP и / или за счет использования альтернативных промоторных последовательностей для управления транскрипцией IE1/2 во время реактивации (Collins-McMillen et al. , 2019), зависимость которых от pp71 неизвестна. Определение роли pp71 во время реактивации, если таковая имеется, требует дополнительного исследования.

Перевод

Недавно было продемонстрировано, что

pp71 связывает РНК (Lenarcic et al., 2015), открытие, предвосхищенное онтологией его взаимодействующих белков (Lee et al., 2012). Фактически, было обнаружено, что один член интерактома pp71, RNA helicase DHX9, имеет усиленную ассоциацию с РНК в инфицированных HCMV клетках (Lenarcic et al., 2015), хотя необходимость pp71 для этого усиленного взаимодействия не проверялась. pp71 был обнаружен в полисомах и усиливал общую трансляцию белка в временно трансфицированных клетках HeLa (Lenarcic et al., 2015). Коэкспрессия UL35a, белка HCMV, который взаимодействует с pp71 (Schierling et al., 2004; Salsman et al., 2011), дополнительно увеличивает синтез белка. Интересно, что коэкспрессия pp71 индуцирует более медленную мигрирующую форму UL35a, что может согласовываться с SUMOилированием (Lenarcic et al. , 2015), указывая на то, что, как и его другой партнер по связыванию Daxx (Hwang and Kalejta, 2009, 2011), pp71 может индуцировать SUMOилирование UL35a. Функция связывания pp71 с DHX9 или РНК во время вирусной инфекции еще предстоит изучить.

Уклонение от иммунитета

Иммунная система человека состоит из внутренней, врожденной и адаптивной ветвей, и pp71 регулирует все три (рис. 3). Внутренний иммунитет (Bieniasz, 2004) опосредуется конститутивно экспрессируемыми белками, которые действуют прямым противовирусным образом. Для герпесвирусов, таких как HCMV, основной мерой внутренней иммунной защиты является опосредованная белком PML-NB хроматинизация и транскрипционное молчание вирусных геномов (Tavalai and Stamminger, 2009). Действительно, Daxx был первой внутренней иммунной защитой, нацеленной на вирус герпеса (Saffert and Kalejta, 2006), и нейтрализуется pp71-опосредованной протеасомозависимой, убиквитин-независимой деградацией (Hwang and Kalejta, 2007), как описано выше (см. Хроматин и транскрипция»).

Рисунок 3 . Роль pp71 в уклонении от иммунного ответа хозяина. pp71 противодействует внутренним, врожденным и адаптивным иммунным ответам. Входящие вирусные геномы становятся мишенью внутренней иммунной защиты, опосредованной белками PML-NB, что приводит к гетерохроматинизации и подавлению транскрипции. pp71 способствует уклонению от внутренней защиты путем инактивации компонентов PML-NB Daxx, ATRX и BclAF1 (см. рис. 2). Путь врожденного иммунного восприятия cGAS-STING-TBK1 запускается cGAS-распознаванием двухцепочечной ДНК, такой как вирусные геномы, которая передает сигналы через STING и TBK1, что в конечном итоге приводит к усилению интерферон-стимулируемых генов и воспалительных цитокинов.pp71 ингибирует этот путь, блокируя транслокацию STING из ER в аппарат Гольджи, где он взаимодействует с TBK1. Адаптивный иммунный ответ включает презентацию вирусных антигенов на клеточной поверхности через молекулы MHC класса I. pp71 ингибирует эту презентацию, нарушая перенос MHC класса I. Сам pp71 становится мишенью для иммунной системы посредством расщепления Granzyme M (GrzM). cGAMP: циклический GMP-AMP.

Врожденный иммунитет представляет собой широкий набор реакций, активируемых после того, как вирусные инфекции обнаруживаются посредством их патоген-ассоциированных молекулярных паттернов (PAMP) с помощью рецепторов распознавания паттернов (PRR) (Chan and Gack, 2016; Ni et al., 2018). Основная врожденная иммунная защита, активируемая при заражении ДНК-вирусом, опосредована путем cGAS-STING-TBK1 (Ahn and Barber, 2019). Циклическая GMP-AMP-синтаза (cGAS) синтезирует циклический GMP-AMP (cGAMP) при связывании с двухцепочечной ДНК, например, при инфицировании вирусных геномов. cGAMP, в свою очередь, связывает и активирует стимулятор генов интерферона (STING), вызывая фосфорилирование и активацию TANK-связывающей киназы-1 (TBK1). Затем TBK1 активирует клеточные факторы транскрипции, чтобы способствовать экспрессии ряда противовирусных, интерферон-стимулируемых генов и воспалительных цитокинов. pp71 нарушает этот путь, связываясь со STING и предотвращая его необходимую субклеточную транслокацию из ER в Golgi и его взаимодействие с TBK1 (Fu et al., 2017). Рр71-опосредованная инактивация STING имеет количественно меньший положительный эффект на репликацию HCMV, чем pp71-опосредованная инактивация Daxx (Cantrell and Bresnahan, 2006), вероятно, потому, что существует множество белков HCMV, которые инактивируют STING и другие врожденные иммунные пути (Stempel et al., 2006). al., 2019), но pp71 является единственным известным белком HCMV, противодействующим ингибирующим эффектам Daxx.Недавно сообщалось, что pp71 модифицируется S-нитрозилированием по цистеину 218 в его Rb-связывающем мотиве LxCxD (Nukui et al., 2020). Модификация этого остатка, по-видимому, ухудшает способность pp71 нацеливаться на путь cGAS-STING-TBK1, поскольку мутант pp71, который не может быть S-нитрозилирован в этом сайте, более сильно подавляет STING-опосредованные врожденные иммунные ответы в контексте как эктопической экспрессии, так и продуктивная вирусная инфекция (Nukui et al. , 2020). Как обсуждалось выше (см. «Модификации, взаимодействия, функции и активность pp71»), pp71 может расщепляться с помощью Granzyme M (Van Domselaar et al., 2010), протеаза, секретируемая клетками врожденной и адаптивной иммунной систем. Появляющиеся данные указывают на то, что опосредованное гранзимом М расщепление pp71 также частично восстанавливает путь cGAS-STING-TBK1 в клетках, инфицированных HCMV (Niels Bovenschen, личное сообщение), открывая дополнительные средства, с помощью которых врожденный и адаптивный иммунитет может препятствовать продуктивной репликации HCMV.

Адаптивный иммунитет — это высокоспецифический ответ на уникальные антигены, кодируемые патогенами, который не только действует прямым противовирусным путем, уничтожая вирусные частицы и инфицированные клетки, но и создает иммунологическую память, которая может реагировать быстрее и сильнее при повторном заражении вирусом. тот же возбудитель.У HCMV есть несколько способов избежать или нейтрализовать адаптивный иммунный ответ (Noriega et al. , 2012). Одним из таких методов является опосредованное pp71 подавление экспрессии на клеточной поверхности молекул Major Histocompatibility Complex (MHC) класса I (Trgovcich et al., 2006). Молекулы MHC класса I представляют собой внутренние пептиды на поверхности клетки. Если задействована цитотоксическая Т-клетка адаптивной иммунной системы, которая распознает представленный эпитоп, клетка погибает, останавливая вирусную инфекцию. pp71 может предотвращать перенос MHC класса I в аппарат Гольджи или через него, тем самым предотвращая его экспрессию на клеточной поверхности (Trgovcich et al., 2006). Неясно, может ли аналогичный механизм использоваться для изменения переноса компонента врожденного иммунитета STING и компонента адаптивного иммунитета MHC класса I. Интересно, что доставляемый тегументом pp71 увеличивает презентацию MHC класса I пептидов, полученных из HCMV непосредственно на ранней стадии. белок IE1 (Hesse et al., 2013), ген которого трансактивирован pp71. Возможно, pp71-опосредованное иммуносупрессивное подавление экспрессии клеточной поверхности MHC класса I уменьшает иммуностимулирующий эффект pp71-опосредованной активации вирусной транскрипции.

Клеточный цикл

pp71 переводит покоящиеся клетки G0 в S-фазу (Kalejta et al., 2003), индуцируя протеасомозависимую, убиквитин-независимую деградацию Rb-семейства опухолевых супрессоров (Kalejta and Shenk, 2003a), Rb, p107 и p130 (рис. 4). Rb-связывающий мотив LxCxD внутри pp71 необходим для индукции этого клеточного цикла. pp71 также ускоряет клетки через фазу G1 клеточного цикла (Kalejta and Shenk, 2003b) посредством механизма, в значительной степени независимого от его мотива LxCxD.Способность pp71 стимулировать развитие клеточного цикла несколькими способами может иметь важное значение для эффективной продуктивной репликации вируса и может способствовать пролиферативным заболеваниям, связанным с инфекцией HCMV, включая сердечно-сосудистые заболевания и рак.

Рисунок 4 . Роль pp71 в регуляции клеточного цикла. Члены семейства Rb блокируют переход клеточного цикла из G1 в S-фазу. pp71 способствует продвижению клеточного цикла из G1 в S-фазу путем связывания и индукции зависимой от протеасомы, независимой от убиквитина деградации белков Rb. МикроРНК miR21 может способствовать прогрессированию клеточного цикла путем подавления белков-супрессоров опухолей. Экспрессия pp71 может ингибировать уровни miR21 для точной настройки контроля клеточного цикла.

Белок Rb расщепляется pp71 в начале продуктивной инфекции HCMV (Hume et al., 2008), но повторно накапливается в более позднее время в виде ряда более медленно мигрирующих форм из-за фосфорилирования вирусной циклин-зависимой киназой, подобной (v- Cdk) белок UL97 (Hume et al., 2008; Prichard et al., 2008). Значение повторного появления Rb было неизвестно, пока не было продемонстрировано, что HCMV менее эффективно реплицируется в клетках с нокдауном Rb (VanDeusen and Kalejta, 2015a,b).Другой субстрат pp71, Daxx, также деградирует в ранние сроки, но вновь появляется позже при инфекции (Saffert and Kalejta, 2006). Однако, в отличие от Rb, нокдаун Daxx слегка усиливает продуктивную репликацию HCMV дикого типа (Cantrell and Bresnahan, 2006). В настоящее время неясно, глобально нарушена ли способность pp71 разлагать субстраты на поздних стадиях инфекции, или же некоторые субстраты pp71 просто повторно накапливаются (например, pp71 не может связывать фосфорилированные виды Rb, поэтому фосфорилирование, опосредованное UL97, может защищать Rb от pp71). -опосредованная деградация).

miR21 представляет собой микроРНК, тесно связанную с раком человека (Wu et al., 2015). Большинство мишеней miR21 являются белками-супрессорами опухолей, и поэтому они считаются онко-миР, хотя они также подавляют стимулирующую клеточный цикл фосфатазу CDC25A (Wang et al., 2009). Уровни miR21 снижены на 20% в клетках глиобластомы U-251MG, сконструированных для эктопической экспрессии pp71 (Fu et al., 2015). Роль miR21 или ее подавление с помощью pp71 во время инфекции HCMV остается неизвестной.

Патогенез

геномов и белков HCMV можно обнаружить в опухолях мультиформной глиобластомы (GBM) (Cobbs et al., 2002; Дзюжинский и др., 2012; Ранганатан и др., 2012 г.; Liu et al., 2017), а химические или иммунологические методы, направленные на ЦМВ, изучаются в качестве дополнительной терапии ГБМ (Foster et al., 2017). Хотя pp71, подобно онкобелкам других ДНК-опухолевых вирусов (Kalejta, 2004), инактивирует опухолевые супрессоры Rb (Kalejta and Shenk, 2003a,b; Kalejta et al. , 2003), нет никаких доказательств того, что HCMV в целом или pp71 в в частности, стимулирует деление онкогенных клеток в вирус-позитивных ГБМ. Однако в клетках ГБМ экспрессия pp71 активирует путь NFkB, что приводит к увеличению экспрессии генов, участвующих в воспалительной реакции, ремоделировании тканей и ангиогенезе (Matlaf et al., 2013). Такой ответ теоретически может способствовать выживанию опухолевых клеток и их метастазированию. Интересно, что мутации Daxx, ATRX или гистона h4.3, которые они откладывают, широко распространены в детских глиобластомах (Schwartzentruber et al., 2012). Поскольку серопозитивность HCMV увеличивается с возрастом (Bate et al., 2010), возможно, pp71-опосредованная инактивация Daxx исключает необходимость мутации этого пути у взрослых с HCMV-позитивными опухолями. Недавно было показано, что Daxx и опухолевой супрессор гомолога фосфатазы и тензина (PTEN) имеют синтетическую летальную связь при глиобластомах, где нокдаун Daxx нарушал рост опухоли в PTEN-отрицательных, но не PTEN-положительных опухолевых клетках (Benitez et al. , 2017). Таким образом, было бы интересно определить, существует ли обратная связь между положительной реакцией на HCMV и мутацией PTEN у взрослых с ГБМ.

До 1% новорожденных инфицированы врожденными инфекциями HCMV, которые могут вызывать пожизненные неврологические проблемы, включая микроцефалию, психические дефекты и потерю слуха (Britt, 2018; Permar et al., 2018). Вирус может инфицировать нервные клетки-предшественники, где экспрессия pp71 приводит к небольшому снижению устойчивых уровней JAG1 и NICD1, компонентов пути Notch (Li et al., 2015). Неясно, влияет ли наблюдаемое умеренное подавление на функцию пути Notch для пролиферации или дифференцировки в этих клетках, или приводит ли это подавление с помощью pp71 к каким-либо последствиям во время врожденных инфекций.

Наконец, в дополнение к патогенезу, подходы к вакцинам, основанные на исследованиях функций pp71, являются многообещающими новыми средствами для лечения или предотвращения патогенеза, вызванного HCMV. В качестве потенциальных вакцин разрабатываются векторы на основе цитомегаловируса резуса (RhCMV) (Hansen et al., 2011) для множественных инфекций, включая вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), вызывающий СПИД. Векторы RhCMV, экспрессирующие антигены вируса иммунодефицита обезьян (SIV), контролировали и даже устраняли патогенные инфекции SIV у макак-резусов (Hansen et al., 2013). Удаление гомолога pp71 в геноме RhCMV (Rh210) привело к получению вакцинного вектора, который хорошо реплицировался in vitro , но плохо реплицировался in vivo . Однако иммуногенность вакцины и ее защита от инфекции SIV оставались такими же, как у вакцины дикого типа (Hansen et al., 2019; Маршалл и др., 2019). Таким образом, создание аттенуированного вируса путем удаления вирусного ингибитора внутреннего иммунитета, по-видимому, позволило создать более безопасный вакцинный вектор.

Резюме

Значительные усилия со стороны многих лабораторий установили, что pp71 является многофункциональным белком, который регулирует различные клеточные и вирусные процессы. Стимуляция транскрипции вирусного ИЭ посредством инактивации внутренней иммунной защиты посредством деградации Daxx является критической функцией pp71 во время продуктивной репликации, но отсутствует во время латентного периода из-за цитоплазматической секвестрации pp71, доставляемого тегументом.Другие функции pp71 в регуляции прогрессирования клеточного цикла и уклонении от врожденных и адаптивных иммунных ответов, по-видимому, в значительной степени необязательны для продуктивной репликации вируса в фибробластах, вероятно, из-за функциональной избыточности, обеспечиваемой другими вирусными белками. Эти функции pp71 могут играть более важную роль в других типах клеток или контекстах инфекции. Детали механизмов многих функций pp71 остаются неясными. Хотя ясно, что pp71 разрушает по крайней мере подмножество своих мишеней зависимым от протеасом и независимым от убиквитина образом, детали этого процесса еще предстоит осветить.Субклеточная локализация pp71 явно является важной контрольной точкой в регуляции его функции, которая, по-видимому, диктуется как фосфорилированием, так и плохо определенным процессом снятия оболочки вириона, но специфики не хватает. Продолжающееся изучение функций и регуляции pp71 обещает раскрыть новые взгляды на восприятие поступающих вирусных геномов, хроматинизацию вирусного генома и эпигенетическую модификацию, а также на то, как модуляция прогрессирования клеточного цикла и каждого плеча иммунной системы способствует значительному патогенезу. связаны с HCMV-инфекцией.

Вклад авторов

Все перечисленные авторы внесли существенный, непосредственный и интеллектуальный вклад в работу и одобрили ее для публикации.

Финансирование

Работа в лаборатории авторов финансируется Национальными институтами здравоохранения (АИ130089 и АИ139180 в РК).

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Ссылки

Адлер М., Тавалаи Н., Мюллер Р. и Штаммингер Т. (2011). Немедленно-ранняя экспрессия генов цитомегаловируса человека ограничена компонентом Sp100 ядерного домена 10. Дж. Генерал Вирол . 92, 1532–1538. doi: 10.1099/vir.0.030981-0