Posted in Разное

Реакции биосинтеза белка в которых последовательность триплетов в ирнк: Реакции биосинтеза белка, в которых последовательность триплетов в иРНК обеспечивает последовательность аминокислот в молекуле белка, называют:

Содержание

Тест «Биосинтез белка»

1. Сколь­ко ами­но­кис­лот ко­ди­ру­ет 900 нук­лео­ти­дов

1) 100
2) 200
3) 300
4) 400

2. В про­цес­се пла­сти­че­ско­го об­ме­на

1) более слож­ные уг­ле­во­ды син­те­зи­ру­ют­ся из менее слож­ных
2) жиры пре­вра­ща­ют­ся в гли­це­рин и жир­ные кис­ло­ты
3) белки окис­ля­ют­ся с об­ра­зо­ва­ни­ем уг­ле­кис­ло­го газа, воды, азот­со­дер­жа­щих ве­ществ
4) про­ис­хо­дит осво­бож­де­ние энер­гии и син­тез АТФ

3. Еди­ный ап­па­рат био­син­те­за белка

1) эн­до­плаз­ма­ти­че­ская сеть и ри­бо­со­мы
2) ми­то­хон­дрии и кле­точ­ный центр
3) хло­ро­пла­сты и ком­плекс Голь­д­жи
4) ли­зо­со­мы и плаз­ма­ти­че­ская мем­бра­на

4. Прин­цип ком­пле­мен­тар­но­сти (до­пол­ни­тель­но­сти) лежит в ос­но­ве вза­и­мо­дей­ствия

1) ами­но­кис­лот и об­ра­зо­ва­ния пер­вич­ной струк­ту­ры белка
2) нук­лео­ти­дов и об­ра­зо­ва­ния дву­це­по­чеч­ной мо­ле­ку­лы ДНК

3) глю­ко­зы и об­ра­зо­ва­ния мо­ле­ку­лы по­ли­са­ха­ри­да клет­чат­ки
4) гли­це­ри­на и жир­ных кис­лот и об­ра­зо­ва­ния мо­ле­ку­лы жира

5. Прин­цип ком­пле­мен­тар­но­сти лежит в ос­но­ве об­ра­зо­ва­ния во­до­род­ных свя­зей между

1) ами­но­кис­ло­та­ми и мо­ле­ку­ла­ми белка
2) нук­лео­ти­да­ми в мо­ле­ку­ле ДНК
3) гли­це­ри­ном и жир­ной кис­ло­той в мо­ле­ку­ле жира
4) глю­ко­зой в мо­ле­ку­ле клет­чат­ки

6. В ос­но­ве об­ра­зо­ва­ния пеп­тид­ных свя­зей между ами­но­кис­ло­та­ми в мо­ле­ку­ле белка лежит

1) прин­цип ком­пле­мен­тар­но­сти
2) не­рас­тво­ри­мость ами­но­кис­лот в воде
3) рас­тво­ри­мость ами­но­кис­лот в воде
4) на­ли­чие в них карбок­силь­ной и амин­ной групп

7. Пла­сти­че­ский обмен в клет­ках жи­вот­ных не может про­ис­хо­дить без энер­ге­ти­че­ско­го, так как энер­ге­ти­че­ский обмен обес­пе­чи­ва­ет клет­ку

1) фер­мен­та­ми
2) мо­ле­ку­ла­ми белка

3) мо­ле­ку­ла­ми АТФ
4) кис­ло­ро­дом

8. Сход­ство про­цес­са об­ме­на ве­ществ в клет­ках рас­те­ний и жи­вот­ных со­сто­ит в том, что в них про­ис­хо­дит

1) об­ра­зо­ва­ние ге­мо­гло­би­на
2) био­син­тез белка
3) хе­мо­син­тез
4) бро­же­ние

9. Мат­ри­цей для транс­ля­ции слу­жит мо­ле­ку­ла

1) тРНК
2) ДНК
3) рРНК
4) иРНК

10. Роль мат­ри­цы в син­те­зе мо­ле­кул и-РНК вы­пол­ня­ет

1) по­ли­пеп­тид­ная нить
2) плаз­ма­ти­че­ская мем­бра­на
3) мем­бра­на эн­до­плаз­ма­ти­че­ской сети
4) одна из цепей мо­ле­ку­лы ДНК

11. Ин­фор­ма­ция о по­сле­до­ва­тель­но­сти рас­по­ло­же­ния ами­но­кис­лот в мо­ле­ку­ле белка пе­ре­пи­сы­ва­ет­ся в ядре с мо­ле­ку­лы ДНК на мо­ле­ку­лу

1) АТФ
2) р-РНК
3) т-РНК
4) и-РНК

12. В ри­бо­со­ме при био­син­те­зе белка рас­по­ла­га­ют­ся два три­пле­та и-РНК, к ко­то­рым в со­от­вет­ствии с прин­ци­пом ком­пле­мен­тар­но­сти при­со­еди­ня­ют­ся ко­до­вые три­пле­ты

1) ДНК
2) р-РНК
3) белка
4) т-РНК

13.В ос­но­ве каких ре­ак­ций об­ме­на лежит мат­рич­ный прин­цип

1) син­те­за мо­ле­кул АТФ
2) сбор­ки мо­ле­кул белка из ами­но­кис­лот
3) син­те­за глю­ко­зы из уг­ле­кис­ло­го газа и воды
4) об­ра­зо­ва­ния ли­пи­дов

14. Все ре­ак­ции син­те­за ор­га­ни­че­ских ве­ществ в клет­ке про­ис­хо­дят с

1) осво­бож­де­ни­ем энер­гии
2) ис­поль­зо­ва­ни­ем энер­гии
3) рас­щеп­ле­ни­ем ве­ществ
4) об­ра­зо­ва­ни­ем мо­ле­кул АТФ

15. В чем про­яв­ля­ет­ся вза­и­мо­связь пла­сти­че­ско­го и энер­ге­ти­че­ско­го об­ме­на

1) пла­сти­че­ский обмен по­став­ля­ет ор­га­ни­че­ские ве­ще­ства для энер­ге­ти­че­ско­го
2) энер­ге­ти­че­ский обмен по­став­ля­ет кис­ло­род для пла­сти­че­ско­го
3) пла­сти­че­ский обмен по­став­ля­ет ми­не­раль­ные ве­ще­ства для энер­ге­ти­че­ско­го

4) пла­сти­че­ский обмен по­став­ля­ет мо­ле­ку­лы АТФ для энер­ге­ти­че­ско­го

16. Ре­ак­ции био­син­те­за белка, в ко­то­рых по­сле­до­ва­тель­ность три­пле­тов в иРНК обес­пе­чи­ва­ет по­сле­до­ва­тель­ность ами­но­кис­лот в мо­ле­ку­ле белка, на­зы­ва­ют

1) гид­ро­ли­ти­че­ски­ми
2) мат­рич­ны­ми
3) фер­мен­та­тив­ны­ми
4) окис­ли­тель­ны­ми

17. Какая по­сле­до­ва­тель­ность пра­виль­но от­ра­жа­ет путь ре­а­ли­за­ции ге­не­ти­че­ской ин­фор­ма­ции

1) ген —> иРНК —> белок —> при­знак
2) при­знак —> белок —> иРНК —> ген —> ДНК
3) иРНК —> ген —> белок —> при­знак
4) ген —> ДНК —> при­знак —> белок

18.  В про­цес­се пла­сти­че­ско­го об­ме­на в клет­ках син­те­зи­ру­ют­ся мо­ле­ку­лы

1) бел­ков
2) воды
3) АТФ
4) не­ор­га­ни­че­ских ве­ществ

19. Всю со­во­куп­ность хи­ми­че­ских ре­ак­ций в клет­ке на­зы­ва­ют

1) фо­то­син­те­зом
2) хе­мо­син­те­зом
3) бро­же­ни­ем
4) ме­та­бо­лиз­мом

20. Пер­вич­ная струк­ту­ра мо­ле­ку­лы белка, за­дан­ная по­сле­до­ва­тель­но­стью нук­лео­ти­дов иРНК, фор­ми­ру­ет­ся в про­цес­се

1) транс­ля­ции
2) тран­скрип­ции
3) ре­ду­пли­ка­ции
4) де­на­ту­ра­ции

21.Пла­сти­че­ский обмен в клет­ке ха­рак­те­ри­зу­ет­ся

1) рас­па­дом ор­га­ни­че­ских ве­ществ с осво­бож­де­ни­ем энер­гии
2) об­ра­зо­ва­ни­ем ор­га­ни­че­ских ве­ществ с на­коп­ле­ни­ем в них энер­гии
3) вса­сы­ва­ни­ем пи­та­тель­ных ве­ществ в кровь
4) пе­ре­ва­ри­ва­ни­ем пищи с об­ра­зо­ва­ни­ем рас­тво­ри­мых ве­ществ

22. Какой ан­ти­ко­дон транс­порт­ной РНК со­от­вет­ству­ет три­пле­ту ТГА в мо­ле­ку­ле ДНК

1) АЦУ
2) ЦУГ
3) УГА
4) АГА

23. Какой три­плет в мо­ле­ку­ле ин­фор­ма­ци­он­ной РНК со­от­вет­ству­ет ко­до­во­му три­пле­ту ААТ в мо­ле­ку­ле ДНК

1) УУА
2) ТТА
3) ГГЦ
4) ЦЦА

24. Какой три­плет в тРНК ком­пле­мен­та­рен ко­до­ну ГЦУ на иРНК

1) ЦГТ
2) АГЦ
3) ГЦТ
4) ЦГА

25. Какой три­плет на ДНК со­от­вет­ству­ет ко­до­ну УГЦ на и-РНК?

1) ТГЦ
2) АГЦ
3) ТЦГ
4) АЦГ

26. Новые белки рас­ти­тель­но­го ор­га­низ­ма син­те­зи­ру­ют­ся

1) в ми­то­хон­дри­ях
2) на ри­бо­со­мах
3) в хло­ро­пла­стах
4) в ли­зо­со­мах

27. Син­тез белка на ри­бо­со­мах пре­кра­ща­ет­ся в мо­мент, когда

1) за­кон­чи­ва­ет­ся син­тез иРНК на ДНК
2) кодон иРНК встре­ча­ет­ся с ан­ти­ко­до­ном тРНК
3) по­яв­ля­ет­ся три­плет – знак пре­пи­на­ния на ДНК
4) ри­бо­со­ма «до­хо­дит» до стоп-ко­до­на иРНК

28. В мо­ле­ку­ле ДНК ко­ли­че­ство нук­лео­ти­дов с ти­ми­ном со­став­ля­ет 20% от об­ще­го числа. Какой про­цент нук­лео­ти­дов с ци­то­зи­ном в этой мо­ле­ку­ле?

1) 30%
2) 40%
3) 60%
4) 80%

29.Роль транс­порт­ной РНК в клет­ке эу­ка­ри­от за­клю­ча­ет­ся в

1) пе­ре­да­че ин­фор­ма­ции о струк­ту­ре бел­ков
2) транс­пор­те ами­но­кис­лот к ри­бо­со­мам
3) транс­пор­те иРНК из ядра в ци­то­плаз­му
4) удво­е­нии ин­фор­ма­ции

30.. Био­ло­ги­че­ский смысл ге­те­ро­троф­но­го пи­та­ния за­клю­ча­ет­ся в

1) син­те­зе ор­га­ни­че­ских со­еди­не­ний из не­ор­га­ни­че­ских
2) по­треб­ле­нии не­ор­га­ни­че­ских со­еди­не­ний
3) по­лу­че­нии стро­и­тель­ных ма­те­ри­а­лов и энер­гии для кле­ток
4) син­те­зе АДФ и АТФ

31. Опре­де­ли­те по­сле­до­ва­тель­ность ан­ти­ко­до­нов т-РНК, если и-РНК сняла ин­фор­ма­цию с фраг­мен­та ДНК, име­ю­ще­го по­сле­до­ва­тель­ность нук­лео­ти­дов АГЦ-ТТА-ГЦТ.

1) АУТ-ЦАГ-УУА
2) АГЦ-УУА-ГЦУ
3) ТЦГ-ААТ-ЦГА

4) ЦГА-УАГ-ЦУЦ

32. Одной и той же ами­но­кис­ло­те со­от­вет­ству­ет ан­ти­ко­дон АУУ транс­порт­ной РНК и три­плет на ДНК —

1) ТАА
2) ААА
3) АТТ
4) УТТ

33. К пла­сти­че­ско­му об­ме­ну от­но­сят про­цесс

1) био­син­те­за белка
2) рас­щеп­ле­ния РНК
3) ды­ха­ния
4) гли­ко­ли­за

34. В ре­зуль­та­те ка­ко­го про­цес­са в клет­ке син­те­зи­ру­ют­ся ли­пи­ды?

1) дис­си­ми­ля­ции
2) био­ло­ги­че­ско­го окис­ле­ния
3) пла­сти­че­ско­го об­ме­на
4) гли­ко­ли­за

35. По­сле­до­ва­тель­ность три­пле­тов в иРНК опре­де­ля­ет

1) об­ра­зо­ва­ние вто­рич­ной струк­ту­ры мо­ле­ку­лы белка
2) по­ря­док со­еди­не­ния ами­но­кис­лот в белке
3) син­тез тРНК на ДНК
4) ско­рость син­те­за по­ли­пеп­тид­ной цепи

36. Вы­бе­ри­те пра­виль­ное утвер­жде­ние: клет­ки лю­бо­го ор­га­низ­ма

1) раз­мно­жа­ют­ся мей­о­зом
2) син­те­зи­ру­ют белки

3) фо­то­син­те­зи­ру­ют
4) имеют ми­то­хон­дрии

37. Три­пле­ты на иРНК, не опре­де­ля­ю­щие по­ло­же­ния ами­но­кис­лот в мо­ле­ку­ле белка, обес­пе­чи­ва­ют

1) окон­ча­ние транс­ля­ции
2) раз­де­ле­ние гена на части
3) на­ча­ло ре­пли­ка­ции
4) за­пуск тран­скрип­ции

Биосинтез белка (реализация наследственной информации)

Важнейшие функции организма — обмен веществ, рост, развитие, передача наследственности, движение и др. — осуществляются в результате множества химических реакций с участием белков, нуклеиновых кислот и других биологически активных веществ. При этом в клетках непрерывно синтезируются разнообразные соединения: строительные белки, белки-ферменты, гормоны. В ходе обмена эти вещества изнашиваются и разрушаются, а вместо них образуются новые. Поскольку белки создают материальную основу жизни и ускоряют все реакции обмена веществ, жизнедеятельность клетки и организма в целом определяется способностью клеток синтезировать специфические белки. Их первичная структура предопределена генетическим кодом в молекулеДНК.

Молекулы белков состоят из десятков и сотен аминокислот (точнее, из аминокислотных остатков). Например, в молекуле гемоглобина их около 600, и они распределены в четыре полипептидные цепочки; в молекуле рибонуклеазы таких аминокислот 124 и т. д.

Главная роль в определении первичной структуры белка принадлежит молекулам ДНК. Разные ее участки кодируют синтез разных белков, следовательно, одна молекула ДНК участвует в синтезе многих индивидуальных белков. Свойства белков зависят от последовательности аминокислот в полипептидной цепи. В свою очередь чередование аминокислот определяется последовательностью нуклеотидов в ДНК, и каждой аминокислоте соответствует определенный триплет. Экспериментально доказано, что, например, участок ДНК с триплетом ААЦ соответствует аминокислоте лейцину, триплет АЦЦ — триптофану, триплет АЦА-цистеину и т.д. Распределив молекулу ДНК на триплеты, можно представить, какие аминокислоты и в какой последовательности будут располагаться в молекуле белка. Совокупность триплетов составляет материальную основу генов, а каждый ген содержит информацию о структуре специфического белка (ген — это основная биологическая единица наследственности; в химическом отношении ген есть участок ДНК, включающий несколько сотен пар нуклеотидов).

Генетический код — исторически сложившаяся организация молекул ДНК и РНК, при которой последовательность нуклеотидов в них несет информацию о последовательности аминокислот в белковых молекулах. Свойства кода: триплетность (кодон), неперекрываемость (кодоны следуют друг за другом), специфичность (один кодон может определять в полииептидной цепи только одну аминокислоту), универсальность (у всех живых организмов один и тот же кодон обусловливает включение в полипептид одну и ту же аминокислоту), избыточность (для большинства аминокислот существует несколько кодонов). Триплеты, не несущие информации об аминокислотах, являются стоп триплетами, обозначающими место начала синтеза и-РНК. (В.Б. Захаров. Биология. Справочные материалы. М.,1997)

Поскольку ДНК находится в ядре клетки, а синтез белка происходит в цитоплазме, существует посредник, передающий информацию с ДНК на рибосомы. Таким посредником служит и РНК, на которую нуклеотидная последовательность переписывается, в точном соответствии с таковой на ДНК — по принципу комплементарности. Этот процесс получил название транскрипции и протекает как реакция матричного синтеза. Он характерен только для живых структур и лежит в основе важнейшего свойства живого — самовоспроизведения. Биосинтезу белка предшествует матричный синтез иРНК на нити ДНК. Возникшая при этом иРНК выходит из ядра клетки в цитоплазму, где на нее нанизываются рибосомы, сюда же с помощью тРЙК доставляются аминокислоты.

Синтез белка — сложный многоступенчатый процесс, в котором участвуют ДНК, иРНК, тРНК, рибосомы, АТФ и разнообразные ферменты. Вначале аминокисдоты в цитоплазме активируются с помощью ферментов и присоединяются к тРНК (к участку, где расположен нуклеотид ЦЦА). На следующем этапе идет соединение аминокислот в таком порядке, в каком чередование нуклеотидов с ДНК передано на иРНК. Этот этап называется трансляцией. На нити иРНК размещается не одна рибосома, а группа их — такой комплекс называется полисома (Н.Е. Ковалев, Л.Д. Шевчук, О.И. Щуренко. Биология для подготовительных отделений медицинских институтов).

Схема Биосинтез белка

Синтез белка состоит из двух этапов — транскрипции и трансляции.

I. Транскрипция (переписывание) — биосинтез молекул РНК, осуществляется в хромосомах на молекулах ДНК по принципу матричного синтеза. При помощи ферментов на соответствующих участках молекулы ДНК (генах) синтезируются все виды РНК (иРНК, рРНК, тРНК). Синтезируется 20 разновидностей тРНК, так как в биосинтезе белка принимают участие 20 аминокислот. Затем иРНК и тРНК выходят в цитоплазму, рРНК встраивается в субъединицы рибосом, которые также выходят в цитоплазму.

II. Трансляция (передача) — синтез полипептидных цепей белков, осуществляется в рибосомах. Она сопровождается следующими событиями:

1. Образование функционального центра рибосомы — ФЦР, состоящего из иРНК и двух субъединиц рибосом. В ФЦР всегда находятся два триплета (шесть нуклеотидов) иРНК, образующих два активных центра: А (аминокислотный) — центр узнавания аминокислоты и П (пептидный) — центр присоединения аминокислоты к пептидной цепочке.

2. Транспортировка аминокислот, присоединенных к тРНК, из цитоплазмы в ФЦР. В активном центре А осуществляется считывание антикодона тРНК с кодоном иРНК, в случае комплементарностн возникает связь, которая служит сигналом для продвижения (скачок) вдоль иРНК рибосомы на один триплет. В результате этого комплекс «кодон рРНК и тРНК с аминокислотой» перемещается в активный центр П, где и происходит присоединение аминокислоты к пептидной цепочке (белковой молекуле). После чего тРНК покидает рибосому.

3. Пептидная цепочка удлиняется до тех пор, пока не закончится трансляция и рибосома не соскочит с иРНК. На одной иРНК может умещаться одновременно несколько рибосом (полисома). Полипептидная цепочка погружается в канал эндоплазматиче-ской сети и там приобретает вторичную, третичную или четвертичную структуру. Скорость сборки одной молекулы белка, состоящего из 200-300 аминокислот, составляет 1-2 мин. Формула биосинтеза белка: ДНК (транскрипция) —> РНК (трансляция) —> белок.


Завершив один цикл, полисомы могут принять участие в синтезе новых молекул белка.

Отделившаяся от рибосомы молекула белка имеет вид нити, которая биологически неактивна. Биологически функциональной она становится после того, как молекула приобретает вторичную, третичную и четвертичную структуру, т. е. определенную пространственно специфическую конфигурацию. Вторичная и последующие структуры белковой молекулы предопределены в информации, заложенной в чередовании аминокислот, т. е. в первичной структуре белка. Иначе говоря, программа образования глобулы, ее уникальная конфигурация определяются первичной структурой молекулы, которая в свою очередь строится под контролем соответствующего гена.

Скорость синтеза белка обусловлена многими факторами : температурой среды, концентрацией водородных ионов, количеством конечного продукта синтеза, присутствием свободных аминокислот, ионов магния, состоянием рибосом и др.

Клетка. История изучения. Клеточная теория

Клетка. История изучения. Клеточная теория — страница №2/2



Биосинтез белка. Генетический код.

1.Реакции биосинтеза белка, в которых последовательность триплетов в иРНК обеспечивает последовательность аминокислот в молекуле белка, называют:

А.гидролитическими

Б. матричными

В.ферментативными

Г. Окислительными


2.Какая последовательность правильно отражает путь реализации генетичексой информации?

А. ген –иРНК – белок -признак

Б. признак – белок – иРНК – ген – ДНК

В. иРНК – ген – беок –признак

Г. Ген – ДНК – пизнак – белок
3. Роль матрицы в синтезе молекул иРНК выполняет:

А. полипептидная цепь

Б. плазматическая мембрана

В. Мембрана ЭПС

Г. Одна из цепей молекулы ДНК
4. Антикодону ААУ на тРНК соответствует триплет на ДНК:

А. ТТА


Б.ААТ

В.ААА


Г. ТТТ
5. Белок состоит из 50 аминокислотных остатков. Сколько нуклеотидов в гене, в котором закодирована первичная структура белка?а. 50

Б. 100


В. 150

Г. 250
6. Информация о последовательности расположения аминокислот в молекуле белка переписывается в ядре с молекулы ДНК на молекулу:

А. АТФ

Б.рРНК


В.тРНК

Г.иРНК


7.В рибосоме при биосинтезе белка располагаются два триплета иРНК, к которым в соответствии с принципом комплементарности присоединяются кодовые триплеты:

А. ДНК


Б.рРНК

В.белка


Г. тРНК

8. В основе каких реакций обмена лежит матричный синтез?

А. синтез молекул АТФ

Б. сборки молекул белка из аминокислот

В. Синтеза глюкозы из углекислого газа и воды

Г. Образования липидов

9. Генетический код определяет принцип записи информации о:

А. последовательности аминокислот в молекуле белка

Б. транспорте иРНК в клетке

В. Расположения глюкозы в молекуле крахмала

Г. Числе рибосом на ЭПС

10. Определенной последовательностью трех нуклеотидов зашифрована в клетке каждая молекула

А. аминокислоты

Б. глюкозы

Б. крахмала

Г. Глицерина

11. Какой триплет в молекуле иРНК соответствует кодовому триплету ААТ в молекуле ДНК?

А. УУА


Б.ТТА

В.ГГЦ


Г. ЦЦА

12.В молекуле ДНК КОЛИЧЕСТВО НУКЛЕОТИДОВ С ГУАНИНОМ СОСТАВЛЯЕТ 10% ОТ ОБЩЕГО ЧИСЛА. Сколько нуклеотидов с аденином в этой молекуле?

А. 10%

Б.20%


В. 40%

Г. 90%


Тестирование по биологии в 10 классе

Вариант 1.

I. «Один из четырёх»


  1. Изучением многообразия организмов, их классификацией занимается наука:

а. генетика

б. систематика

в. физиология

г.экология

2.Обмен веществ и превращение энергии – это признак:

А. характерный для тел живой и неживой природы

Б. по которому живое можно отличить от неживого

В. по которому одноклеточные организмы отличаются от многоклеточных

Г. по которому животные отличаются от человека

3. Строение и функции молекул белка изучают на уровне организации живого:

А. организменном

Б. тканевом

В. молекулярном

Г. популяционном

4. Программа о первичной структуре молекул белка зашифрована в молекулах:

А. тРНК


Б. ДНК

В. липидов

Г. полисахаридов

5.АТФ образуется в процессе:

А. синтеза разложения белка

Б. разложения крахмала с образованием глюкозы

В. окисления органических веществ в клетке

Г. фагоцитоза

6. основная функция митохондрий :

А. редупликация ДНК

Б. биосинтез белка

В. синтез АТФ

Г. синтез углеводов

7. Всю совокупность химических реакций в клетке называют:

А. фотосинтезом

Б. хемосинтезом

В. брожением

Г. метаболизмом

8. Пластический обмен к клетке характеризуется:
А. распадом органических веществ с освобождением энергии

Б. образованием органических веществ с накоплением в них энергии

В. всасыванием питательных веществ в кровь

Г. перевариванием пищи с образованием растворимых веществ


  1. Растительная клетка, как и животная, получает энергию в процессе:

а. окисления органических веществ

б. биосинтеза белка

в. синтеза липидов

г. синтеза нуклеиновых кислот

10. Информация о последовательности расположения аминокислот в молекуле белка переписывается в ядре с молекулы ДНК на молекулу:

а. АТФ


б. рРНК

в. тРНК


г. иРНК
II. Установите соответствие между признаком нуклеиновой кислоты и её видом.

Признак нуклеиновой кислоты:
А. состоит из двух полинуклеотидных цепей, спирально закрученных.

Б. состоит из одной неспирализованной полинуклеотидной цепи

В. передает наследственную информацию из ядра к рибосоме

Г. является хранителем наследственной информации

Д. состоит из нуклеотидов: АТГЦ

Е. состоит из нуклеотидов: АУГЦ


Вид нуклеиновой кислоты:

  1. ДНК

  2. РНК

Вариант 2.

I. «Один из четырех»
1.Какая наука позволяет ориентироваться в огромном многообразии организмов:

А. экология

Б. биология

В. систематика

Г. Ботаника

2.К какому уровню организации живой природы относят листья растений:

А. клеточный

Б. организменный

В. молекулярный

Г. биоценотический

3.Клетки животных в отличие от клеток растений не имеют:

А. клеточной мембраны и цитоплазмы

Б. Митохондрий и рибосом

В. ядра и расположенных в цитоплазме органоидов

Г. пластид, вакуолей с клеточным соком, оболочки из клетчатки

4.Цитоплазма в клетке не выполняет функцию:

А. транспорта веществ

Б. внутренней среды

В. фотосинтеза

Г. осуществления связи между ядром и органоидами

5. Процесс фотосинтеза осуществляется в :

А. хлоропластах

Б. митохондриях

В. рибосомах

Г. эндоплазматической сети

6.Какая систематическая группа растений реально существует в природе:

А. вид

Б. род


В. класс

Г. отдел


7.АТФ синтезируется в:

А. рибосомах

Б. митохондриях

В. аппарате Гольджи

Г. ядрышке

8.Первичная структура белка это:

А. укладка полипептидной цепи в форме спирали

Б.укладка полипептидной цепи в виде глобулы

В. порядок чередования аминокислот в полипептидной цепи

Г. структура белковых молекул доклеточных форм жизни

9. Основой клеточной мембраны являются:

А. белки

Б. фосфолипиды

В. углеводы

Г. нуклеотиды

10. Мономером углеводов является:

А. аминокислота

Б. нуклеотид

В. моносахарид

Г. азотистое основание

II. Установите соответствие между клеточными органеллами и их функциями.

Функции:


  1. внутриклеточное расщепление и переваривание макромолекул

  2. синтезАТФ

3. синтез глюкозы из СО и НО

4. синтез липидов

5. синтез белка

6. хранение наследственной информации

7. передвижение клетки
Органеллы:
А. ядро

Б. митохондрии

В. рибосомы

Г. хлоропласты

Д. эндоплазматическая сеть

Е. лизосомы

Ж. жгутик

Матрица ответов
10 класс

Вариант 1.

I.

1. б

2. б

3. в


4. б

5. в


6. в

7. г


8. б

9. а


10. г
II.

А
Б
В
Г
Д
Е

1
2
2
1
1
2

Вариант 2.

  1. в

  2. б

  3. г

  4. в

  5. а

  6. а

  7. б

  8. в

  9. б

  10. в

II.


1
2
3
4
5
6
7

Е
Б
Г
Д
В
А
Ж

Контрольное тестирование по теме:

«Микроорганизмы. Особенности строения и жизнедеятельности»
Вариант 1.


1.К прокариотам относятся организмы:

А. клетки которых не имеют оформленного ядра

Б. одноклеточные организмы

В. клетки которых содержат одно или несколько ядер

2. Бактерии представляют собой:

А. одноклеточные организмы разной формы

Б. одноклеточные и колониальные организмы различной формы

А. многоклеточные организмы

3. Бактерии передвигаются при помощи:

А. жгутиков

Б. ресничек

В. скольжения на поверхности

4. Органеллы бактериальных клеток:

А. ядро,митохондии, пластиды

Б. комплес Гольджи,ЭПС, рибосомы

В. рибосомы

Г. хлоропласты, рибосомы

5. Нуклеоид –это:

А. ДНК- содержащая зона клетки прокариот

Б. ядро


В. азотистое основание

6. Бактериальные споры выполняют функции:


7. По способу питания бактерии являются:

А. автотрофами

Б. гетеротрофами

В. миксоторофами

Г. автотрофами, гетеротрофами

Д. автотрофами, гетеротрофами, миксотрофами

8. Цианобактерии отличаются от настоящих бактерий:

А. наличием ядра

Б. отсутствием органелл

В. наличием хлорофилла

9. Азотфиксация – это:

А. расщепление органических веществ бактериями с выделением аммиака

Б. процесс превращения аммонийных солей в нитраты

В. процесс превращения бактериями аммиака в аммонийные соли и нитраты

Г. связывание азота воздуха и перевод его в соединения, доступные живым организмам

10.Спирохеты:

А. извитые бактерии

Б. палочковидные

В. имеют выросты


А. размножения

Б. распространения

В. перенесения неблагоприятных условий


Контрольное тестирование по теме:

«Микроорганизмы. Особенности строения и жизнедеятельности»
Вариант 2.


  1. Выберите прокариотические организмы:

а. грибы

б. бактерии и цианобактерии

в. вирусы

2. Колонии шаровидных бактерий ыформе гроздей – это:

А. стрептококки

Б. диплококки

В. стафилококки

Г. сарцины

3. бактериальная клетка покрыта:

А. оболочкой

Б. цитоплазматической мембраной

В. слизистой капсулой

Г. а + б + в

4. В благоприятных условиях бактериальная спора:

А. делится

Б. сливается с другой спорой

В. набухает и прорастает в новую клетку бактерии

5. Автотрофные бактерии являются:

А. фотосинтетиками

Б.хемтсинтетика

В.фото-, хемосинтетиками

6. Метаболические пути бактерий сопровождающиеся синтезом АТФ:

А. брожение

Б. фотосинтез

В. брожение, фотосинтез

Г. дыхание

Д. брожение, фотосинтез, дыхание

7. Минерализация – это:

А. процесс превращения перегноя в минеральные вещества. Которые доступны растениям

Б. накапливание минеральных веществ в телах живых организмов

В. пропитка оболочек растительных клеток солями кальция и кремнеземом

8. Сапрофитные бактерии осуществляют:

А. гниение

Б. брожение

В. фотосинтез

Г.гниение. брожение

Д. хемосинтез

9. Бактерии размножаются:

А. спорами

Б. гаметами

В.делением клетки попалам

Г. почкованием

Е. а+ в

Ж. б + д


10. Эукариотические организмы:

А. имеют оформленное ядро

Б. не имеют оформленного ядра

В. имеют малое и большое оформленное ядро




Контрольное тестирование по биологии

10 класс.


  1. В результате взаимодействия движущих сил эволюции происходит

1)размножение организмов

2)образование новых видов в природе

3)мутационный процесс

4)изоляция популяций



  1. Основная заслуга Ч. Дарвина в развитии биологии заключается в

1)разработке методов селекции

2)выявлении движущих сил эволюции

3)создании научных основ систематики

4)изучении палеонтологических находок



  1. Внутривидовая борьба играет большую роль в эволюции, так как она

1)увеличивает разнообразие видов

2)насыщает популяции мутациями

3)обостряет конкуренцию

4)приводит к изоляции



  1. Приспособленность растений и животных к среде обитания — результат

1)стремления особей к самоусовершенствованию

2)деятельности человека

3)модификационной изменчивости

4)взаимодействия движущих сил эволюции



  1. Приспособленность растений к опылению насекомыми характеризуется

1)образованием большого количества пыльцы

2)удлинением тычиночных нитей

3)ранневесенним цветением

4)наличием в цветках нектара, яркого венчика



  1. Усложнение строения дыхательной системы млекопитающих, по сравнению с пресмыкающимися, состоит в

1)появлении правого и левого лёгких

2)наличии трахеи и бронхов

3)увеличении дыхательной поверхности лёгких

4)наличии ноздрей и носовой полости



  1. Укажите неверное утверждение: «Ароморфоз ведёт к»

1)общему подъему организации

2)повышению интенсивности жизнедеятельности

3)формированию приспособлений широкого значения

4)формированию частых приспособлений


  1. Укажите пример идиоадаптации

1)возникновение семени у голосеменных

2)возникновение плода у цветковых

3)возникновение у цветковых растений нектарников

4)появление фотосинтеза у растений



  1. Сокращение численности вида в природе свидетельствует о его

1)широкой адаптации

2)развитии по пути дегенерации

3)биологическом прогрессе

4)биологическом регрессе



  1. Человек в системе органического мира

1)представляет собой особый отряд класса млекопитающих

2)выделяется в особое царство, включающее наиболее высокоорганизованные живые существа

3)представляет особый вид, который входит в отряд приматов, класс млекопитающих, царство животных

4)является составной частью человеческого общества и не имеет отношения к системе органического мира



  1. Факторы, определяющие пределы выживаемости вида, называют

1)абиотическими

2)антропогенными

3)оптимальными

4)ограничивающими



  1. Показателем устойчивости экосистемы служит

1)повышение численности хищников

2)сокращение численности популяций жертв

3)увеличение разнообразия видов

4)увеличение числа консументов



  1. Биосфера — глобальная экосистема, структурными компонентами которой являются

1)классы и отделы растений

2)популяции

3)биогеоценозы

4)классы и типы животных



  1. Глобальное потепление на Земле может наступить в результате

1)урбанизации ландшафтов

2)циклических процессов на Солнце

3)вырубки лесов на планете

4)парникового эффекта



  1. Признание права на существование каждого вида растений и животных, их большой роли в биосфере составляет сущность идеи

1) эволюции

2)разноуровневой организации жизни

3)биоцентризма

4)антропоцентризма




Контрольное тестирование.10 класс

В-2


  1. К движущим силам эволюции относят

1)многообразие видов

2)борьбу за существование

3)видообразование

4)приспособленность



  1. Каково значение борьбы за существование в эволюции?

1)сохранение особей преимущественно с полезными изменениями

2) сохранение особей с любыми наследственными изменениями

3)создание мптериалов для отбора

4)обострение взаимоотношений между особями



  1. Причина борьбы за существование —

1)изменчивость особей популяции

2)ограниченность ресурсов среды и интенсивное размножение особей

3)природные катаклизмы

4)отсутствие приспособлений у особей к среде обитания



  1. Отбор особей с уклоняющимися от средней величины признаками называют

1)движущим

2)методическим

3)стабилизирующим

4)массовым



  1. Видоизменение листьев у хвойных растений служит приспособление к

1)улучшению минерального питания растений

2)повышению интенсивности фотосинтеза

3)экономному расходованию воды

4)улавливанию солнечного света



  1. Внутренний скелет впервые сформировался в прцессе эволюции у

1)паукообразных

2)насекомых

3)головоногих моллюсков

4)хордовых



  1. Какое мзменение не относится к ароморфозу

1)живорождение у млекопитающих

2)прогрессивное развитие головного мозга у приматов

3)превращение конечнистей китов в ласты

4)постоянная температура тела у птиц и млекопитающих


  1. Дегенерация – это

1) эволюционные изменения,ведущие к упрощению организацмм

2)случаи проявления признаков предков у отдельных особей

3)крупные эволюционные изменения, ведущие к общему подъёму организации

4)мелкие эволюционные изменения, обеспечивающие приспособленность к среде обитания



  1. Сокращение численности вида в природе свидетельствует о его

1)широкой адаптации

2)развитии по пути дегенирации

3)биологическом прогрессе

4)биологическом регрессе



  1. Сходство человека и млекопитающих животных свидетельствует об их

1)родстве и общем плане строения

2)одинаковом уровне организации

3)конвергентном сходстве

4)происхождении от разных предков



  1. Взаимное влияние одного и разных видов относят к разным факторам

1)биотическим

2)абиотическим

3)антропогенным

4)ограничивающим



  1. Большое разнообразие видов в экосистеме, разнообразие цепей питания, сбалансированный круговорот веществ – основа

1)устойчивого развития экосистемы

2)колебания численности популяций

3)появления новых видов

4)расселения видов в другие экосистемы



  1. Границы биосферы определяются

1)условиями, непригодными для жизни

2)колебаниями положительных температур

3)количеством выпавших осадков

4)облачностью атмосферы



  1. Расширение озоновых дыр приводит к

1)повышению температуры воздуха, частому появлению туманов

2)усилению ультрафиолетового излучения, вредного для здоровья

3)понижению температуры и повышению влажности воздуха

4)уменьшению прозрачности атмосферы и снижению интенсивности фотосинтеза



  1. Создание Красной книги направлено на

1)раскрытие связей организмов со средой

2)сохранение редких и исчезающих видов растений и животных

3)определение места вида в системе органического мира

4)ознакомление с многообразием растений и животных


Контрольное тестирование по биологии

10 класс.


  1. В результате взаимодействия движущих сил эволюции происходит

1)размножение организмов

2)образование новых видов в природе

3)мутационный процесс

4)изоляция популяций



  1. Основная заслуга Ч. Дарвина в развитии биологии заключается в

1)разработке методов селекции

2)выявлении движущих сил эволюции

3)создании научных основ систематики

4)изучении палеонтологических находок



  1. Внутривидовая борьба играет большую роль в эволюции, так как она

1)увеличивает разнообразие видов

2)насыщает популяции мутациями

3)обостряет конкуренцию

4)приводит к изоляции



  1. Приспособленность растений и животных к среде обитания — результат

1)стремления особей к самоусовершенствованию

2)деятельности человека

3)модификационной изменчивости

4)взаимодействия движущих сил эволюции



  1. Приспособленность растений к опылению насекомыми характеризуется

1)образованием большого количества пыльцы

2)удлинением тычиночных нитей

3)ранневесенним цветением

4)наличием в цветках нектара, яркого венчика



  1. Усложнение строения дыхательной системы млекопитающих, по сравнению с пресмыкающимися, состоит в

1)появлении правого и левого лёгких

2)наличии трахеи и бронхов

3)увеличении дыхательной поверхности лёгких

4)наличии ноздрей и носовой полости



  1. Укажите неверное утверждение: «Ароморфоз ведёт к»

1)общему подъему организации

2)повышению интенсивности жизнедеятельности

3)формированию приспособлений широкого значения

4)формированию частых приспособлений


  1. Укажите пример идиоадаптации

1)возникновение семени у голосеменных

2)возникновение плода у цветковых

3)возникновение у цветковых растений нектарников

4)появление фотосинтеза у растений



  1. Сокращение численности вида в природе свидетельствует о его

1)широкой адаптации

2)развитии по пути дегенерации

3)биологическом прогрессе

4)биологическом регрессе



  1. Человек в системе органического мира

1)представляет собой особый отряд класса млекопитающих

2)выделяется в особое царство, включающее наиболее высокоорганизованные живые существа

3)представляет особый вид, который входит в отряд приматов, класс млекопитающих, царство животных

4)является составной частью человеческого общества и не имеет отношения к системе органического мира



  1. Факторы, определяющие пределы выживаемости вида, называют

1)абиотическими

2)антропогенными

3)оптимальными

4)ограничивающими



  1. Показателем устойчивости экосистемы служит

1)повышение численности хищников

2)сокращение численности популяций жертв

3)увеличение разнообразия видов

4)увеличение числа консументов



  1. Биосфера — глобальная экосистема, структурными компонентами которой являются

1)классы и отделы растений

2)популяции

3)биогеоценозы

4)классы и типы животных



  1. Глобальное потепление на Земле может наступить в результате

1)урбанизации ландшафтов

2)циклических процессов на Солнце

3)вырубки лесов на планете

4)парникового эффекта



  1. Признание права на существование каждого вида растений и животных, их большой роли в биосфере составляет сущность идеи

1) эволюции

2)разноуровневой организации жизни

3)биоцентризма

4)антропоцентризма




Контрольное тестирование.10 класс

В-2


  1. К движущим силам эволюции относят

1)многообразие видов

2)борьбу за существование

3)видообразование

4)приспособленность



  1. Каково значение борьбы за существование в эволюции?

1)сохранение особей преимущественно с полезными изменениями

2) сохранение особей с любыми наследственными изменениями

3)создание мптериалов для отбора

4)обострение взаимоотношений между особями



  1. Причина борьбы за существование —

1)изменчивость особей популяции

2)ограниченность ресурсов среды и интенсивное размножение особей

3)природные катаклизмы

4)отсутствие приспособлений у особей к среде обитания



  1. Отбор особей с уклоняющимися от средней величины признаками называют

1)движущим

2)методическим

3)стабилизирующим

4)массовым



  1. Видоизменение листьев у хвойных растений служит приспособление к

1)улучшению минерального питания растений

2)повышению интенсивности фотосинтеза

3)экономному расходованию воды

4)улавливанию солнечного света



  1. Внутренний скелет впервые сформировался в прцессе эволюции у

1)паукообразных

2)насекомых

3)головоногих моллюсков

4)хордовых



  1. Какое мзменение не относится к ароморфозу

1)живорождение у млекопитающих

2)прогрессивное развитие головного мозга у приматов

3)превращение конечнистей китов в ласты

4)постоянная температура тела у птиц и млекопитающих


  1. Дегенерация – это

1) эволюционные изменения,ведущие к упрощению организацмм

2)случаи проявления признаков предков у отдельных особей

3)крупные эволюционные изменения, ведущие к общему подъёму организации

4)мелкие эволюционные изменения, обеспечивающие приспособленность к среде обитания



  1. Сокращение численности вида в природе свидетельствует о его

1)широкой адаптации

2)развитии по пути дегенирации

3)биологическом прогрессе

4)биологическом регрессе



  1. Сходство человека и млекопитающих животных свидетельствует об их

1)родстве и общем плане строения

2)одинаковом уровне организации

3)конвергентном сходстве

4)происхождении от разных предков



  1. Взаимное влияние одного и разных видов относят к разным факторам

1)биотическим

2)абиотическим

3)антропогенным

4)ограничивающим



  1. Большое разнообразие видов в экосистеме, разнообразие цепей питания, сбалансированный круговорот веществ – основа

1)устойчивого развития экосистемы

2)колебания численности популяций

3)появления новых видов

4)расселения видов в другие экосистемы



  1. Границы биосферы определяются

1)условиями, непригодными для жизни

2)колебаниями положительных температур

3)количеством выпавших осадков

4)облачностью атмосферы



  1. Расширение озоновых дыр приводит к

1)повышению температуры воздуха, частому появлению туманов

2)усилению ультрафиолетового излучения, вредного для здоровья

3)понижению температуры и повышению влажности воздуха

4)уменьшению прозрачности атмосферы и снижению интенсивности фотосинтеза



  1. Создание Красной книги направлено на

1)раскрытие связей организмов со средой

2)сохранение редких и исчезающих видов растений и животных

3)определение места вида в системе органического мира

4)ознакомление с многообразием растений и животных



 

учитель биологии — Биосинтез белка


ЗАДАЧИ по БИОСИНТЕЗУ БЕЛКА:
смотрите все задачи здесь

УЧЕБНЫЕ ФИЛЬМЫ:
1. Биосинтез белка (научфильм)
2. Биосинтез белка

ИНТЕРАКТИВНЫЕ КАРТОЧКИ:

1. Смотри обязательно!
 Смотрите лекцию : «Генетический код»

Другие видеоуроки по школьной программе смотрите на InternetUrok.ru

Смотрите лекцию «Регуляция транскрипции и трансляции»

Другие видеоуроки по школьной программе смотрите на InternetUrok.ru              

Информация о строении белка (наследственная информация) закодирована в ДНК, которая у эукариот входит в состав хромосом и находится в ядре. Участок ДНК (хромосомы), в котором закодирована информация об одном белке, называется ген.

1. Транскрипция (переписывание информации с ДНК на иРНК). В определенном участке ДНК разрываются водородные связи, получается две одинарных цепочки. На одной из них по принципу комплементарности строится иРНК. Затем она отсоединяется и уходит в цитоплазму, а цепочки ДНК снова соединяются между собой.

2. Процессинг (только у эукариот) – созревание иРНК: удаление из нее участков, не кодирующих белок, а так же присоединение управляющих участков.

3. Экспорт иРНК из ядра в цитоплазму (только у эукариот). Происходит через ядерные поры; всего экспортируется примерно 5% от общего количества иРНК в ядре.

4. Синтез аминоацил-тРНК. В цитоплазме имеется 61 фермент аминоацил-тРНК-синтетаза. Он комплементарно узнает аминокислоту и тРНК, которая должна ее переносить, и соединяет их между собой, при этом затрачивается 1 АТФ.

5. Трансляция (синтез белка). Внутри рибосомы к кодонам иРНК по принципу комплементарности присоединяются антикодоны тРНК. Рибосома соединяет между собой аминокислоты, принесенные тРНК, получается белок.

6. Созревание белка. Вырезание из белка ненужных фрагментов, присоединение небелковых компонентов (например, гема), соединение нескольких полипептидов в четвертичную структуру

Реакции транскрипции, трансляции, а так же репликации (удвоения ДНК) являются реакциями матричного синтеза. ДНК служит матрицей для синтеза иРНК, иРНК служит матрицей для синтеза белка.

Генетический код – это способ, с помощью которого информация о строении белка записана в ДНК.

Свойства генкода

1) Триплетность: одна аминокислота кодируется тремя нуклеотидами. Эти 3 нуклеотида в ДНК называются триплет, в иРНК – кодон, в тРНК – антикодон (но в ЕГЭ может быть и «кодовый триплет» и т.п.)

2) Избыточность (вырожденность): каждая аминокислота кодируется несколькими триплетами (аминокислот всего 20, а триплетов, кодирующих аминокислоты – 61).

3) Однозначность: каждый триплет (кодон) кодирует только одну аминокислоту.

4) Универсальность: генетический код одинаков для всех живых организмов на Земле.

Задачи

Задачи на количество нуклеотидов/аминокислот
1 аминокислота – 3 нуклеотида
10 аминокислот – 30 нуклеотидов
44 аминокислоты – 132 нуклеотида и т.д.

Задачи на АТГЦ
ДНК иРНК тРНК
   А        У        А
   Т        А        У
   Г        Ц        Г
   Ц        Г        Ц

44 теста по теме

32. Сколько аминокислот кодирует 900 нуклеотидов
А) 100
Б) 200
В) 300
Г) 400

41. Единый аппарат биосинтеза белка
А) эндоплазматическая сеть и рибосомы
Б) митохондрии и клеточный центр
В) хлоропласты и комплекс Гольджи
Г) лизосомы и плазматическая мембрана

153. Какой антикодон транспортной РНК соответствует триплету ТГА в молекуле ДНК
А) АЦУ
Б) ЦУГ
В) УГА
Г) АГА

176. Сборка белковых молекул в клетке происходит на
А) мембранах эндоплазматической сети
Б) мембранах аппарат Гольджи
В) митохондриях
Г) рибосомах

178. В рибосомах, расположенных на гранулярных мембранах эндоплазматической сети, происходит
А) фотосинтез
Б) хемосинтез
В) синтез АТФ
Г) биосинтез белка

217. С помощью молекул иРНК осуществляется передача наследственной информации
А) из ядра к митохондрии
Б) из одной клетки в другую
В) из ядра к рибосоме
Г) от родителей потомству

243. Антикодону ААУ на транспортной РНК соответствует триплет на ДНК
А) ТТА
Б) ААТ
В) ААА
Г) ТТТ

322. иРНК является копией
А) одного гена или группы генов
Б) цепи молекулы белка
В) одной молекулы белка
Г) части плазматической мембраны

323. Сколько нуклеотидов в гене кодируют последовательность 60 аминокислот в молекуле белка
А) 60
Б) 120
В) 180
Г) 240

506. Рибонуклеиновые кислоты в клетках участвуют в
А) хранении наследственной информации
Б) регуляции обмена жиров
В) образовании углеводов
Г) биосинтезе белков

524. Белок состоит из 100 аминокислот. Определите число нуклеотидов в молекуле ДНК, кодирующей данный белок
А) 200
Б) 300
В) 400
Г) 600

572. Какое число нуклеотидов в гене кодирует первичную структуру белка, состоящего из 300 аминокислот
А) 150
Б) 300
В) 600
Г) 900

725. Матрицей для трансляции служит молекула
А) тРНК
Б) ДНК
В) рРНК
Г) иРНК

748. Генетический код определяет принцип записи информации о
А) последовательности аминокислот в молекуле белка
Б) транспорте иРНК в клетке
В) расположении глюкозы в молекуле крахмала
Г) числе рибосом на эндоплазматической сети

754. Рибонуклеиновая кислота в клетках участвует в
А) хранении наследственной информации
Б) биосинтезе белков
В) биосинтезе углеводов
Г) регуляции обмена жиров

768. Каждая аминокислота в клетке кодируется
А) одной молекулой ДНК
Б) несколькими триплетами
В) несколькими генами
Г) одним нуклеотидом

770. Определенной последовательностью трех нуклеотидов зашифрована в клетке каждая молекула
А) аминокислоты
Б) глюкозы
В) крахмала
Г) глицерина

771. Функциональная единица генетического кода
А) нуклеотид
Б) триплет
В) аминокислота
Г) тРНК

918. Синтез белка происходит в
А) аппарате Гольджи
Б) рибосомах
В) гладкой эндоплазматической сети
Г) лизосомах

919. Какой триплет в тРНК комплементарен кодону ГЦУ на иРНК
А) ЦГТ
Б) АГЦ
В) ГЦТ
Г) ЦГА

960. Генетический код является универсальным, так как
А) каждая аминокислота кодируется тройкой нуклеотидов
Б) место аминокислоты в молекуле белка определяют разные триплеты
В) он един для всех живущих на Земле существ
Г) несколько триплетов кодируют одну аминокислоту

995. Число нуклеотидов, кодирующих в клетке каждую аминокислоту,
А) один
Б) два
В) три
Г) четыре

1021. Какой триплет в молекуле информационной РНК соответствует кодовому триплету ААТ в молекуле ДНК
А) УУА
Б) ТТА
В) ГГЦ
Г) ЦЦА

1061. Принцип записи информации о расположении аминокислот в молекуле белка в виде последовательности триплетов ДНК
А) ген
Б) кодон
В) антикодон
Г) генетический код

1101. Триплетность, специфичность, универсальность, неперекрываемость — это свойства
А) генотипа
Б) генома
В) генетического кода
Г) генофонда популяции

1114. В рибосомах животной клетки протекает процесс
А) биосинтеза белка
Б) синтеза углеводов
В) фотосинтеза
Г) синтеза АТФ

1140. Белок состоит из 240 аминокислотных остатков. Сколько нуклеотидов в гене, в котором закодирована первичная структура этого белка?
А) 120
Б) 360
В) 480
Г) 720

1154. Информация о последовательности расположения аминокислот в молекуле белка переписывается в ядре с молекулы ДНК на молекулу
А) АТФ
Б) рРНК
В) тРНК
Г) иРНК

1158. Участок ДНК, содержащий информацию об одной полипептидной цепи, называют
А) хромосомой
Б) триплетом
В) геном
Г) кодом

1181. Белок состоит из 180 аминокислотных остатков. Сколько нуклеотидов в гене, в котором закодирована последовательность аминокислот в этом белке
А) 90
Б) 180
В) 360
Г) 540

1194. Первичная структура молекулы белка, заданная последовательностью нуклеотидов иРНК, формируется в процессе
А) трансляции
Б) транскрипции
В) редупликации
Г) денатурации

1219. В основе каких реакций обмена лежит матричный принцип
А) синтеза молекул АТФ
Б) сборки молекул белка из аминокислот
В) синтеза глюкозы из углекислого газа и воды
Г) синтеза липидов

1296. Молекулы иРНК, в отличие от тРНК
А) служат матрицей для синтеза белка
Б) служат матрицей для синтеза тРНК
В) доставляют аминокислоты к рибосоме
Г) переносят ферменты к рибосоме

1309. В рибосомах, в отличие от комплекса Гольджи, происходит
А) окисление углеводов
Б) синтез молекул белка
В) синтез липидов и углеводов
Г) окисление нуклеиновых кислот

1323. Реакции биосинтеза белка, в которых последовательность триплетов в иРНК обеспечивает последовательность аминокислот в молекуле белка, называют
А) гидролитическими
Б) матричными
В) ферментативными
Г) окислительными

1324. Какая последовательность правильно отражает путь реализации генетической информации
А) ген —> иРНК —> белок —> признак
Б) признак —> белок —> иРНК —> ген —> ДНК
В) иРНК —> ген —> белок —> признак
Г) ген —> ДНК —> признак —> белок

1325. Роль матрицы в синтезе молекул иРНК выполняет
А) полипептидная нить
Б) плазматическая мембрана
В) мембрана эндоплазматической сети
Г) одна из цепей молекулы ДНК

1496. Реакции синтеза органических веществ в клетках человека и других организмов, расщепления пищи в пищеварительном канале ускоряются благодаря действию
А) ферментов
Б) гормонов
В) хлорофилла
Г) гемоглобина

1650. Три рядом расположенных нуклеотида в молекуле ДНК называют
А) триплетом
Б) генетическим кодом
В) геном
Г) генотипом

1689. Выберите правильную последовательность передачи информации в процессе синтеза белка в клетке
А) ДНК —> информационная РНК —> белок
Б) ДНК —> транспортная РНК —> белок
В) рибосомальная РНК —> транспортная РНК —> белок
Г) рибосомальная РНК —> ДНК —> транспортная РНК —> белок

1764. Однозначность генетического кода проявляется в кодировании триплетом одной молекулы
А) аминокислоты
Б) полипептида
В) АТФ
Г) нуклеотида

1948. Единство генетического кода всех живых существ на Земле проявляется в его
А) триплетности
Б) однозначности
В) специфичности
Г) универсальности

1961. Какой триплет на ДНК соответствует кодону УГЦ на и-РНК?
А) ТГЦ
Б) АГЦ
В) ТЦГ
Г) АЦГ

2010. Последовательность нуклеотидов в фрагменте молекулы ДНК следующая: АТТ-ГЦА-ТГЦ. Какова последовательность нуклеотидов иРНК, синтезируемой на данном фрагменте ДНК?
А) ТАА-ЦУТ-АЦГ
Б) УАА-ЦГУ-АЦГ
В) УЦЦ-ЦАТ-ЦЦГ
Г) ТУУ-ЦГУ-АЦТ

ИСТОЧНИК: сайт БИОФАК




схема трансляции

Биосинтез белка. Транскрипция и трансляция

Биологический синтез белка и генетический код

Этапы биосинтеза белка: инициация и элонгация с терминацией

Биологический синтез белка и генетический код

Белок – это высокомолекулярное соединение (состоят из тысяч и миллионов мономеров), состоящее преимущественно из альфа-аминокислот, объединённых пептидной цепью. Они выполняют строительную, защитную, регуляторную, транспортную и другие функции.

Биосинтез белка – это процесс его создания при помощи особых ферментов. В нём участвуют такие органоиды как: цитоплазма, рибосомы и ядро.

Молекулы ДНК, находящиеся в ядре клетки, несут в себе информацию о всех белках, синтезирующихся в ней. Информация о белках записывается кодом, состоящим из четырёх букв.

Генетический код – запись расположения нуклеотидов ДНК, определяющая порядок построения аминокислот в молекуле белка.

Код обладает следующими свойствами:

  • 1. Триплетность кода. Аминокислоте соответствует свой триплет, в состав которого входят три нуклеотида.

    • Так аланин кодируется кодоном Ц-Г-А; лейцин – Г-А-А.

  • 2. Не перекрывается. Каждый нуклеотид соответствует только своей аминокислоте и не входит в состав других, находящихся рядом, кодонов.
  • 3. Код вырожден. Аминокислота имеет два-три-четыре кода.

    • Аланин можно записать четырьмя разными способами.

  • 4. Не имеет разделительных знаков. У кода «пустые» кодоны. Они не несут информации, выступают в роли «разделяющих символов». Это УАГ, УАА, УГА. Они не кодируют аминокислоты и отделяют гены в ДНК друг от друга.

    • Ген – это часть молекулы ДНК, от которого зависит порядок аминокислот в молекулах белков.

  • 5. Универсален. Белки создаются двадцатью аминокислотами, кодирующиеся одними и теми же триплетами, и все они едины для организмов, принадлежащих к разным царствам. У бактерии, ежа, мухомора, подсолнуха и человека набор аминокислот один и тот же.

Этапы биологического синтеза белка: инициация и элонгация с терминацией

ДНК непосредственно не принимает участия в «производстве» белка. Она служит складом информации для РНК, которые необходимо создавать.

Сначала происходит этап, называемый транскрипцией или переписыванием. Так же его можно назвать инициацией. Она происходит в ядре клетки. ДНК не может само транспортировать информацию рибосомам, расположенным в цитоплазме клетки. Для этой цели нужен помощник. Это иРНК.

Транскрипция происходит лишь на определённом участке молекулы ДНК, на котором располагается необходимый ген. Двойная цепь ДНК немного раскручивается с участием особых ферментов, в результате чего оголяется нужный ген, с которого и будет считываться информация для синтеза иРНК.

Особый фермент РНК-полимераза, скользя вдоль этого гена, соединит нуклеотиды в цепь иРНК.

Транскрипция охватывает или некоторое количество генов одной хромосомы сразу, или гены, располагающиеся на других хромосомах.

Созданная таким способом иРНК содержит точную копию нуклеотидов, считанных с гена.

Но цепь иРНК получается на принципе комплементарности с ДНК. Там, где в гене стоит азотистое основание аденин, в иРНК будет забит комплементарный ему урацил (для РНК). Хотя в ДНК аденину комплементарен тимин. Гуанину комплементарен цитозин.

Таким же образом синтезируется другие виды РНК:  тРНК и рРНК.

Начало и конец синтеза типов РНК фиксируется «знаками препинания», особыми триплетами, о которых уже упоминалось в свойствах кода. Это УАГ, УАА, УГА. Знаки начала протекания реакции называют «инециирующими», а знаки конца – «терминальные».

тРНК соединяется с аминокислотами при помощи антикодона. Это триплет, кодирующий аминокислоту, которую и несёт с собой данное тРНК. Молекулы тРНК похожи на крест, верх которого несёт антикодон.

Количеству аминокислот соответствует количество тРНК.

А раз аминокислоты кодируются несколькими триплетами, то их количество больше 20. Известно, что существует 60 видов тРНК.

Присоединение анода к коноду происходит ферментативно. тРНК переносят аминокислоты к рибосомам. Возможно это в цитоплазме.

Трансляция – это процесс превращения записанных на иРНК триплетов в аминокислоты белков. Его можно разделить на два этапа: элонгация и терминация.

Он происходит уже в рибосомах.

иРНК присоединяется к рибосомам. Они, подобно бусам, одна за другой «нанизываются» на цепь иРНК, синтезируя белок. По мере приближения первой рибосомы к концу цепи иРНК, вторая рибосома тут же стартует со своего места, насаживаясь на освободившийся конец иРНК, и так далее. Одновременно на одной иРНК может быть «нанизано» более 80 рибосом, и все они синтезируют один тип белка. Вся эта конструкция имеет название полирибосомы или полисомы. Вид белка определяет только информация, записанная на иРНК. Рибосомы сами по себе способны кодировать любой вид белка. После окончания биосинтеза рибосома сходит с иРНК, а белки отправляются в шероховатую эндоплазматическую сеть.

Рибосомы состоят из большой и малой субъединиц. иРНК присоединяется к малой. В месте их соприкосновения находятся два триплета (или шесть нуклеотидов). К одному из кодонов постоянно приходит тРНК с аминокислотами и прикасается антикодоном к кодону иРНК. Если они комлементарны, то между тРНК и уже синтезированной частью белка возникает пептидная связь. В этом участвует фермент синтетаза. Этот процесс ещё можно рассматривать как элонгацию, то есть середину процесса. тРНК отпускает аминокислоту, которая находилась на ней, и возвращается в цитоплазму, рибосома перемещается вперёд на один триплет. Так постепенно создаётся полипептидная цепь. Длится это до тех пор, пока рибосома не достигнет одного из «знаков препинания». Как помним, их называют «терминальными». Потому и последние превращения    белков называют терминация.

На этом биосинтез белка останавливается.

Следует, что именно иРНК создаёт ту последовательность аминокислот, из которой будет строиться белок. То есть, только иРНК передают информацию о строении и функциях всех структур белков. Готовые белки уходят в шероховатую эндоплазматическую сеть. Приблизительное время образования одной молекулы белка составляет одну-две минуты. 

БИОСИНТЕЗ БЕЛКА | Kursak.NET

2.6 БИОСИНТЕЗ БЕЛКА

1. В процессе пластического обмена в клетках синтезируются молекулы

1) белков

2) воды

3) АТФ

4) неорганических веществ

2. Все реакции синтеза органических веществ в клетке происходят с

1) освобождением энергии

2) использованием энергии

3) расщеплением веществ

4) образованием молекул АТФ

3. В чем проявляется взаимосвязь пластического и энергетического обмена?

1) пластический обмен поставляет органические вещества для энергетического

2) энергетический обмен поставляет кислород для пластического

3) пластический обмен поставляет минеральные вещества для энергетического

4) пластический обмен поставляет молекулы АТФ для энергетического

4. В основе каких реакций обмена лежит матричный принцип?

1) синтез молекул АТФ

2) сборка молекул белков из аминокислот

3) синтез глюкозы из углекислого газа и воды

4) образование липидов

5. Генетический код определяет принцип записи информации о

1) последовательности аминокислот в молекуле белка

2) транспорте иРНК в клетке

3) расположении глюкозы в молекуле крахмала

4) числе рибосом на ЭПС

6. Триплетность, специфичность, универсальность, неперекрываемость – это свойства

1) генотипа

2) генома

3) генетического кода

4) генофонда популяции

7. Определенной последовательностью трех нуклеотидов зашифрована в клетке каждая молекула

1) аминокислоты

2) глюкозы

3) крахмала

4) глицерина

8. У организмов разных царств аминокислоты кодируются одними и теми же кодонами, поэтому код наследственности

1) триплетный

2) генетический

3) универсальный

4) однозначый

9. Сколько нуклеотидов кодирует аминокислоту глицин?

1) один

2) два

3) три

4) четыре

10. Три рядом расположенных нуклеотида в молекуле ДНК, кодирующие 1 аминокислоту, называют

1) триплетом

2) генетическим кодом

3) геном

4) генотипом

11. Функциональная единица генетического кода

1) нуклеотид

2) триплет

3) аминокислота

4) тРНК

12. Белок состоит из 50 аминокислот. Сколько нуклеотидов в гене, в котором закодирована первичная структура этого белка?

1) 50

2) 100

3) 150

4) 250

13. Белок состоит из 300 аминокислот. Сколько нуклеотидов в гене, который служит матрицей для синтеза этого белка?

1) 300

2) 600

3) 900

4) 1500

14. Сколько нуклеотидов находится на участке гена, в котором закодирована первичная структура молекулы белка, содержащего 130 аминокислот?

1) 65

2) 130

3) 260

4) 390

15. Как называют триплеты в молекуле ДНК, которые не кодируют аминокислоты?

1) знаками препинания

2) кодонами

3) антикодонами

4) нуклеотидами

16. Единство генетического кода всех живых существ на Земле проявляется в его

1) триплетности

2) однозначности

3) специфичности

4) универсальности

17. Что представляет собой ген?

1) одну полипептидную нить

2) одну молекулу ДНК

3) одну молекулу ДНК в соединении с большим числом молекул белка

4) отрезок молекулы ДНК, содержащий информацию о первичной структуре молекулы белка

18. Какая последовательность правильно отражает путь реализации генетической информации?

1) ген→ иРНК→ белок→ свойство→ признак

2) признак→ белок→ иРНК→ ген→ ДНК

3) иРНК→ ген→ белок→ признак→ свойство

4) ген→ признак→ свойство

19. Информация о последовательности расположения аминокислот в молекуле белка переписывается в ядре с молекулы ДНК на молекулу

1) АТФ

2) рРНК

3) тРНК

4) иРНК

20. Роль матрицы в синтезе молекул иРНК выполняет

1) полипептидная нить

2) плазматическая мембрана

3) одна из цепей молекулы ДНК

4) мембрана эндоплазматической сети

21. В процессе синтеза молекул иРНК роль матрицы выполняют

1) гены

2) тРНК

3) рибосомы

4) мембраны ЭПС

22. Какова роль иРНК в биосинтезе белка?

1) переносит наследственную информацию из ядра к рибосоме

2) переносит аминокислоты из цитоплазмы к рибосоме

3) способствует ускорению химических реакций

4) обеспечивает клетку энергией

23. Матрицей для процесса трансляции служит молекула

1) тРНК

2) ДНК

3) рРНК

4) иРНК

24. Реакции биосинтеза белка, в которых последовательность триплетов в иРНК обеспечивает последовательность аминокислот в молекуле белка, называют

1) гидролитическими

2) матричными

3) ферментативными

4) окислительными

25. Большую роль в биосинтезе белка играет тРНК, которая

1) служит матрицей для синтеза белка

2) доставляет аминокислоты к рибосомам

3) переносит информацию из ядра к рибосомам

4) служит местом для сборки полипептидной цепи

26. Антикодону ААГ на тРНК соответствует триплет на ДНК

1) ААГ

2) ТЦУ

3) ЦЦУ

4) УУЦ

27. Антикодону ААУ на тРНК соответствует триплет на ДНК

1) ТТА

2) ААТ

3) ААА

4) ТТТ

28. Антикодону УГЦ на тРНК соответствует триплет на ДНК

1) ТГЦ

2) АГЦ

3) ТЦГ

4) АЦГ

29. В рибосоме при биосинтезе белка располагаются 2 триплета иРНК, к которым в соответствии с принципом комплементарности присоединяются триплеты

1) тРНК

2) рРНК

3) белка

4) ДНК

ЧАСТЬ В

Задания с выбором 3-х верных ответов из 6-и.

1. Чем характеризуются реакции синтеза иРНК в клетке?

1) происходят в ядре в интерфазу

2) происходят на рибосомах

3) имеют матричный характер

4) сопровождаются синтезом молекул АТФ

5) синтезируются на одной из нитей ДНК

6) синтезируются на полипептидной цепи

2. Чем характеризуются реакции биосинтеза белка в клетке?

1) имеют матричный характер

2) в ходе биосинтеза запасается энергия в молекулах АТФ

3) в ходе биосинтеза используется энергия молекул АТФ

4) синтез молекул белка происходит в лизосомах

5) матрицей для синтеза белка служит иРНК

6) сборка молекул белка из аминокислот в рибосомах происходит на матрице ДНК

3. Какие процессы характерны для биосинтеза белка?

1) синтез молекул иРНК на полинуклеотидной цепи ДНК

2) расщепление биополимеров до мономеров

3) фотолиз молекул воды

4) нанизывание на иРНК рибосом

5) образование молекулярного кислорода

6) образование пептидных связей между аминокислотами

Задания на установление соответствия.

4. Установите соответствие между характеристикой процесса и этапом биосинтеза белка.

ХАРАКТЕРИСТИКИ ЭТАПЫ СИНТЕЗА БЕЛКА

А) происходит в ядре 1) транскрипция

Б) осуществляется с помощью рибосом 2) трансляция

В) необходима энергия АТФ

Г) принимают участие тРНК

Д) необходимы аминокислоты

Е) принимают участие РНК-полимеразы

Задания на установление последовательности.

5. Установите последовательность процессов биосинтеза белка в клетке.

1) синтез иРНК на ДНК

2) присоединение аминокислоты к тРНК

3) доставка аминокислоты к рибосоме

4) перемещение иРНК из ядра к рибосоме

5) нанизывание рибосом на иРНК

6) присоединение 2-х молекул тРНК с аминокислотами к иРНК

7) взаимодействие аминокислот, присоединенных к иРНК, образование пептидной связи

6. Установите последовательность процессов, в которых участвует тРНК.

1) присоединение аминокислоты к тРНК

2) образование водородных связей между комплементарными нуклеотидами иРНК и тРНК

3) перемещение тРНК с аминокислотой к рибосоме

4) отрыв аминокислоты от тРНК

7. Установите последовательность движения белковых молекул от места образования до клеточной мембраны.

1) созревание и упаковка пузырьков в комплексе Гольджи

2) образование белка рибосомами шероховатой ЭПС

3) перемещение по каналам ЭПС

4) выведение пузырьков из комплекса Гольджи к мембране

5) перемещение белка к комплексу Гольджи в мембранном пузырьке

ЧАСТЬ С

С1 Какова роль нуклеиновых кислот в биосинтезе белка?

С2 Участок цепи ДНК, кодирующий первичную структуру полипептида, состоит из 15-и нуклеотидов. Определите число нуклеотидов на иРНК, кодирующих аминокислоты, число аминокислот в полипептиде и количество тРНК, необходимых для переноса этих аминокислот к месту синтеза. Ответ поясните.

С3 Белок состоит из 100 аминокислот. Установите, во сколько раз молекулярная масса участка гена, кодирующего данный белок, превышает молекулярную массу белка, если средняя молекулярная масса аминокислоты – 110, а нуклеотида – 300. Ответ поясните.

С4 В процессе трансляции участвовало 30 молекул тРНК. Определите число аминокислот, входящих в состав синтезируемого белка, а также число триплетов и нуклеотидов в гене, который кодирует этот белок.

С5 В биосинтезе полипептида участвовали тРНК с антикодонами УУА, ГГЦ, ЦГЦ, АУУ, ЦГУ. Определите нуклеотидную последовательность участка каждой цепи молекулы ДНК, который несет информацию о синтезируемом полипептиде, и число нуклеотидов, содержащих аденин (А), гуанин (Г), Тимин (Т) и цитозин (Ц) в двуцепочечной молекуле ДНК. Ответ поясните.

С6 В пробирку поместили рибосомы из разных клеток, весь набор аминокислот и одинаковые молекулы иРНК и тРНК, создали все условия для синтеза белка. Почему в пробирке будет синтезироваться 1 вид белка на разных рибосомах?

С7 Фрагмент цепи ДНК имеет последовательность нуклеотидов: ГТГТАТГГААГТ. Определите последовательность нуклеотидов на иРНК, антикодоны соответствующих тРНК и последовательность аминокислот в фрагменте молекулы белка, используя таблицу генетического кода.

С8 В каких случаях изменение последовательности нуклеотидов ДНК не влияет на структуру и функции соответствующего белка?

КЛЮЧ К 2.6 БИОСИНТЕЗ БЕЛКА

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

            

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

            

25

26

27

28

29

            

В1

 

В4

 

В7

 

В2

 

В5

   

В3

 

В6

   

Тест по теме «Биосинтез белка»

Контрольная работа по теме «БИОСИНТЕЗ БЕЛКА» (профиль 10 класс)
В заданиях 1-15 выберите один правильный ответ
1. Образование иРНК по матрице ДНК называется:
а) трансляцией; б) транскрипцией; в) биосинтезом; г) репликацией.
2. Участок в молекуле ДНК, содержащий информацию о последовательности соединения входящих в его состав аминокислот:
а) ген; б) триплет нуклеотидов; в) кодон; г) нуклеотид.
3. Генетическим кодом называют:
а) полипептидную цепь

б) последовательность триплетов молекул ДНК, определяющую первичную структуру белковых молекул;

в) молекулы, содержащие богатые энергией связи;

г) углевод биополимер.
4. Результатом реакций транскрипции является синтез:
а) всех видов белка; б) АТФ; в) липидов; г) всех видов РНК.
5. Трансляцией называется ферментативный процесс: 
а) удвоения ДНК;

б) образования и-РНК;

в) образования белковой молекулы на рибосомах;

г) раскручивание молекулы ДНК.
6. Транскрипция происходит в: 
а) ядре; б) лизосомах; в) митохондриях; г) рибосомах.
7. Синоним термину «пластический обмен»: 
а) катаболизм; б) диссимиляция; в) метаболизм; г) анаболизм.
8. Единицей генетического кода является:
а) нуклеотид; б) ген; в) триплет нуклеотидов; г) ДНК.
9. Молекула ДНК содержит информативный участок из 120 нуклеотидов, шифрующий структуру белка. Сколько аминокислот входит в состав белка, который кодируется этим участком?:
а) 360; б) 30; в) 40; г) 60.
10. Определите признак (свойство), по которому все нижеперечисленные биохимические процессы, кроме одного, объединены в одну группу. Укажите лишний среди них процесс:
а) хемосинтез; б) брожение; в) репликация; г) транскрипция; д) трансляция.
11. Комплекс, состоящий из молекулы иРНК и расположенных на ней рибосом, называется: 
а) нуклеосома; б) лизосома; в) полимер; г) полисома.
12. С каким антикодоном тРНК поступает в рибосому и задерживается в ней до образования пептидной связи в тот момент, когда в рибосоме находится триплет АГЦ молекулы иРНК?:
а) АГУ; б) АГЦ; в) ТЦГ; г) УЦГ.
13. В чем выражается свойство универсальности генетического кода?
а) одни и те же триплеты нуклеотидов всегда соответствуют одним и тем же аминокислотам;
б) для большинства аминокислот характерно то, что каждый из них соответствует не один, а несколько разных триплетов;
в) у всех организмов одни и те же триплеты нуклеотидов соответствуют одним и тем же аминокислотам;
г) каждой аминокислоте соответствует строго определенный триплет нуклеотидов.
14. Каким термином обозначается свойство кода ДНК: одна и та же аминокислота может быть закодирована не одним триплетом нуклеотидов, а несколькими разными триплетами?
а) универсальность; б) вырожденность; в) однозначность; г) колинеальность. 

15. Количество тРНК равно:

а) количеству всех кодонов ДНК

б) количеству кодонов иРНК, шифрующих аминокислоты

в) количеству генов

г) количеству белков клетке

В задании 16 выберите три правильных ответа
16. К реакциям матричного синтеза НЕ относятся: 
а) обратная транскрипция; б) репликация; в) гликолиз;

г) хемосинтез; д) трансляция; е) фотосинтез.

17. Все приведённые ниже признаки, кроме двух, можно использовать для описания процесса биосинтеза белка в клетке. Определите два признака, «выпадающих» из общего списка, и запишите в ответ цифры, под которыми они указаны.

а) Процесс происходит при наличии ферментов.

б) Центральная роль в процессе принадлежит молекулам РНК.

в) Процесс сопровождается синтезом АТФ.

г) Мономерами для образования молекул служат аминокислоты.

д) Сборка молекул белков осуществляется в лизосомах.

18. Рассмотрите предложенную схему классификации реакций матричного синтеза. Запишите в ответе пропущенный термин, обозначенный на схеме вопросительным знаком.

19. Найдите три ошибки в приведённом тексте. Укажите номера предложений, 
в которых они сделаны, исправьте их.

1.При биосинтезе белка протекают реакции матричного синтеза. 2. К реакциям матричного синтеза относят только реакции репликации и транскрипции. 3. В результате транскрипции синтезируется иРНК, матрицей для которой служит вся молекула ДНК. 4. Пройдя через поры ядра, иРНК поступает в цитоплазму.

5.Информационная РНК  участвует в синтезе тРНК. 6.Транспортная РНК обеспечивает доставку аминокислот для сборки белка. 7. На соединение каждой из аминокислот с тРНК расходуется энергия молекул АТФ.

20. Рассмотрите рисунок и укажите названия процессов, обозначенных цифрами 1 и 2. Назовите конечный продукт процесса 2. 



21. Какое число триплетов кодируют 27 аминокислот? В ответе запишите только соответствующее число.

22. Установите последовательность процессов в биосинтезе белка.

А) синтез иРНК на ДНК

Б) доставка аминокислоты к рибосоме

В) образование пептидной связи между аминокислотами

Г) присоединение аминокислоты к тРНК

Д) соединение иРНК с двумя субъединицами рибосомы

23. Установите соответствие между характеристикой и этапом биосинтеза белка в клетке
 Характеристика: Этапы:
А)процесс протекает в ядре 1)транскрипция
Б) осуществляется в цитоплазме 2)трансляция
В) по принципу комплементарности на ДНК синтезируется и РНК
Г)благодаря действию ферментов участок ДНК раскручивается
Д)аминокислоты к месту сборки белка доставляют молекулы тРНК
Е)рибосома скользит по иРНК как по матрице
24. Участок цепи ДНК, кодирующий первичную структуру белка, состоит из 99 нуклеотидов.

Определите: а) число нуклеотидов в и-РНК, кодирующей аминокислоты в белке, б) число аминокислот в белке, в) количество т-РНК, необходимых для переноса этих аминокислот к месту синтеза белка. Каждый ответ поясните.
25. Сколько нуклеотидов содержат обе цепочки гена ДНК, в котором запрограммирован белок, состоящий из 150 аминокислотных остатков.

26. Известно, что все виды РНК синтезируются на ДНК-матрице. Фрагмент цепи ДНК, на которой синтезируется участок центральной петли тРНК, имеет следующую последовательность нуклеотидов: ТГЦЦЦАТТЦГТТАЦГ.
Установите нуклеотидную последовательность участка тРНК, который синтезируется на данном фрагменте, и аминокислоту, которую будет переносить эта тРНК в процессе биосинтеза белка, если третий триплет соответствует антикодону тРНК. Ответ поясните.

27. Белок состоит из 100 аминокислот. Установите, во сколько раз молекулярная масса участка гена, кодирующего данный белок, превышает молекулярную массу белка, если средняя молекулярная масса аминокислоты – 110, а нуклеотида — 300. Ответ поясните.

28. Генетический аппарат вируса представлен молекулой РНК. Фрагмент этой молекулы имеет нуклеотидную последовательность: АЦАГЦЦГГУУУГГГА. Определите нуклеотидную последовательность фрагмента двухцепочечной молекулы ДНК, которая синтезируется в результате обратной транскрипции на РНК вируса. Установите последовательность нуклеотидов в иРНК и аминокислот во фрагменте белка вируса. Матрицей для синтеза иРНК, на которой идёт синтез вирусного белка, является вторая цепь ДНК, которая комплементарна первой цепи ДНК, найденной по вирусной РНК. Для решения задания используйте таблицу генетического кода.

INSR — Предшественник рецептора инсулина — Homo sapiens (Human)

В этом подразделе раздела Последовательность указывается, что каноническая последовательность , отображаемая по умолчанию в записи, является полной или нет.

Подробнее. ..

Статус последовательности i : Завершено.

В этом подразделе раздела Последовательность указано, что каноническая последовательность , отображаемая по умолчанию в записи, имеет зрелую форму или представляет собой предшественник.

Подробнее …

Обработка последовательности i : отображаемая последовательность далее обрабатывается до зрелой формы.

.

Эта запись содержит 2 описанные изоформы и 1 потенциальную изоформу, которая сопоставлена ​​с помощью вычислений. Показать все Выровнять все

Y в ЛЕПРЧ.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

6EnsemblClinVar.5Ensembl.8EnsemblClinVar.Ensembl.5EnsemblClinVar.9Ensembl.
Функциональный ключ Позиция (я) Описание Действия Графическое представление Длина

В этом подразделе раздела «Последовательность» сообщается о различиях между канонической последовательностью (отображаемой по умолчанию в записи) и различными отправленными последовательностями, объединенными в записи.Эти различные материалы могут происходить из разных проектов секвенирования, разных типов экспериментов или разных биологических образцов. Конфликты последовательностей обычно имеют неизвестное происхождение.

Подробнее …

Конфликт последовательностей i 		601 D → последовательность N AA (PubMed: 3447155). 1
Конфликт последовательностей i 830 Последовательность P → E AA (PubMed: 3447155). 1
Конфликт последовательностей i 1278 K → N в CAA26096 (PubMed: 2

2).

 1
Функциональный ключ Позиция (я) Описание Действия Графическое представление Длина
Естественный вариант i VAR_058395 2 A → G

Ручное утверждение на основе эксперимент в i

  • «кДНК человеческого рецептора инсулина: структурная основа гормонально-активируемой трансмембранной передачи сигналов.»
    Эбина Ю., Эллис Л., Ярнагин К., Эдери М., Граф Л., Клаузер Э., У.-Х., Масиарц Ф., Кан Ю.В., Goldfine ID, Рот Р.А., Руттер В.Дж.
    Cell 40: 747-758 (1985) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цитируется для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ НУКЛЕОТИДОВ [MRNA] (ISOFORM LONG), ВАРИАНТЫ GLY-2; HIS-171; THR-448 И LYS- 492.

  • «Рецептор человеческого инсулина и его связь с семейством тирозинкиназ онкогенов».
    Ullrich A., Bell JR, Chen EY, Herrera R., Петруцелли Л.М., Тупой Т.Дж., Грей А., Кусенс Л., Ляо Ю.-К., Цубокава М., Мейсон А., Зеебург П.Х., Грюнфельд К., Розен О.М., Рамачандран Дж.
    Nature 313: 756-761 (1985) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract] Цитируется для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ НУКЛЕОТИДОВ [MRNA] (ISOFORM SHORT), ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 28-49 И 763-782, ГЛИКОЗИЛИРОВАНИЕ В ASN-43 И ASN-769, ВАРИАНТ GLY-2.

  • Указано за: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ НУКЛЕОТИДОВ [ГЕНОМНАЯ ДНК], ВАРИАНТ GLY-2.

  • Указано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ НУКЛЕОТИДОВ [LARGE SCALE MRNA] (ISOFORM SHORT), ВАРИАНТ GLY-2.

  • Указано за: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ НУКЛЕОТИДОВ [ГЕНОМИЧЕСКАЯ ДНК] OF 1-33, ВАРИАНТ GLY-2.
  • Указано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ НУКЛЕОТИДОВ [ГЕНОМИЧЕСКАЯ ДНК] OF 1-33, ВАРИАНТ GLY-2.
  • Указано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ НУКЛЕОТИДОВ [ГЕНОМИЧЕСКАЯ ДНК] OF 1-33, ВАРИАНТ GLY-2.
  • Указано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ НУКЛЕОТИДОВ [ГЕНОМИЧЕСКАЯ ДНК] OF 1-33, ВАРИАНТ GLY-2.
Соответствует варианту dbSNP: rs7508518EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_004079 42 N → K в RMS; ухудшает транспорт к плазматической мембране и снижает сродство к связыванию инсулина.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i

  • «Замена лизина на аспарагин в положении 15 в альфа-субъединице рецептора человеческого инсулина. Мутация, которая нарушает транспорт рецепторов на поверхность клетки и снижает сродство связывание инсулина ».
    Kadowaki T., Kadowaki H., Accili D., Taylor S.I.
    J. Biol. Chem. 265: 19143-19150 (1990) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

    Цитируется по: ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТА RMS LYS-42.

  • Указано для: ВАРИАНТ RMS LYS-42, ВАРИАНТ LEPRCH ARG-236, ВАРИАНТ ИРАН ТИПА A SER-489.

Соответствует варианту dbSNP: rs121		3EnsemblClinVar. 1
Естественный вариант i VAR_004080 55 В → A в LEPRCH; Верона-1.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs121

2EnsemblClinVar.

 1
Естественный вариант i VAR_079535 56 I → T в LEPRCH; отменяет посттрансляционную обработку.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i

  • «Две новые мутации, выявленные в семейных случаях с синдромом Донохью».
    Фалик Закчай TC, Кальфон Л., Клар А., Элиша М.Б., Гурвиц Х., Вайнгартен Г., Чечик Э., Флейшер Шеффер В., Хадж Яхья Р., Мейдан Г., Гросс-Кизельштейн Э., Бауман D., Hershkovitz S., Yaron Y., Orr-Urtreger A., ​​Wertheimer E.
    Mol. Genet. Genomic Med. 2: 64-72 (2014) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

    Цитируется для: ВАРИАНТЫ LEPRCH THR-56 И TYR-286, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH THR-56 И TYR-286.

Соответствует варианту dbSNP: rs1555689937EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_004081 58 G → R в LEPRCH; Хелмонд; тормозит переработку и транспортировку.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs52836744EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_015907 86 D → G в ИРАНе типа A.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i

  • «Идентификация двух новых мутаций рецептора инсулина, Asp59Gly и Leu62Pro, при синдроме крайней инсулинорезистентности типа А».
    Rouard M., Macari F., Bouix O., Lautier C., Brun J.F., Lefebvre P., Renard E., Bringer J., Jaffiol C., Grigorescu F.
    Biochem. Биофиз. Res. Commun. 234: 764-768 (1997) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цитируется по: ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА A GLY-86 И PRO-89.

 1
Естественный вариант i VAR_015908 89 L → P в Иране, тип A.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

  • «Идентификация двух романов. мутации рецепторов инсулина, Asp59Gly и Leu62Pro, при синдроме крайней инсулинорезистентности типа А. »
    Rouard M., Macari F., Bouix O., Lautier C., Brun J.F., Lefebvre P., Renard E., Bringer J., Jaffiol C., Григореску Ф.
    Biochem. Биофиз. Res. Commun. 234: 764-768 (1997) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цитируется по: ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА A GLY-86 И PRO-89.

 1
Естественный вариант i VAR_004082 113 R → P в LEPRCH; Атланта-1; отменяет связывание инсулина.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs121

3EnsemblClinVar.

 1
Естественный вариант i VAR_015909 119 A → V в LEPRCH; заметно ухудшает связывание инсулина.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs1347473020Ensembl.		 1
Естественный вариант i VAR_031518 120 L → Q в LEPRCH; подавляет рецепторную обработку.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

  • Процитировано для: ВАРИАНТ ИРАН ТИПА A HIS-279, ВАРИАНТЫ LEPRCH GLN-120; НОУ-350; ASP-458 И TRP-1119, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТА ИРАНА ТИПА A HIS-279, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH GLN-120 И ASP-458.

 1
Естественный вариант i VAR_015539 146 I → M в LEPRCH; незначительный.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs121

9EnsemblClinVar.

 1
Естественный вариант i VAR_015910 167 V → L в ИРАНе типа A.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs9025Ensembl.		 1
Естественный вариант i VAR_058396 171 Y → H

Ручное утверждение на основе эксперимента i

  • «кДНК человеческого инсулинового рецептора: структурная основа для гормонального образования. активированная трансмембранная передача сигналов «.
    Эбина Ю., Эллис Л., Ярнагин К., Эдери М., Граф Л., Клаузер Э., У.-Х., Масиарц Ф., Кан Ю.В., Goldfine ID, Рот Р.А., Руттер В.Дж.
    Cell 40: 747-758 (1985) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

    Цитируется для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ НУКЛЕОТИДОВ [MRNA] (ISOFORM LONG), ВАРИАНТЫ GLY-2; HIS-171; THR-448 И LYS-492.

Соответствует варианту dbSNP: rs1051692Ensembl.		 1
Естественный вариант i VAR_004083 220 P → L в сопротивлении Ins; тяжелая форма.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «Замена Leu на Pro-193 в рецепторе инсулина у пациента с генетической формой тяжелой инсулинорезистентности».
    Каррера П., Кордера Р., Феррари М., Кремонези Л., Тарамелли Р., Андрагетти Г., Кардуччи К., Дозио Н., Поцца Г., Тейлор С.И., Микосси П., Барбетти Ф.
    Hum. Мол. Genet. 2: 1437-1441 (1993) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

    Цитируется по: ВАРИАНТ СОПРОТИВЛЕНИЯ LEU-220.

Соответствует варианту dbSNP: rs7424Ensembl.		 1
Натуральный вариант i VAR_041429 228 C → R в образце аденокарциномы желудка; соматическая мутация.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i

  • «Паттерны соматических мутаций в геномах рака человека.»
    Гринман К., Стивенс П., Смит Р., Дэлглиш Г.Л., Хантер К., Бигнелл Г., Дэвис Х., Тиг Дж., Батлер А., Стивенс К., Эдкинс С., О’Мира С. ., Vastrik I., Schmidt EE, Avis T., Barthorpe S., Bhamra G., Buck G., Choudhury B., Clements J., Cole J., Dicks E., Forbes S., Gray K., Halliday К., Харрисон Р., Хиллз К., Хинтон Дж., Дженкинсон А., Джонс Д., Мензис А., Мироненко Т., Перри Дж., Рейн К., Ричардсон Д., Шеперд Р., Смолл А. , Тофтс К., Вариан Дж., Уэбб Т., Вест С., Видаа С., Йейтс А., Кэхилл Д.П., Луис Д.Н., Голдстроу П., Николсон А.Г., Брассер Ф., Лойенга Л., Вебер Б.Л., Чью Й.-Э., ДеФазио А., Гривз М.Ф., Грин А.Р., Кэмпбелл П., Бирни Э., Easton DF, Chenevix-Trench G., Tan M.-H., Khoo SK, Teh BT, Yuen ST, Leung SY, Wooster R., Futreal PA, Stratton MR
    Nature 446: 153-158 (2007) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

    Процитировано для: ВАРИАНТОВ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ АНАЛИЗА] ARG-228; АРГ-695; SER-811; МЕТ-1012; ВАЛ-1065 И АЛА-1282.

 1
Естественный вариант i VAR_004084 236 H → R в RMS и LEPRCH; Виннипег; может нарушить обработку рецепторов.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

  • Процитировано для: ВАРИАНТ RMS LYS-42, ВАРИАНТ LEPRCH ARG-236, ВАРИАНТ ИРАН ТИПА A SER-489.

  • Процитировано для: ВАРИАНТОВ RMS ARG-236 И SER-386, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS ARG-236 И SER-386.

Соответствует варианту dbSNP: rs121		5EnsemblClinVar. 1
Естественный вариант i VAR_079536 256 R → C в RMS.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «Структурная основа и корреляция генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину».
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ишиура Х., Цуджи С., Судзуки К., Такакура М., Бороевич К.А., Цунода Т., Ямаути Т., Седзима Н., Кадоваки Т.
    Диабет 66: 2713-2723 (2017) [PubMed] [Europe PMC] [Резюме]

    Цитируется по : ВАРИАНТОВ RMS CYS-256; НОУ-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА А ASP-489 И MET-1054, ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; АРГ-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

Соответствует варианту dbSNP: rs781007453EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_004085 260 L → P в LEPRCH; Geldeimalsen.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs121		1EnsemblClinVar. 1
Естественный вариант i VAR_015540 279 R → C в ИРАНе типа A; подавляет интернализацию рецепторов.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs1568470274Ensembl.		 1
Естественный вариант i VAR_031519 279 R → H в ИРАНе типа A; препятствует обработке рецепторов.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

  • Процитировано для: ВАРИАНТ ИРАН ТИПА A HIS-279, ВАРИАНТЫ LEPRCH GLN-120; НОУ-350; ASP-458 И TRP-1119, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТА ИРАНА ТИПА A HIS-279, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH GLN-120 И ASP-458.

Соответствует варианту dbSNP: rs13296Ensembl.		 1
Естественный вариант i VAR_015911 280 C → Y в ИРАНе типа A.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

1
Естественный вариант i VAR_079537 286 C → Y в LEPRCH; отменяет посттрансляционную обработку.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i

  • «Две новые мутации, выявленные в семейных случаях с синдромом Донохью.»
    Фалик Закчай Т.С., Кальфон Л., Клар А., Элиша М.Б., Гурвиц Х., Вайнгартен Г., Чечик Э., Флейшер Шеффер В., Хадж Яхья Р., Мейдан Г., Гросс-Кизельштейн Э., Бауман Д., Гершковиц С., Ярон Ю., Орр-Уртрегер А., Вертхаймер Э.
    Mol. Genet. Genomic Med. 2: 64-72 (2014) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цит. для: ВАРИАНТОВ LEPRCH THR-56 И TYR-286, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH THR-56 И TYR-286.

 1
Естественный вариант i VAR_028 301 1
Естественный вариант i VAR_015913 308 Отсутствует в LEPRCH; отменяет связывание инсулина.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

  • Цитируется по: VARIANT LEPRCH ASN-308 DEL.

  • Указано для: ВАРИАНТ LEPRCH ASN-308 DEL.

  • Указано за: ХАРАКТЕРИСТИКИ ВАРИАНТОВ LEPRCH PRO-113; ВАЛ-119; АСН-308 ДЕЛ; THR-925 И TRP-926, ВАРИАНТЫ RMS THR-997; THR-1143; TRP-1158 И TRP-1201.

 1
Естественный вариант i VAR_015914350 S → L в RMS и LEPRCH.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i

  • Цитируется для: ВАРИАНТ RMS СИНДРОМ LEU-350, ВАРИАНТЫ ИРАНА ТИПА A LEU-1205 И GLN-1378, ВАРИАНТ MET-1012.

  • Указано для: ВАРИАНТ ИРАН ТИП A HIS-279, ВАРИАНТЫ LEPRCH GLN-120; НОУ-350; ASP-458 И TRP-1119, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТА ИРАНА ТИПА A HIS-279, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH GLN-120 И ASP-458.

 1
Естественный вариант i VAR_015541 362 Отсутствует в LEPRCH.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

1
Естественный вариант i VAR_031520 386 G → S в RMS; может нарушить обработку рецепторов.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs764221583Ensembl.		 1
Естественный вариант i VAR_004086 393 G → R в LEPRCH; Верона-1.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs267607184EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_004087 409 F → V в ИРАНе типа A.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs121		2Ensembl. 1
Естественный вариант i VAR_015542 439 W → S в LEPRCH; нарушает транспорт рецептора к поверхности клетки.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs121

8EnsemblClinVar.

 1
Естественный вариант i VAR_015915 448 I → T

Ручное утверждение на основе эксперимента i

  • «кДНК человеческого инсулинового рецептора: структурная основа гормонального активированная трансмембранная передача сигналов.»
    Эбина Ю., Эллис Л., Ярнагин К., Эдери М., Граф Л., Клаузер Э., У.-Х., Масиарц Ф., Кан Ю.В., Goldfine ID, Рот Р.А., Руттер В.Дж.
    Cell 40: 747-758 (1985) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цитируется для: NUCLEOTIDE SEQUENCE [MRNA] (ISOFORM LONG), VARIANTS GLY-2; HIS-171; THR-448 AND LYS- 492.

Соответствует варианту dbSNP: rs1051691Ensembl.		 1
Натуральный вариант i VAR_031521 458 N → D в LEPRCH с сильным фосфором; частично ингибирует процессинг рецепторов LEPRCH; частично подавляет процессинг рецепторов LEPRCH; частично подавляет процессинг рецепторов индуцирует уровни фосфорилирования IRS-1 дикого типа.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

  • Процитировано для: ВАРИАНТ ИРАН ТИПА A HIS-279, ВАРИАНТЫ LEPRCH GLN-120; НОУ-350; ASP-458 И TRP-1119, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТА ИРАНА ТИПА A HIS-279, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH GLN-120 И ASP-458.

Соответствует варианту dbSNP: rs1210EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_004088 487 K → E в LEPRCH; АРК-1.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs121		 1
Естественный вариант i VAR_079538 489 N → D в ИРАНе типа A; неизвестное патологическое значение.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «Структурная основа и корреляция генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину.»
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ишиура Х., Цуджи С. , Suzuki K., Takakura M., Boroevich KA, Tsunoda T., Yamauchi T., Shojima N., Kadowaki T.
    Diabetes 66: 2713-2723 (2017) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цит. для: ВАРИАНТОВ RMS CYS-256; LEU-635; ILE-835; VAL-842; LEU-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ IRAN ТИПА A ASP-489 И MET-1054 , ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; ARG-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635 ; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

Соответствует варианту dbSNP: rs1135401742EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_004089 489 N → S в ИРАНе типа A.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs121		7Ensembl. 1
Естественный вариант i VAR_015916 492 Q → K

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «кДНК человеческого инсулинового рецептора: структурная основа для гормона- активированная трансмембранная передача сигналов.»
    Эбина Ю., Эллис Л., Ярнагин К., Эдери М., Граф Л., Клаузер Э., У.-Х., Масиарц Ф., Кан Ю.В., Goldfine ID, Рот Р.А., Руттер В.Дж.
    Cell 40: 747-758 (1985) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цитируется для: NUCLEOTIDE SEQUENCE [MRNA] (ISOFORM LONG), VARIANTS GLY-2; HIS-171; THR-448 AND LYS- 492.

 1
Естественный вариант i VAR_079539 635 S → L в RMS; уменьшает пост-трансляционную обработку.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «Структурная основа и корреляция генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину».
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ишиура Х., Цуджи С., Судзуки К., Такакура М., Бороевич К.А., Цунода Т., Ямаути Т., Седзима Н., Кадоваки Т.
    Диабет 66: 2713-2723 (2017) [PubMed] [Europe PMC] [Резюме]

    Цитируется по : ВАРИАНТОВ RMS CYS-256; НОУ-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА А ASP-489 И MET-1054, ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; АРГ-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

 1
Естественный вариант i VAR_079540 657 V → F в LEPRCH; ухудшает посттрансляционную обработку.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «Структурная основа и корреляция генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину».
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айдзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ишиура Х., Цудзи С., Судзуки К., Такакура М., Бороевич К.А., Цунода Т., Ямаути Т., Седзима Н., Кадоваки Т.
    Diabetes 66: 2713-2723 (2017) [ PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

    Процитировано для: ВАРИАНТЫ RMS CYS-256; НОУ-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА А ASP-489 И MET-1054, ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; АРГ-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

Соответствует варианту dbSNP: rs1135401737EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_079541 659 W → R в LEPRCH; ухудшает посттрансляционную обработку.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «Структурная основа и корреляция генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину».
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Aizu K., Kawamura T., Miyata I., Satomura K., Ito T., Hara K., Tanaka M., Ishiura H., Tsuji S., Suzuki K., Takakura M., Boroevich KA, Tsunoda T. ., Ямаути Т., Седзима Н., Кадоваки Т.
    Diabetes 66: 2713-2723 (2017) [PubMed] [Europe PMC] [Резюме]

    Цитируется для: ВАРИАНТЫ RMS CYS-256; НОУ-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА А ASP-489 И MET-1054, ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; АРГ-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

 1
Естественный вариант i VAR_041430 695 Q → R

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

  • «Паттерны соматических мутаций в геномах рака человека. »
    Гринман К., Стивенс П., Смит Р., Дэлглиш Г.Л., Хантер К., Бигнелл Г., Дэвис Х., Тиг Дж., Батлер А., Стивенс К., Эдкинс С., О’Мира С. , Вастрик И., Шмидт Э., Авис Т., Барторп С., Bhamra G., Buck G., Choudhury B., Clements J., Cole J., Dicks E., Forbes S., Gray K., Halliday K., Harrison R., Hills K., Hinton J., Jenkinson А., Джонс Д., Мензис А., Мироненко Т., Перри Дж., Рейн К., Ричардсон Д., Шеперд Р., Смолл А., Тофтс К., Вариан Дж., Уэбб Т., Вест С. , Видаа С., Йейтс А., Кэхилл Д.П., Луис Д.Н., Голдстроу П., Николсон А.Г., Брассер Ф., Лойенга Л., Вебер Б.Л., Чью Ю.-Э., ДеФацио А., Гривз М.Ф., Грин А.Р., Кэмпбелл П., Бирни Э., Истон Д. Ф., Ченвикс-Тренч Г., Тан М.-Х., Кху С.К., Тех Б.Т., Юэн С.Т., Люнг С.И., Вустер Р., Футреал ПА, Страттон М.Р.
    Nature 446: 153-158 (2007) [PubMed] [Europe PMC] [Резюме]

    Процитировано для: ВАРИАНТОВ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ АНАЛИЗА] ARG-228; АРГ-695; SER-811; МЕТ-1012; ВАЛ-1065 И АЛА-1282.

Соответствует варианту dbSNP: rs55		 1
Естественный вариант i VAR_004090 762 R → S в ИРАНе типа A.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs121		 1
Естественный вариант i VAR_041431 811 G → S

Ручное утверждение на основе эксперимента i

  • «Паттерны соматических мутаций в геномах рака человека».
    Гринман К., Стивенс П., Смит Р., Дэлглиш Г. Л., Хантер К., Бигнелл Г., Дэвис Х., Тиг Дж., Батлер А., Стивенс К., Эдкинс С., О’Мира С., Вастрик И., Шмидт Э., Авис Т., Барторп С., Бхамра Г., Бак Г., Чоудхури Б., Клементс Дж., Коул Дж., Дикс Э., Форбс С., Грей К., Холлидей К., Харрисон Р., Хиллз К., Хинтон Дж., Дженкинсон А., Джонс Д., Мензис А., Мироненко Т., Перри Дж. ., Рейн К., Ричардсон Д., Шеперд Р., Смолл А., Тофтс К., Вариан Дж., Уэбб Т., Вест С., Видаа С., Йейтс А., Кэхилл Д.П., Луис Д.Н., Голдстрау П. ., Николсон А.Г., Брассер Ф., Лойенга Л., Вебер Б.Л., Чью Ю.-Э., ДеФацио А., Гривз М.Ф., Грин А.Р., Кэмпбелл П., Бирни Э., Истон Д.Ф., Ченвикс-Тренч Г., Тан М.-Х., Ху С.К., Тех Б.Т., Юэнь С.Т., Люн С.Ю., Wooster R., Futreal PA, Stratton MR
    Nature 446: 153-158 (2007) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цитируется для: ВАРИАНТОВ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ АНАЛИЗА] ARG-228; АРГ-695; SER-811; МЕТ-1012; ВАЛ-1065 И АЛА-1282.

Соответствует варианту dbSNP: rs35045353Ensembl.		 1
Естественный вариант i VAR_079542 818 Y → C в LEPRCH; отменяет посттрансляционную обработку.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

  • Цитируется для: ВАРИАНТЫ LEPRCH CYS-818 И 890-ARG — SER-1382 DEL.

  • «Структурная основа и корреляции генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину».
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ишиура Х., Цуджи С., Судзуки К., Такакура М., Бороевич К.А., Цунода Т., Ямаути Т., Shojima N., Kadowaki T.
    Diabetes 66: 2713-2723 (2017) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цитируется для: ВАРИАНТЫ RMS CYS-256; НОУ-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА А ASP-489 И MET-1054, ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; АРГ-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

 1
Естественный вариант i VAR_055986 830 P → L.Соответствует варианту dbSNP: rs2162771Ensembl. 1
Естественный вариант i VAR_079543 ​​ 835 S → I в RMS; ухудшает посттрансляционную обработку.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «Структурная основа и корреляция генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину».
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айдзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ишиура Х., Цудзи С., Судзуки К., Такакура М., Бороевич К.А., Цунода Т., Ямаути Т., Седзима Н., Кадоваки Т.
    Diabetes 66: 2713-2723 (2017) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цитируется для: ВАРИАНТЫ RMS CYS-256; НОУ-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА А ASP-489 И MET-1054, ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; АРГ-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

Соответствует варианту dbSNP: rs1135401739EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_079544 842 A → V в среднеквадратичном значении; уменьшает посттрансляционную обработку.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «Структурная основа и корреляция генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину».
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айдзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ишиура Х., Цудзи С., Судзуки К., Такакура М., Бороевич К.А., Цунода Т., Ямаути Т. ., Shojima N., Kadowaki T.
    Diabetes 66: 2713-2723 (2017) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цитируется по: ВАРИАНТЫ RMS CYS-256; НОУ-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА А ASP-489 И MET-1054, ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; АРГ-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

Соответствует варианту dbSNP: rs1135401738EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_015917 858 T → A в NIDDM.

Ручное утверждение на основе эксперимента i

  • «Частота мутаций гена рецептора инсулина у японских пациентов с NIDDM».
    Кан М., Канаи Ф., Иида М., Джинноути Х., Тодака М., Иманака Т., Ито К., Нисиока Ю., Охниши Т., Камохара С., Хаяси Х., Мураками Т., Кагава С., Сано Х., Хашимото Н., Йошида С., Макино Х., Эбина Ю.
    Диабет 44: 1081-1086 (1995) [PubMed] [ Europe PMC] [Реферат]

    Цитируется по: ВАРИАНТ NIDDM ALA-858, ВАРИАНТ CYS-1361.

Соответствует варианту dbSNP: rs182552223EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_079545 874 P → L в RMS; ухудшает посттрансляционную обработку.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «Структурная основа и корреляция генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину».
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ишиура Х., Цуджи С., Судзуки К., Такакура М., Бороевич К.А., Цунода Т., Ямаути Т., Седзима Н., Кадоваки Т.
    Диабет 66: 2713-2723 (2017) [PubMed] [Europe PMC] [Резюме]

    Цитируется по : ВАРИАНТОВ RMS CYS-256; НОУ-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА А ASP-489 И MET-1054, ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; АРГ-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

 1
Естественный вариант i VAR_079546 878 N → S в RMS; ухудшает посттрансляционную обработку.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «Структурная основа и корреляция генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину».
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айдзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ишиура Х., Цудзи С., Судзуки К., Такакура М., Бороевич К.А., Цунода Т., Ямаути Т., Седзима Н., Кадоваки Т.
    Diabetes 66: 2713-2723 (2017) [ PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

    Процитировано для: ВАРИАНТЫ RMS CYS-256; НОУ-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА А ASP-489 И MET-1054, ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; АРГ-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

Соответствует варианту dbSNP: rs8871		 1
Естественный вариант i VAR_079547 890 — 1382 Отсутствует в LEPRCH.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Добавить BLAST		 493
Естественный вариант i VAR_015918 925 I → T в LEPRCH; отменяет посттрансляционную обработку; отменяет связывание инсулина.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

  • Цитируется по: ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PRO-113; ВАЛ-119; АСН-308 ДЕЛ; THR-925 И TRP-926, ВАРИАНТЫ RMS THR-997; THR-1143; TRP-1158 И TRP-1201.

  • «Структурная основа и корреляции генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину».
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ishiura H., Tsuji S., Suzuki K., Takakura M., Boroevich KA, Tsunoda T., Yamauchi T., Shojima N., Kadowaki T.
    Diabetes 66: 2713-2723 (2017) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

    Цитируется по: ВАРИАНТЫ RMS CYS-256; НОУ-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА А ASP-489 И MET-1054, ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; АРГ-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

Соответствует варианту dbSNP: rs1599881881EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_015919 926 R → W в LEPRCH; заметно ухудшает связывание инсулина; ухудшает посттрансляционную обработку.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

  • Цитируется по: ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PRO-113; ВАЛ-119; АСН-308 ДЕЛ; THR-925 И TRP-926, ВАРИАНТЫ RMS THR-997; THR-1143; TRP-1158 И TRP-1201.

  • «Структурная основа и корреляции генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину».
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ишиура Х., Цуджи С., Судзуки К., Такакура М., Бороевич К.А., Цунода Т., Ямаути Т., Седзима Н., Кадоваки Т.
    Диабет 66: 2713-2723 (2017) [PubMed] [Europe PMC] [Резюме]

    Цитируется по : ВАРИАНТОВ RMS CYS-256; НОУ-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА А ASP-489 И MET-1054, ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; АРГ-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

Соответствует варианту dbSNP: rs9963Ensembl.		 1
Естественный вариант i VAR_015920 937 T → M в LEPRCH; нарушение обработки рецепторов; ухудшает посттрансляционную обработку.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i

  • «Четыре мутантных аллеля гена рецептора инсулина, связанные с генетическими синдромами крайней инсулинорезистентности».
    Кадоваки Х., Такахаши Ю., Андо А., Момомура К., Кабураги Ю., Куин Дж. Д., Маккуиш А. С., Кода Н., Фукусима Ю., Тейлор С. И., Аканума Ю., Ядзаки Ю., Кадоваки Т.
    Biochem. Биофиз. Res. Commun. 237: 516-520 (1997) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

    Цитируется по: ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТА LEPRCH MET-937.

  • «Структурная основа и корреляции генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину».
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ишиура Х., Цудзи С., Судзуки К., Такакура М., Бороевич К.А., Цунода Т., Ямаути Т., Седзима Н. ., Kadowaki T.
    Diabetes 66: 2713-2723 (2017) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цитируется по: ВАРИАНТЫ RMS CYS-256; НОУ-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА А ASP-489 И MET-1054, ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; АРГ-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

 1
Естественный вариант i VAR_015921 997 P → T в RMS; снижает связывание инсулина.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

1
Естественный вариант i VAR_079548 999 — 1382 Отсутствует в RMS.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «Структурная основа и корреляция генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину.»
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ишиура Х., Цуджи С. , Suzuki K., Takakura M., Boroevich KA, Tsunoda T., Yamauchi T., Shojima N., Kadowaki T.
    Diabetes 66: 2713-2723 (2017) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цит. для: ВАРИАНТОВ RMS CYS-256; LEU-635; ILE-835; VAL-842; LEU-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ IRAN ТИПА A ASP-489 И MET-1054 , ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; ARG-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635 ; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

Добавить BLAST		 384
Естественный вариант i VAR_004091 1012 V → M

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

MET

  • Cited for: 900-96 VARIANT 1012.

  • Указано для: ВАРИАНТ MET-1012.

  • Указано для: ВАРИАНТ RMS-СИНДРОМА LEU-350, ВАРИАНТЫ ИРАНА ТИПА A LEU-1205 И GLN-1378, ВАРИАНТ MET-1012.

  • Указано для: ВАРИАНТ MET-1012.

  • «Паттерны соматических мутаций в геномах рака человека».
    Гринман К., Стивенс П., Смит Р., Дэлглиш Г.Л., Хантер К., Бигнелл Г., Дэвис Х., Тиг Дж., Батлер А., Стивенс К., Эдкинс С., О’Мира С. , Вастрик И., Шмидт Э., Авис Т., Барторп С., Бхамра Г., Бак Г., Чоудхури Б., Клементс Дж., Коул Дж., Дикс Э., Форбс С., Грей К., Холлидей К. ., Харрисон Р., Хиллс К., Хинтон Дж., Дженкинсон А., Jones D., Menzies A., Mironenko T., Perry J., Raine K., Richardson D., Shepherd R., Small A., Tofts C., Varian J., Webb T., West S., Widaa С., Йейтс А., Кэхилл Д.П., Луис Д.Н., Голдстроу П., Николсон А.Г., Брассер Ф., Лойенга Л., Вебер Б.Л., Чью Ю.-Э., ДеФацио А., Гривз М.Ф., Грин А.Р., Кэмпбелл П. ., Бирни Э., Истон Д. Ф., Ченевикс-Тренч Г., Тан М.-Х., Кху С.К., Тех Б.Т., Юэн С.Т., Леунг С.Ю., Вустер Р., Футреал П.А., Страттон М.Р.
    Nature 446: 153-158 (2007) [PubMed] [Europe PMC] [Резюме]

    Процитировано для: ВАРИАНТОВ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ АНАЛИЗА] ARG-228; АРГ-695; SER-811; МЕТ-1012; ВАЛ-1065 И АЛА-1282.

Соответствует варианту dbSNP: rs1799816EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_004092 1020 R → Q в ИРАНе типа A.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs121		8Ensembl. 1
Естественный вариант i VAR_015922 1023 I → F

Утверждение вручную на основе эксперимента в i

1
Естественный вариант _00 3 VAR 1035 G → V в ИРАНе типа A.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «Человеческий диабет, связанный с мутацией в тирозинкиназном домене рецептора инсулина».
    Odawara M., Kadowaki T., Yamamoto R., Shibasaki Y., Tobe K., Accili D., Bevins C., Mikami Y., Matsuura N., Akanuma Y., Takaku F., Taylor SI, Kasuga M.
    Science 245: 66-68 (1989) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цитируется по: ВАРИАНТ ИРАН ТИПА A VAL-1035.

Соответствует варианту dbSNP: rs121		 1
Естественный вариант i VAR_079549 1054 В → M в ИРАНе типа A; неизвестное патологическое значение.

Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

  • «Структурная основа и корреляция генотип-фенотип мутаций INSR, вызывающих серьезную резистентность к инсулину».
    Хосоэ Дж., Кадоваки Х., Мия Ф., Айзу К., Кавамура Т., Мията И., Сатомура К., Ито Т., Хара К., Танака М., Ишиура Х., Цуджи С., Судзуки К., Такакура М., Бороевич К.А., Цунода Т., Ямаути Т., Седзима Н., Кадоваки Т.
    Diabetes 66: 2713-2723 (2017) [PubMed] [Europe PMC] [Резюме ]

    Процитировано для: ВАРИАНТОВ RMS CYS-256; НОУ-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874; SER-878 И 999-TYR — SER-1382 DEL, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА А ASP-489 И MET-1054, ВАРИАНТЫ LEPRCH PHE-657; ARG-659 И CYS-818, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH PHE-657; АРГ-659; CYS-818; THR-925; TRP-926 И MET-937, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ RMS LEU-635; ИЛЭ-835; ВАЛ-842; НОУ-874 И SER-878.

Соответствует варианту dbSNP: rs1135401741EnsemblClinVar.		 1
Естественный вариант i VAR_015923 1055 A → V в ИРАНе типа A.

Утверждение вручную на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs1599874183Ense.		 1
Естественный вариант i VAR_041432 1065 L → V

Ручное утверждение на основе эксперимента i

  • «Паттерны соматических мутаций в геномах рака человека.»
    Гринман К., Стивенс П., Смит Р., Дэлглиш Г.Л., Хантер К., Бигнелл Г., Дэвис Х., Тиг Дж., Батлер А., Стивенс К., Эдкинс С., О’Мира С. ., Vastrik I., Schmidt EE, Avis T., Barthorpe S., Bhamra G., Buck G., Choudhury B., Clements J., Cole J., Dicks E., Forbes S., Gray K., Halliday К., Харрисон Р., Хиллз К., Хинтон Дж., Дженкинсон А., Джонс Д., Мензис А., Мироненко Т., Перри Дж., Рейн К., Ричардсон Д., Шеперд Р., Смолл А. , Тофтс К., Вариан Дж., Уэбб Т., Вест С., Видаа С., Йейтс А., Кэхилл Д.П., Луис Д.Н., Голдстроу П., Николсон А.Г., Брассер Ф., Лойенга Л., Вебер Б.Л., Чью Й.-Э., ДеФазио А., Гривз М.Ф., Грин А.Р., Кэмпбелл П., Бирни Э., Easton DF, Chenevix-Trench G., Tan M.-H., Khoo SK, Teh BT, Yuen ST, Leung SY, Wooster R., Futreal PA, Stratton MR
    Nature 446: 153-158 (2007) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

    Процитировано для: ВАРИАНТОВ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ АНАЛИЗА] ARG-228; АРГ-695; SER-811; МЕТ-1012; ВАЛ-1065 И АЛА-1282.

Соответствует варианту dbSNP: rs563		EnsemblClinVar. 1
Естественный вариант i VAR_004094 1075 A → D в ИРАНе типа A.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

1
Естественный вариант i VAR_015924 1095 K → E в теме NIDDM.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs90		99Ensembl. 1
Естественный вариант i VAR_015925 1119 R → W в LEPRCH.

Ручное утверждение на основе эксперимента i

  • «Молекулярный анализ гена рецептора инсулина для пренатальной диагностики лепрекона в двух семьях».
    Desbois-Mouthon C., Girodon E., Ghanem N., Caron M., Pennerath A., Conteville P., Magre J., Besmond C., Goossens M., Capeau J., Amselem S.
    Prenat. Диаг. 17: 657-663 (1997) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

    Цитируется по: ВАРИАНТЫ LEPRCH TRP-1119 И LYS-1206.

  • Указано для: ВАРИАНТ ИРАН ТИП A HIS-279, ВАРИАНТЫ LEPRCH GLN-120; НОУ-350; ASP-458 И TRP-1119, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТА ИРАНА ТИПА A HIS-279, ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ LEPRCH GLN-120 И ASP-458.

Соответствует варианту dbSNP: rs12271Ensembl.		 1
Естественный вариант i VAR_015926 1143 I → T в RMS; снижает связывание инсулина.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

1
Естественный вариант i VAR_015927 1158 R → Q в NIDDM.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

1
Естественный вариант i VAR_015928 1158 R → W в RMS; отменяет связывание инсулина.

Ручное утверждение на основе эксперимента в i

Соответствует варианту dbSNP: rs1119
  • Ensembl.
    		•  1
    Естественный вариант i VAR_004095 1161 A → T в ИРАНе типа A.

    Ручное утверждение на основе эксперимента в i

    Соответствует варианту dbSNP: rs121    		 1
    Естественный вариант i VAR_004096 1162 A → E в ИРАНе типа A; ухудшает протеолитический процессинг.

    Ручное утверждение на основе эксперимента в i

    • Цитируется по: ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТА ИРАНА ТИПА A GLU-1162.

    Соответствует варианту dbSNP: rs121

    4EnsemblClinVar.

    		 1
    Естественный вариант i VAR_004097 1180 M → I у пациента с инсулинорезистентностью.

    Ручное утверждение на основе эксперимента в i

    Соответствует варианту dbSNP: rs121

    7EnsemblClinVar.

    		 1
    Естественный вариант i VAR_004098 1191 R → Q в NIDDM.

    Ручное утверждение, основанное на эксперименте i

    • «NIDDM, связанный с мутацией в тирозинкиназном домене гена рецептора инсулина».
      Cocozza S., Porcellini A., Riccardi G., Monticelli A., Condorelli G., Ferrara A., Pianese L., Miele C., Capaldo B., Beguinot F., Varrone S.
      Diabetes 41: 521 -526 (1992) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

      Цитируется по: ВАРИАНТ NIDDM GLN-1191.

    Соответствует варианту dbSNP: rs121

    0EnsemblClinVar.

    		 1
    Естественный вариант i VAR_015929 1201 R → Q в HHF5 и IRAN типа A; препятствует активации киназы инсулином.

    Ручное утверждение на основе эксперимента в i

    • Процитировано для: ВАРИАНТ ИРАН ТИПА A GLN-1201.

    • Указано для: ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТА ИРАНА ТИПА A GLN-1201.

    • Процитировано для: ВАРИАНТ HHF5 GLN-1201.

    Соответствует варианту dbSNP: rs121

    6EnsemblClinVar.

    		 1
    Естественный вариант i VAR_015930 1201 R → W в LEPRCH и RMS; снижает связывание инсулина, возможно, из-за снижения уровня рецепторов на поверхности клетки.

    Ручное утверждение на основе эксперимента в i

    • Цитируется для: ВАРИАНТЫ LEPRCH TYR-301 И TRP-1201.

    • Указано за: ХАРАКТЕРИСТИКИ ВАРИАНТОВ LEPRCH PRO-113; ВАЛ-119; АСН-308 ДЕЛ; THR-925 И TRP-926, ВАРИАНТЫ RMS THR-997; THR-1143; TRP-1158 И TRP-1201.

    Соответствует варианту dbSNP: rs1568426700EnsemblClinVar.    		 1
    Естественный вариант i VAR_004099 1205 P → L в ИРАНе типа A; умеренный.

    Ручное утверждение на основе эксперимента i

    • «Обнаружение мутаций в гене рецептора инсулина у пациентов с инсулинорезистентностью путем анализа одноцепочечных конформационных полиморфизмов.»
      Ким Х., Кадоваки Х., Сакура Х., Одавара М., Момомура К., Такахаши Ю., Миядзаки Ю., Охтани Т., Аканума Ю., Ядзаки Ю., Касуга М., Тейлор С. И., Kadowaki T.
      Diabetologia 35: 261-266 (1992) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

      Процитировано для: ВАРИАНТ ИРАН, ТИП A LEU-1205.

    • Процитировано для: VARIANT RMS SYNDROME LEU -350, ВАРИАНТЫ ИРАН ТИПА A LEU-1205 И GLN-1378, ВАРИАНТ MET-1012.

    Соответствует варианту dbSNP: rs12    		322Ensembl. 1
    Естественный вариант i VAR_015931 1206 E → D в ИРАНе типа A; ускоряет распад белка и снижает активность киназы.

    Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i

    • «Две естественные мутации в киназном домене инсулинового рецептора ускоряют деградацию инсулинового рецептора и ухудшают киназную активность».
      Имамура Т., Таката Ю., Сасаока Т., Такада Ю., Мориока Х., Харута Т., Сава Т., Иваниши М., Ху Ю.Г., Судзуки Ю., Хамада Дж., Кобаяси М.
      J. Biol. Chem. 269: 31019-31027 (1994) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

      Цитируется по: ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ ИРАН ТИПА A ASP-1206 И LEU-1220.

    		 1
    Естественный вариант i VAR_015932 1206 E → K в LEPRCH.

    Ручное утверждение на основе эксперимента i

    • «Молекулярный анализ гена рецептора инсулина для пренатальной диагностики лепрекона в двух семьях.»
      Desbois-Mouthon C., Girodon E., Ghanem N., Caron M., Pennerath A., Conteville P., Magre J., Besmond C., Goossens M., Capeau J., Amselem S.
      Prenat Диагностика 17: 657-663 (1997) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

      Цитируется для: ВАРИАНТЫ LEPRCH TRP-1119 И LYS-1206.

    		 1
    Натуральный вариант i VAR_004100 1220 W → L в ИРАНе типа A; ускоряет деградацию белка и снижает активность киназы.

    Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i

    • Процитировано для: ВАРИАНТ МНОЖЕСТВЕННОСТИ LEU-1220.

    • «Две естественные мутации в киназном домене рецептора инсулина ускоряют деградацию рецептора инсулина и ухудшают киназную активность».
      Имамура Т., Таката Ю., Сасаока Т., Такада Ю., Мориока Х., Харута Т., Сава Т., Иваниши М., Ху Ю.Г., Судзуки Ю., Хамада Дж., Кобаяси М.
      Дж. Биол. Chem. 269: 31019-31027 (1994) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

      Цитируется по: ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ ИРАН ТИПА A ASP-1206 И LEU-1220.

    Соответствует варианту dbSNP: rs52800171Ensembl.    		 1
    Естественный вариант i VAR_004101 1227 W → S в ИРАНе типа A.

    Ручное утверждение на основе эксперимента в i

    Соответствует варианту dbSNP: rs121    		0Ensemb. 1
    Естественный вариант i VAR_041433 1282 T → A

    Ручное утверждение на основе эксперимента i

    • «Паттерны соматических мутаций в геномах рака человека.»
      Гринман К., Стивенс П., Смит Р., Дэлглиш Г.Л., Хантер К., Бигнелл Г., Дэвис Х., Тиг Дж., Батлер А., Стивенс К., Эдкинс С., О’Мира С. ., Vastrik I., Schmidt EE, Avis T., Barthorpe S., Bhamra G., Buck G., Choudhury B., Clements J., Cole J., Dicks E., Forbes S., Gray K., Halliday К., Харрисон Р., Хиллз К., Хинтон Дж., Дженкинсон А., Джонс Д., Мензис А., Мироненко Т., Перри Дж., Рейн К., Ричардсон Д., Шеперд Р., Смолл А. , Тофтс К., Вариан Дж., Уэбб Т., Вест С., Видаа С., Йейтс А., Кэхилл Д.П., Луис Д.Н., Голдстроу П., Николсон А.Г., Брассер Ф., Лойенга Л., Вебер Б.Л., Чью Й.-Э., ДеФазио А., Гривз М.Ф., Грин А.Р., Кэмпбелл П., Бирни Э., Easton DF, Chenevix-Trench G., Tan M.-H., Khoo SK, Teh BT, Yuen ST, Leung SY, Wooster R., Futreal PA, Stratton MR
      Nature 446: 153-158 (2007) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат]

      Процитировано для: ВАРИАНТОВ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ АНАЛИЗА] ARG-228; АРГ-695; SER-811; МЕТ-1012; ВАЛ-1065 И АЛА-1282.

    Соответствует варианту dbSNP: rs55875349Ensembl.    		 1
    Естественный вариант i VAR_015933 1361 Y → C

    Ручное утверждение на основе эксперимента i

    • «Частота мутаций гена рецептора инсулина у японских пациентов с NIDDM . »
      Кан М., Канаи Ф., Иида М., Джинноути Х., Тодака М., Иманака Т., Ито К., Нисиока Ю., Охниши Т., Камохара С., Хаяси Х., Мураками Т., Кагава С., Сано Х., Хашимото Н., Ёсида С., Макино Х., Ebina Y.
      Diabetes 44: 1081-1086 (1995) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]

      Цитируется для: ВАРИАНТ NIDDM ALA-858, ВАРИАНТ CYS-1361.

    Соответствует варианту dbSNP: rs13306449EnsemblClinVar.    		 1
    Естественный вариант i VAR_015934 1378 R → Q в ИРАНе типа A.

    Ручное утверждение на основе эксперимента в i

    Соответствует варианту dbSNP: rs52826008Ensembl.    		 1
    Функциональный ключ Позиция (я) Описание Действия Графический вид Длина

    В этом подразделе раздела «Последовательность» описывается последовательность встречающейся в природе альтернативной изоформы (ов) белка.Изменения в аминокислотной последовательности могут быть связаны с альтернативным сплайсингом, использованием альтернативного промотора, альтернативной инициацией или рибосомным сдвигом рамки.

    Подробнее …

    Альтернативная последовательность i VSP_002898    		 745 — 756 Отсутствует в изоформе Short.

    Информация, подобранная вручную, основанная на утверждениях в научных статьях, не подтвержденных экспериментально.

    Дополнительно …

    Ручное утверждение, основанное на мнении в i

    • «Рецептор инсулина человека и его связь с семейством тирозинкиназ онкогенов».
      Ullrich A., Bell JR, Chen EY, Herrera R., Petruzzelli LM, Dull TJ, Gray A., Coussens L., Liao Y.-C., Tsubokawa M., Mason A., Seeburg PH, Grunfeld C. ., Розен О.М., Рамачандран Дж.
      Nature 313: 756-761 (1985) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract] Цитируется для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ НУКЛЕОТИДОВ [MRNA] (ISOFORM SHORT), ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 28-49 И 763-782, ГЛИКОЗИЛИРОВАНИЕ В ASN- 43 И ASN-769, ВАРИАНТ GLY-2.

    • Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ НУКЛЕОТИДОВ [LARGE SCALE MRNA] (ISOFORM SHORT), ВАРИАНТ GLY-2.

    • Указано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ НУКЛЕОТИДОВ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ MRNA] OF 538-1382 (ISOFORM SHORT).
    Добавить BLAST    		 12

    Энциклопедия биологической химии — 2-е издание

    УИЛЬЯМ Дж.ЛЕННАРЦ получил степень бакалавра наук. получил степень доктора химии в Университете штата Пенсильвания и получил степень доктора философии. по органической химии Иллинойского университета. Впоследствии он вместе с Конрадом Блохом занимался постдокторской работой в Гарварде по биосинтезу жирных кислот. В 1962 году он был назначен доцентом факультета физиологической химии Университета Джонса Хопкинса. После повышения до адъюнкт-профессора в 1967 году и профессора в 1971 году он оставался в Хопкинсе до 1983 года. В то время он был назначен Робертом А.Уэлч, профессор и заведующий кафедрой биохимии и молекулярной биологии онкологического центра Техасского университета, больница доктора медицины Андерсона. В 1989 году он стал ведущим профессором и заведующим кафедрой биохимии и клеточной биологии SUNY в Стоуни-Брук. В 1990 году он основал и стал директором Института клеточной биологии и биологии развития в Стоуни-Брук.

    Доктор Леннарц работал во многих национальных и международных комитетах. Он был президентом Организации председателя биохимии, президентом Американского общества биохимии и молекулярной биологии и президентом Общества гликобиологии.Он был членом Исполнительного комитета Международного союза биохимии и молекулярной биологии почти десять лет.

    Он читал специальные лекции в Университете Нотр-Дам, NIH, Университете Западной Вирджинии, Университете Джона Хопкинса, Университете штата Флорида, Калифорнийском университете в Сан-Диего, Университете Арканзаса, Университете Индианы и Медицинском колледже Вирджиния.

    Он является членом Национальной академии наук.В центре его ранних работ были липиды и поверхности бактериальных клеток. В последнее время были предприняты попытки исследовать структуру, биосинтез и функцию гликопротеинов клеточной поверхности. Изначально исследования биосинтеза проводились на печени и яйцеводах, но теперь эти усилия сосредоточены на дрожжах. Функциональные исследования были сосредоточены на роли гликопротеинов клеточной поверхности в оплодотворении и раннем развитии морского ежа, а в последнее время и лягушки. Он занимал должность заслуженного профессора и заведующего кафедрой.Теперь он заслуженный профессор.

    Терапевтическая миРНК: современное состояние

  • 1.

    Ангуела, X. М. и Хай, К. А. Начало современной эры генной терапии. Annu Rev. Med. 70 , 273–288 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 2.

    Weng, Y. et al. Терапевтический РНКи и его инновационная биотехнологическая эволюция. Biotechnol. Adv. 37 , 801–825 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 3.

    Weng, Y. et al. Проблемы и перспективы ландшафта терапии мРНК. Biotechnol. Adv. 40 , 107534 (2020).

    CAS PubMed Google ученый

  • 4.

    Li, H. et al. Применение технологии редактирования генома в таргетной терапии заболеваний человека: механизмы, достижения и перспективы. преобразователь сигнала. Target Ther. 5 , 1 (2020).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 5.

    Сеттен, Р. Л., Росси, Дж. Дж. И Хан, С. П. Текущее состояние и будущие направления терапии на основе РНКи. Nat. Rev. Drug Discov. 18 , 421–446 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 6.

    Кэролайн Наполи, К.L. & Richard, J. Введение гена химерной халконсинтазы в петунию приводит к обратимой совместной супрессии гомологичных генов в транс. Растительная клетка 2 , 279–289 (1990).

    Google ученый

  • 7.

    Эльбашир С.М. и др. Дуплексы 21 ± нуклеотидной РНК опосредуют РНК-интерференцию в культивируемых клетках млекопитающих. Nature 411 , 494–498 (2001).

    CAS PubMed Google ученый

  • 8.

    Huang, Y. Y. Утверждение первого в мире терапевтического средства с РНКи и история его технологического развития. Прог. Biochem. Биофиз. 46 , 313–322 (2019).

    Google ученый

  • 9.

    Sardh, E. et al. Фаза 1 испытания терапии интермиттирующей РНК при острой перемежающейся порфирии. N. Engl. J. Med. 380 , 549–558 (2019).

    PubMed Google ученый

  • 10.

    Bissell, D. M. et al. ENVISION, фаза 3 исследования безопасности и эффективности гивосирана, исследуемого терапевтического РНКи-терапевтического средства у пациентов с острой печеночной порфирией. Гепатология 70 , 100A – 101A (2019).

    Google ученый

  • 11.

    де Паула Брандао, П. Р., Титц-де-Алмейда, С. С. и Титц-де-Алмейда, Р. Лидинг Р. Н. Терапия интерференцией, часть 2: подавление синтазы дельта-аминолевулиновой кислоты 1, с акцентом на гивосиран. Мол. Диаг. Ther. 24 , 61–68 (2019).

  • 12.

    Agarwal, S. et al. Фармакокинетика и фармакодинамика малой интерферирующей рибонуклеиновой кислоты (миРНК), гивосирана, у пациентов с острой печеночной порфирией. Clin. Pharmacol. Ther. https://doi.org/10.1002/cpt.1802, (2020).

  • 13.

    Cho, W. G. et al. Активация TLR3, индуцированная малой мешающей РНК, подавляет рост кровеносных и лимфатических сосудов. PNAS 106 , 7137–7142 (2009).

    CAS PubMed Google ученый

  • 14.

    Hu, B. et al. Клинические достижения терапии миРНК. J. Gene Med. 21 , e3097 (2019).

    PubMed Google ученый

  • 15.

    Guo, D. X. et al. Фотостабильные и биосовместимые флуоресцентные кремниевые наночастицы для совместной доставки миРНК и доксорубицина к лекарственным препаратам под контролем визуализации. Cancer Cells Nano-Micro Lett. 11 , 13 (2019).

    CAS Google ученый

  • 16.

    Zheng, Z. et al. Экзосома, отображающая фолат, опосредованная цитозольной доставкой миРНК, избегая захвата эндосом. J. Control. Выпуск 311-312 , 43–49 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 17.

    Zheng, M. et al. АФК-чувствительная полимерная миРНК-наномедицина, стабилизированная тройным взаимодействием, для надежной терапии комбинационной РНКи глиобластомы. Adv. Матер. 31 , e17 (2019).

    PubMed Google ученый

  • 18.

    Kim, M., Kim, G., Hwang, D. W. & Lee, M. Доставка высокоподвижной групповой siRNA box-1 с использованием экзосом, нацеленных на мозг, для терапии ишемического инсульта. J. Biomed. Nanotechnol. 15 , 2401–2412 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 19.

    Liu, J. et al. Эффективное подавление гена, опосредованное полипептидными наночастицами LAh5-L1-siMDR1, при раке молочной железы человека с множественной лекарственной устойчивостью. J. Biomed. Nanotechnol. 15 , 531–543 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 20.

    Wang, Y., Li, C., Du, L. & Liu, Y. Дендример, реагирующий на активные формы кислорода, с низкой цитотоксичностью для эффективной и целевой доставки генов. Подбородок. Chem.Lett. 31 , 275–280 (2020).

    CAS Google ученый

  • 21.

    Chen, Y. et al. Супрамолекулярная стратегия совместной доставки для комбинированного лечения рака груди и предотвращения метастазов. Подбородок. Chem. Lett. 31 , 1153–1158 (2020).

    CAS Google ученый

  • 22.

    Ma, J. et al. Приготовление экранирующих мицелл поли (глутаминовой кислоты), самоорганизующихся из полилизин-b-полифенилаланина для совместной доставки генов и лекарств. Chinese Chem. Lett . https://doi.org/10.1016/j.cclet.2020.02.034 (2020).

  • 23.

    Kleinman, M. E. et al. Независимое от последовательности и мишени подавление ангиогенеза с помощью siRNA через TLR3. Nature 452 , 591–597 (2008).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 24.

    Баракат, М. Р. и Кайзер, П. К. Ингибиторы VEGF для лечения неоваскулярной возрастной дегенерации желтого пятна. Мнение эксперта. Расследование. Наркотики 18 , 637–646 (2009).

    CAS PubMed Google ученый

  • 25.

    Reich, S.J. et al. Малая интерферирующая РНК (siRNA), нацеленная на VEGF, эффективно подавляет неоваскуляризацию глаза в модели на мышах. Мол. Vis. 9 , 210–216 (2003).

    CAS PubMed Google ученый

  • 26.

    Шен, Дж.и другие. Подавление неоваскуляризации глаза с помощью миРНК, нацеленной на рецептор VEGF 1. Gene Ther. 13 , 225–234 (2006).

    CAS PubMed Google ученый

  • 27.

    Sioud, M., Furset, G. & Cekaite, L. Подавление иммуностимулирующей siRNA-управляемой активации врожденного иммунитета с помощью 2’-модифицированных РНК. Biochem Biophys. Res. Commun. 361 , 122–126 (2007).

    CAS PubMed Google ученый

  • 28.

    Song, X. et al. Сайт-специфическая модификация с использованием 2’-метоксиэтильной группы улучшает специфичность и активность миРНК. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 9 , 242–250 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 29.

    Флюитер К., Мук О. Р. и Баас Ф. Терапевтический потенциал LNA-модифицированных миРНК: снижение нецелевых эффектов путем химической модификации последовательности миРНК. Methods Mol. Биол. 487 , 189–203 (2009).

    CAS PubMed Google ученый

  • 30.

    Bramsen, J. B. et al. Скрининг химических модификаций выявляет позиционно-специфические модификации UNA для наиболее эффективного снижения нецелевых эффектов siRNA. Nucleic Acids Res. 38 , 5761–5773 (2010).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 31.

    Janas, M. M. et al. Отбор GalNAc-конъюгированных миРНК с ограниченной гепатотоксичностью для крыс, не являющейся мишенью. Nat. Commun. 9 , 723 (2018).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 32.

    Хворова А. и Уоттс Дж. К. Химическая эволюция олигонуклеотидной терапии, имеющей клиническое применение. Nat. Biotechnol. 35 , 238–248 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 33.

    Ju¨rgen Soutschek, A.A. et al. Терапевтическое подавление эндогенного гена путем системного введения модифицированных миРНК. природа 432 , 173–178 (2004).

    Google ученый

  • 34.

    Coelho, T. et al. Безопасность и эффективность РНКи-терапии транстиретин-амилоидоза. N. Engl. J. Med. 369 , 819–829 (2013).

    CAS PubMed Google ученый

  • 35.

    Adams, D. et al. Патисиран, РНКи-терапевтический препарат для лечения наследственного транстиретинового амилоидоза. N. Engl. J. Med. 379 , 11–21 (2018).

    CAS PubMed Google ученый

  • 36.

    Титц-де-Алмейда, Р., Дэвид, К. и Титц-де-Алмейда, С.С. Гонка 10 синтетических препаратов на основе РНКи на фармацевтический рынок. Pharm. Res. 34 , 1339–1363 (2017).

    CAS PubMed Google ученый

  • 37.

    Хворова А.А. Олигонуклеотидная терапия — новый класс холестеринснижающих препаратов. N. Engl. J. Med . 376 , 4–7 (2017).

    CAS PubMed Google ученый

  • 38.

    Fitzgerald, K. et al. Очень стойкий терапевтический ингибитор РНКи PCSK9. N. Engl. J. Med. 376 , 41–51 (2017).

    CAS PubMed Google ученый

  • 39.

    Bennett, C.F. Терапевтические антисмысловые олигонуклеотиды достигают совершеннолетия. Annu Rev. Med. 70 , 307–321 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 40.

    Розема, Д. Б. в Annual Reports in Medical Chemistry, Vol 50: Platform Technologies in Drug Discovery and Validation Vol. 50 Annual Reports in Medicinal Chemistry (ed. Goodnow, R.A.) 17–59 (Elsevier Academic Press Inc, 2017).

  • 41.

    Yu, R.Z. et al. Межвидовое фармакокинетическое сравнение антисмыслового олигонуклеотида второго поколения ISIS 301012, нацеленного на человеческий аполипопротеин B-100, от мыши к человеку. Drug Metab. Dispos. 35 , 460–468 (2007).

    CAS PubMed Google ученый

  • 42.

    Geselowitz, D. A. & Neckers, L. M. Бычий сывороточный альбумин является основным олигонуклеотидсвязывающим белком, обнаруживаемым на поверхности культивируемых клеток. Antisense Res. Dev. 5 , 213–217 (1995).

    CAS PubMed Google ученый

  • 43.

    Liang, X. H., Sun, H., Shen, W. & Crooke, S. T. Идентификация и характеристика внутриклеточных белков, которые связывают олигонуклеотиды с фосфоротиоатными связями. Nucleic Acids Res. 43 , 2927–2945 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 44.

    Crooke, S.T. et al. Клеточный захват и транспорт антисмысловых олигонуклеотидов. Nat. Biotechnol. 35 , 230–237 (2017).

    CAS PubMed Google ученый

  • 45.

    Shen, W. et al. Химическая модификация терапевтических средств PS-ASO снижает связывание клеточных белков и улучшает терапевтический индекс. Nat. Biotechnol. 37 , 640–650 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 46.

    Migawa, M. T. et al. Сайт-специфическая замена фосфоротиоата на алкилфосфонатные связи усиливает терапевтический профиль гэпмерных ASO, модулируя взаимодействия с клеточными белками. Nucleic Acids Res. 47 , 5465–5479 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 47.

    Uyechi, L. S., Gagné, L., Thurston, G. & Szoka, F. C. Jr. Механизм доставки гена липоплекса в легкие мыши: связывание и интернализация флуоресцентных липидов и компонентов ДНК. Gene Ther. 8 , 828–836 (2001).

    CAS PubMed Google ученый

  • 48.

    Huang, Y. et al. Пути элиминации системно доставляемой миРНК. Мол. Ther. 19 , 381–385 (2011).

    CAS PubMed Google ученый

  • 49.

    Huang, Y. et al. Фармакокинетическое поведение siRNA, вводимой внутривенно, в железистых тканях. Тераностика 6 , 1528–1541 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 50.

    Huang, Y. & Liang, Z. Фармакокинетические профили голых и наночастиц миРНК в железистых тканях. Nanomed. Nanotechnol. Биол. Med. 14 , 1773 (2018).

    Google ученый

  • 51.

    Iwamoto, N. et al.Контроль стереохимии фосфоротиоатов существенно увеличивает эффективность антисмысловых олигонуклеотидов. Nat. Biotechnol. 35 , 845–851 (2017).

    CAS PubMed Google ученый

  • 52.

    Ostergaard, M. E. et al. Понимание влияния контроля фосфоротиоатной хиральности в разрыве ДНК на эффективность и безопасность гэпмерных антисмысловых олигонуклеотидов. Nucleic Acids Res. 48 , 1691–1700 (2020).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 53.

    Альнилам. Хирально-обогащенные двухцепочечные РНК-агенты. Мировой интеллект. Prop. Орган. WO20151 , 1–293 (2019).

    Google ученый

  • 54.

    Marshall, W. S. & Caruthers, M. H. ДНК фосфородитиоата в качестве потенциального терапевтического препарата. Наука 259 , 1564–1570 (1993).

    CAS PubMed Google ученый

  • 55.

    Нильсен П. Э., Эгхолм М., Берг Р. Х. и Бухардт О. Селективное распознавание последовательности ДНК путем замещения цепи тимин-замещенным полиамидом. Наука 254 , 1497–1500 (1991).

    CAS PubMed Google ученый

  • 56.

    Ndeboko, B. et al. Роль проникающих в клетку пептидов во внутриклеточной доставке пептидных нуклеиновых кислот, направленных на репликацию гепаднавирусов. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 9 , 162–169 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 57.

    Zeng, Z. et al. Tat-конъюгированная пептидная нуклеиновая кислота Tat-PNA-DR ингибирует репликацию вируса гепатита B in vitro и in vivo, воздействуя на прямые повторы LTR РНК HBV. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 5 , e295 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 58.

    Meade, B.R. et al. Эффективная доставка пролекарств РНКи, содержащих обратимые нейтрализующие заряд модификации фосфотриэфирного остова. Nat. Biotechnol. 32 , 1256–1261 (2014).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 59.

    Сингх Р. П., О, Б. К. и Чой, Дж. У. Применение пептидной нуклеиновой кислоты для разработки массивов нанобиосенсоров. Биоэлектрохимия 79 , 153–161 (2010).

    CAS PubMed Google ученый

  • 60.

    Weitzer, S. & Martinez, J. РНК-киназа человека hClp1 активна на 3 ’экзонах транспортной РНК и коротких интерферирующих РНК. Nature 447 , 222–226 (2007).

    CAS PubMed Google ученый

  • 61.

    Prakash, T. P. et al. Идентификация метаболически стабильных 5’-фосфатных аналогов, которые поддерживают активность одноцепочечной миРНК. Nucleic Acids Res. 43 , 2993–3011 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 62.

    Lima, W. F. et al. Одноцепочечные миРНК активируют РНКи у животных. Cell 150 , 883–894 (2012).

    CAS PubMed Google ученый

  • 63.

    Haraszti, R.A. et al. 5-Винилфосфонат улучшает накопление в тканях и эффективность конъюгированных миРНК in vivo. Nucleic Acids Res. 45 , 7581–7592 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 64.

    Parmar, R. et al. 5 ’- (E) -винилфосфонат: стабильный имитатор фосфата может улучшать РНКи-активность конъюгатов siRNA-GalNAc. Chembiochem. 17 , 985–989 (2016).

    CAS PubMed Google ученый

  • 65.

    Elkayam, E. et al. siRNA, несущая (E) -винилфосфонатный фрагмент на 5 конце направляющей цепи, увеличивает молчание гена за счет усиленного связывания с Argonaute-2 человека. Nucleic Acids Res. 45 , 3528–3536 (2017).

    CAS PubMed Google ученый

  • 66.

    Шен X. и Кори Д. Р. Химия, механизм и клинический статус антисмысловых олигонуклеотидов и дуплексных РНК. Nucleic Acids Res. 46 , 1584–1600 (2018).

    CAS PubMed Google ученый

  • 67.

    Monia, B.P. et al. Оценка 2’-модифицированных олигонуклеотидов, содержащих 2’-дезоксигапсы, в качестве антисмысловых ингибиторов экспрессии генов. J. Biol. Chem. 268 , 14514–14522 (1993).

    CAS PubMed Google ученый

  • 68.

    Хидео Иноуэ, Ю. Х., Хнура, А., Иваи, С., Миура, К. и Оцука, Э.Исследования синтеза и гибридизации двух комплементарных нона (2’-O-метил) рибонуклеотидов. Nucleic Acids Res. 15 , 6131–6148 (1987).

    Google ученый

  • 69.

    Fucini, R.V. et al. Модификация аденозина может быть предпочтительной для снижения иммунной стимуляции siRNA. Nucleic Acid Ther. 22 , 205–210 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 70.

    Ostergaard, M. E. et al. Модификации фторированных нуклеотидов модулируют аллельную селективность антисмысловых олигонуклеотидов, нацеленных на SNP. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 7 , 20–30 (2017).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 71.

    Dowler, T. et al. Улучшение свойств миРНК, опосредованное 2’-дезокси-2’-фтор-бета-d-арабинонуклеиновой кислотой (FANA). Nucleic Acids Res. 34 , 1669–1675 (2006).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 72.

    Kenski, D. M. et al. Оптимизированные миРНК модификации для повышения активности in vivo. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 1 , e5 (2012).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 73.

    Christensen, U., Jacobsen, N., Rajwanshi, VK, Wengel, J. & Koch, T. Кинетика остановленного потока образования дуплекса заблокированной нуклеиновой кислоты (LNA) и олигонуклеотида: исследования LNA-ДНК и взаимодействия ДНК-ДНК. Biochem. J. 354 , 481–484 (2001).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 74.

    Koji Morita, C.H. et al. 2’-O, 4’-C-этиленовые мостиковые нуклеиновые кислоты (ENA) с устойчивостью к нуклеазам и высоким сродством к РНК. Nucleic Acids Res. Дополнение 1 , 241–242 (2001).

    Google ученый

  • 75.

    Сет, П. П.и другие. Синтез и биофизическая оценка 2′, 4′-ограниченных 2’O-метоксиэтильных и 2 ‘, 4’-ограниченных аналогов 2’O-этил нуклеиновой кислоты. J. Org. Chem. 75 , 1569–1581 (2010).

    CAS PubMed Google ученый

  • 76.

    Leumann, R. S. A. C. J. Синтез, термодинамические и биофизические свойства трицикло-ДНК. 121 , 3249–3255 (1999).

  • 77.

    WELLER, J. Sa. D. Антисмысловые олигомеры морфолино: дизайн, получение и свойства. Antisense Nucleic Acid Drug Dev. 7 , 187–195 (1997).

    PubMed Google ученый

  • 78.

    Крук, С. Т., Витцтум, Дж. Л., Беннет, К. Ф. и Бейкер, Б. Ф. Терапевтические средства, нацеленные на РНК. Cell Metab. 27 , 714–739 (2018).

    CAS PubMed Google ученый

  • 79.

    Kariko, K. et al. Включение псевдоуридина в мРНК дает превосходный неиммуногенный вектор с повышенной трансляционной способностью и биологической стабильностью. Мол. Ther. 16 , 1833–1840 (2008).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 80.

    Anderson, B.R. et al. Модификации нуклеозидов в РНК ограничивают активацию 2’-5’-олигоаденилатсинтетазы и повышают устойчивость к расщеплению РНКазой L. Nucleic Acids Res. 39 , 9329–9338 (2011).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 81.

    Kormann, M. S. et al. Экспрессия терапевтических белков после доставки химически модифицированной мРНК у мышей. Nat. Biotechnol. 29 , 154–157 (2011).

    CAS PubMed Google ученый

  • 82.

    Валенсуэла, Р. А. и др. Стратегии модификации оснований для модуляции иммунной стимуляции с помощью миРНК. Chembiochem. 16 , 262–267 (2015).

    CAS PubMed Google ученый

  • 83.

    Phelps, K. J. et al. Щелкните модификацию РНК по аденозину: структура и реакционная способность 7-этинил- и 7-триазолил-8-аза-7-деазааденозина в РНК. ACS Chem. Биол. 9 , 1780–1787 (2014).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 84.

    Ibarra-Soza, J. M. et al. 7-Замещенные 8-аза-7-деазааденозины для модификации большой бороздки миРНК. Org. Biomol. Chem. 10 , 6491–6497 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 85.

    Peacock, H., Fostvedt, E. & Beal, P.A. Замещения аденозина, модулирующие малую бороздку, контролируют связывание белков и активность РНКи в siRNA. ACS Chem. Биол. 5 , 1115–1124 (2010).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 86.

    Wahba, A. S. et al.Фенилпирролоцитозин как ненавязчивая модификация основания для мониторинга активности и клеточного транспорта миРНК. ACS Chem. Биол. 6 , 912–919 (2011).

    CAS PubMed Google ученый

  • 87.

    Xia, J. et al. Активность siRNA по подавлению гена с рибо-дифтортолуилнуклеотидом. ACS Chem. Биол. 1 , 176–183 (2006).

    CAS PubMed Google ученый

  • 88.

    Zhang, J. et al. Модификация пассажирской цепи миРНК 5-нитроиндолом резко снижает его нецелевые эффекты. Chembiochem. 13 , 1940–1945 (2012).

    CAS PubMed Google ученый

  • 89.

    Wu, S. Y. et al. Разработка модифицированных молекул миРНК, включающих остатки 5-фтор-2’-дезоксиуридина для усиления цитотоксичности. Nucleic Acids Res. 41 , 4650–4659 (2013).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 90.

    Пикок, Х., Каннан, А., Бил, П. А. и Берроуз, К. Дж. Химическая модификация оснований миРНК для зондирования и усиления РНК-интерференции. J. Org. Chem. 76 , 7295–7300 (2011).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 91.

    Уоттс, Дж. К., Деливи, Г. Ф.И Дамха, М. Дж. Химически модифицированная миРНК: инструменты и приложения. Drug Discov. Сегодня 13 , 842–855 (2008).

    CAS PubMed Google ученый

  • 92.

    Dar, S. A., Thakur, A., Qureshi, A. & Kumar, M. siRNAmod: база данных экспериментально подтвержденных химически модифицированных siRNA. Sci. Отчет 6 , 20031 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 93.

    Gillmore, J. D. et al. Фаза 2, открытое расширенное (OLE) исследование ревузирана, экспериментального РНКи-терапевтического средства для лечения пациентов с транстиретиновым сердечным амилоидозом. Orphanet. J. Rare Dis. 10 , О21 (2015).

    PubMed Central Google ученый

  • 94.

    Sehgal, A. et al. Терапевтическая РНКи, нацеленная на антитромбин, чтобы восстановить баланс системы свертывания и способствовать гемостазу при гемофилии. Nat. Med. 21 , 492–497 (2015).

    CAS PubMed Google ученый

  • 95.

    Janas, M. M. et al. Влияние структуры, химии и способа доставки олигонуклеотидов на цитотоксичность in vitro. Nucleic Acid Ther. 27 , 11–22 (2016).

  • 96.

    Foster, D. J. et al. Усовершенствованные конструкции миРНК дополнительно улучшают характеристики конъюгатов GalNAc-миРНК in vivo. Мол.Ther. 26 , 708–717 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 97.

    Nair, J. K. et al. Влияние повышенной метаболической стабильности на фармакокинетику и фармакодинамику конъюгатов GalNAc-siRNA. Nucleic Acids Res. 45 , 10969–10977 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 98.

    Janas, M. M. et al. Оценка безопасности 2’-дезокси-2’-фторнуклеотидов в конъюгатах GalNAc-siRNA. Nucleic Acids Res. 47 , 3306–3320 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 99.

    Альнилам. FDA одобрило первое лечение наследственного редкого заболевания https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2019/0212194s000lbl.pdf 1–11 (Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США, 2019 г.).

  • 100.

    Zheng, J. et al. Одиночная модификация в положении 14 цепи siRNA отменяет ее активность по замалчиванию генов, уменьшая как нагрузку RISC, так и деградацию мишени. FASEB J. 27 , 4017–4026 (2013).

    CAS PubMed Google ученый

  • 101.

    Turner, A. M. et al. Нацеленная на печень РНК-интерференция обеспечивает надежное и стойкое снижение уровня альфа-1-антитрипсина у пациентов с ZZ. J. Hepatol. 69 , 378–384 (2018).

    CAS PubMed Google ученый

  • 102.

    Dicerna. Способы и композиции для специфического ингибирования транстиретина (TTR) двухцепочечной РНК. Патент США. Товарный знак Off. US201859 , 1-240 (2019).

    Google ученый

  • 103.

    США. Молчащая нуклеиновая кислота связана с трехвалентным гликоконъюгатом. Патент США, товарный знак Off. 1–52 (2019).

  • 104.

    Виттруп А. и Либерман Дж. Нокаутирующая болезнь: отчет о прогрессе в области терапии миРНК. Nat. Преподобный Жене. 16 , 543–552 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 105.

    Уайтхед, К. А., Лангер, Р. и Андерсон, Д. Г. Устранение барьеров: достижения в доставке миРНК. Nat. Rev. Drug Discov. 8 , 129–138 (2009).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 106.

    Канасти, Р., Доркин, Дж. Р., Вегас, А. и Андерсон, Д. Материалы для доставки siRNA терапевтических препаратов. Nat. Матер. 12 , 967–977 (2013).

    CAS PubMed Google ученый

  • 107.

    Jayaraman, M. et al. Повышение эффективности липидных наночастиц siRNA для подавления генов печени in vivo. Angew. Chem. Int. Эд. Англ. 51 , 8529–8533 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 108.

    Wolfrum, C. et al. Механизмы и оптимизация доставки липофильных миРНК in vivo. Nat. Biotechnol. 25 , 1149–1157 (2007).

    CAS PubMed Google ученый

  • 109.

    Akinc, A. et al.Направленная доставка терапевтических средств РНКи с механизмами на основе эндогенных и экзогенных лигандов. Мол. Ther. 18 , 1357–1364 (2010).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 110.

    Цукерман, Дж. Э. и Дэвис, М. Е. Клинический опыт системно вводимых терапевтических средств на основе миРНК при раке. Nat. Rev. Drug Discov. 14 , 843–856 (2015).

    CAS PubMed Google ученый

  • 111.

    Wartiovaara, J. et al. Нити нефрина вносят вклад в пористый каркас щелевой диафрагмы, как показывает электронная томография. J. Clin. Инвестировать. 114 , 1475–1483 (2004).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 112.

    Rozema, D. B. et al. Динамические поликонъюгаты для направленной доставки миРНК в гепатоциты in vivo. Proc. Natl Acad. Sci. США 104 , 12982–12987 (2007).

    CAS PubMed Google ученый

  • 113.

    Станцл, Э. Г., Трантов, Б. М., Варгас, Дж. Р. и Вендер, П. А. Пятнадцать лет проникающих в клетки, богатых гуанидином молекулярных переносчиков: фундаментальная наука, инструменты исследования и клиническое применение. В соотв. Chem. Res. 46 , 2944–2954 (2013).

    CAS PubMed Google ученый

  • 114.

    Чжоу, Дж.и другие. pH-чувствительные наномицеллы для высокоэффективной доставки миРНК in vitro и in vivo: понимание конструкции поликатионов с надежным цитозольным высвобождением. Nano Lett. 16 , 6916–6923 (2016).

    CAS PubMed Google ученый

  • 115.

    Du, L. et al. Управляемый pH триблочный наноноситель обеспечивает высокоэффективную доставку миРНК для лечения рака. Тераностика 7 , 3432–3445 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 116.

    Хафез И. М., Маурер Н. и Каллис П. Р. О механизме, посредством которого катионные липиды способствуют внутриклеточной доставке полинуклеиновых кислот. Gene Ther. 8 , 1188–1196 (2001).

    CAS PubMed Google ученый

  • 117.

    Торчилин В. П. Современные подходы к внутриклеточной доставке лекарств и нацеливанию на ДНК и органеллы. Annu. Преподобный Биомед. Англ. 8 , 343–375 (2006).

    CAS PubMed Google ученый

  • 118.

    Semple, S.C. et al. Рациональный дизайн катионных липидов для доставки миРНК. Nat. Biotechnol. 28 , 172–176 (2010).

    CAS PubMed Google ученый

  • 119.

    Zelphati, O. & Szoka, F. C. Jr. Механизм высвобождения олигонуклеотидов из катионных липосом. Proc. Natl Acad. Sci. США 93 , 11493–11498 (1996).

    CAS PubMed Google ученый

  • 120.

    Li, J. et al. Биоразлагаемые наночастицы фосфата кальция с липидным покрытием для системной доставки миРНК. J. Control. Выпуск 142 , 416–421 (2010).

    CAS PubMed Google ученый

  • 121.

    Доминская, М.& Dykxhoorn, D. M. Разрушение барьеров: доставка siRNA и выход из эндосом. J. Cell Sci. 123 , 1183–1189 (2010).

    CAS PubMed Google ученый

  • 122.

    Wittrup, A. et al. Визуализация липидного высвобождения siRNA из эндосом и нокдауна целевого гена. Nat. Biotechnol. 33 , 870–876 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 123.

    Sahay, G. et al. Эффективность доставки siRNA липидными наночастицами ограничивается рециклингом эндоцитов. Nat. Biotechnol. 31 , 653–658 (2013).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 124.

    Qiu, C. et al. Регулирование внутриклеточной судьбы миРНК с помощью декорированных мембранами гибридных наноплексов эндоплазматического ретикулума. Nat. Commun. 10 , 2702 (2019).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 125.

    Huang, D. et al. Непрерывный безвекторный перенос генов с помощью нового микрожидкостного чипа и массива наноигл. Curr. Препарат Делив. 16 , 164–170 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 126.

    Huang, H. et al. Эффективный и высокопроизводительный микрочип электропорации, применимый для доставки миРНК. Лабораторный чип. 11 , 163–172 (2011).

    CAS PubMed Google ученый

  • 127.

    Huang, D., Huang, Y. & Li, Z. Трансдермальная доставка нуклеиновой кислоты, опосредованная перфорацией и электропорацией. Methods Mol. Биол. 2050 , 101–112 (2020).

    CAS PubMed Google ученый

  • 128.

    Huang, D. et al. Эффективная доставка молекул нуклеиновой кислоты в кожу за счет комбинированного использования ролика с микроиглами и гибкой встречно-гребенчатой ​​системы электропорации. Тераностика 8 , 2361–2376 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 129.

    Wei, Z. et al. Гибкий пластырь для электропорации (ep-Patch) для эффективной доставки молекул нуклеиновой кислоты в ткани животных с неправильной формой поверхности. Sci. Отчет 5 , 7618–7618 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 130.

    Чжао, Д.и другие. Устройство для проточной электропорации клеток для быстрой и эффективной трансфекции большого количества клеток in vitro и ex vivo. Sci. Отчет 6 , 18469–18469 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 131.

    Wei, Z. et al. Система электропорации с ламинарным потоком для эффективной доставки ДНК и миРНК. Анал. Chem. 83 , 5881–5887 (2011).

    CAS PubMed Google ученый

  • 132.

    Demirjian, S. et al. Исследование безопасности и переносимости внутривенно вводимой малой интерферирующей рибонуклеиновой кислоты (миРНК) после кардиоторакальной операции с помпой у пациентов с риском острого повреждения почек. Kidney Int. Отчет 2 , 836–843 (2017).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 133.

    Thompson, J. D. et al. Токсикологические и фармакокинетические свойства химически модифицированных миРНК, нацеленных на РНК р53, после внутривенного введения. Nucleic Acid Ther. 22 , 255–264 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 134.

    Solano, E.C. et al. Токсикологические и фармакокинетические свойства QPI-1007, химически модифицированной синтетической миРНК, нацеленной на мРНК каспазы 2, после интравитреальной инъекции. Nucleic Acid Ther. 24 , 258–266 (2014).

    CAS PubMed Google ученый

  • 135.

    Molitoris, B.A. et al. siRNA, направленная на p53, ослабляет ишемическое и индуцированное цисплатином острое повреждение почек. J. Am. Soc. Нефрол. 20 , 1754–1764 (2009).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 136.

    Ahmed, Z. et al. Глазная нейрозащита с помощью миРНК, нацеленной на каспазу-2. Cell Death Dis. 2 , e173 (2011).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 137.

    Alvarez, R. et al. Опосредованное РНК-интерференцией подавление нуклеокапсида респираторно-синцитиального вируса определяет эффективную противовирусную стратегию. Антимикробный. Агенты Chemother. 53 , 3952–3962 (2009).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 138.

    DeVincenzo, J. et al. Оценка безопасности, переносимости и фармакокинетики ALN-RSV01, нового противовирусного препарата РНКи, направленного против респираторно-синцитиального вируса (RSV). Антивирь. Res. 77 , 225–231 (2008).

    CAS PubMed Google ученый

  • 139.

    Zamora, M. R. et al. РНК-интерференционная терапия у пациентов с трансплантатом легких, инфицированных респираторно-синцитиальным вирусом. Am. J. Respir. Крит. Care Med. 183 , 531–538 (2011).

    CAS PubMed Google ученый

  • 140.

    Де Винченцо, Дж.и другие. Рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование терапии на основе РНКи, направленной против респираторно-синцитиального вируса. Proc. Natl Acad. Sci. США 107 , 8800–8805 (2010).

    CAS PubMed Google ученый

  • 141.

    Gottlieb, J. et al. ALN-RSV01 для профилактики синдрома облитерирующего бронхиолита после респираторно-синцитиальной вирусной инфекции у реципиентов трансплантата легких. J. Heart Lung Transpl. 35 , 213–221 (2016).

    Google ученый

  • 142.

    Zheng, S. et al. Нокдаун siRNA RRM2 эффективно подавлял рост опухоли поджелудочной железы отдельно или синергетически с доксорубицином. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 12 , 805–816 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 143.

    Kim, B., Park, J.-H.& Сейлор, М. Дж. Rekindling РНКи-терапия: требования к дизайну материалов для доставки миРНК in vivo. Adv. Матер. 31 , e1

    • 7 – e17 (2019).

    PubMed Google ученый

  • 144.

    Weng, Y. et al. Улучшенная терапия нуклеиновыми кислотами с использованием передовых наноразмерных биотехнологий. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 19 , 581–601 (2019).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 145.

    Ван, К., Аллен, Т. М. и Каллис, П. Р. Системы доставки липидных наночастиц для терапевтических средств на основе миРНК. Drug Deliv. Пер. Res. 4 , 74–83 (2014).

    CAS PubMed Google ученый

  • 146.

    Sato, Y. et al. PH-чувствительный катионный липид облегчает доставку липосомальной siRNA и активность гена в замалчивании in vitro и in vivo. J. Control. Выпуск 163 , 267–276 (2012).

    CAS PubMed Google ученый

  • 147.

    Боттега Р. Э. и Р. М. Ингибирование протеинкиназы С катионными амфифилами. Биохимия 31 , 9025–9030 (1992).

    CAS PubMed Google ученый

  • 148.

    Morrissey, D. V. et al. Сильная и стойкая in vivo активность химически модифицированных миРНК против HBV. Nat. Biotechnol. 23 , 1002–1007 (2005).

    CAS PubMed Google ученый

  • 149.

    Maier, M. A. et al. Биоразлагаемые липиды, позволяющие быстро удалять липидные наночастицы для системной доставки терапевтических средств с РНКи. Мол. Ther. 21 , 1570–1578 (2013).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 150.

    Эль Дика, И.и другие. Открытое многоцентровое исследование фазы I с увеличением дозы с расширенной когортой фазы II для определения безопасности, фармакокинетики и предварительной противоопухолевой активности внутривенного TKM-080301 у субъектов с запущенной гепатоцеллюлярной карциномой. Онколог 24 , 747 – e218 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 151.

    Tabernero, J. et al. Первое испытание на людях терапевтического средства РНК-интерференции, направленного на VEGF и KSP, у онкологических больных с поражением печени. Рак Discov. 3 , 406–417 (2013).

    CAS PubMed Google ученый

  • 152.

    Fitzgerald, K. et al. Влияние препарата для РНК-интерференции на синтез пропротеинконвертазы субтилизин / кексин типа 9 (PCSK9) и концентрацию холестерина ЛПНП в сыворотке у здоровых добровольцев: рандомизированное, простое слепое, плацебо-контролируемое исследование фазы 1. Ланцет 383 , 60–68 (2014).

    CAS PubMed Google ученый

  • 153.

    Dong, Y. et al. Липопептидные наночастицы для эффективной и селективной доставки миРНК у грызунов и нечеловеческих приматов. Proc. Natl Acad. Sci. США 111 , 3955–3960 (2014).

    CAS PubMed Google ученый

  • 154.

    Akinc, A. et al. Комбинаторная библиотека липидоподобных материалов для доставки терапевтических средств с РНКи. Nat. Biotechnol. 26 , 561–569 (2008).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 155.

    Love, K. T. et al. Липидоподобные материалы для подавления генов in vivo в низких дозах. Proc. Natl Acad. Sci. США 107 , 1864–1869 (2010).

    CAS PubMed Google ученый

  • 156.

    Ganesh, S. et al. Прямое фармакологическое ингибирование бета-катенина посредством РНК-интерференции в опухолях различного происхождения. Мол. Рак Тер. 15 , 2143–2154 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 157.

    Aleku, M. et al. Atu027, липосомальный препарат малой интерферирующей РНК, нацеленный на протеинкиназу N3, ингибирует прогрессирование рака. Cancer Res. 68 , 9788–9798 (2008).

    CAS PubMed Google ученый

  • 158.

    Mihaila, R. et al. Очистка липидных наночастиц с помощью центрифугирования-диализа (SCD): простой и высокопроизводительный подход для мелкомасштабного приготовления комплексов миРНК-липид. Внутр.J. Pharm. 420 , 118–121 (2011).

    CAS PubMed Google ученый

  • 159.

    Sato, Y. et al. Разрешение цирроза печени с использованием липосом, связанных с витамином А, для доставки миРНК против коллаген-специфического шаперона. Nat. Biotechnol. 26 , 431–442 (2008).

    CAS PubMed Google ученый

  • 160.

    Eguchi, A. et al.Печень Подавление ставки для лечения фиброза, связанного с неалкогольным стеатогепатитом. J. Hepatol. 64 , 699–707 (2016).

    CAS PubMed Google ученый

  • 161.

    Маэда, Х., Ву, Дж., Сава, Т., Мацумура, Ю. и Хори, К. Проницаемость сосудов опухоли и эффект ЭПР в макромолекулярной терапии: обзор. J. Control. Выпуск 65 , 271–284 (2000).

    CAS PubMed Google ученый

  • 162.

    Лю Р., Ли, X., Сяо, В. и Лам, К. С. Пептиды, нацеленные на опухоль, из комбинаторных библиотек. Adv. Препарат Делив. Ред. 110-111 , 13–37 (2017).

    CAS PubMed Google ученый

  • 163.

    Ryschich, E. et al. Рецептор трансферрина является маркером злокачественного фенотипа рака поджелудочной железы человека и нейроэндокринной карциномы поджелудочной железы. Eur. J. Cancer 40 , 1418–1422 (2004).

    CAS PubMed Google ученый

  • 164.

    Прутки М. и др. Изменен метаболизм железа, рецептор трансферрина 1 и ферритин у пациентов с раком толстой кишки. Cancer Lett. 238 , 188–196 (2006).

    CAS PubMed Google ученый

  • 165.

    Кимура, Р. Х., Левин, А. М., Кокран, Ф. В. и Кокран, Дж. Р. Сконструировали пептиды цистиновых узлов, которые связывают интегрины αvβ3, αvβ5 и α5β1 с низким наномолярным сродством. Proteins Struct. Функц. Биоинформатика 77 , 359–369 (2009).

    CAS Google ученый

  • 166.

    Гилл, М. Р., Фальзон, Н., Ду, Й. и Валлис, К. А. Целевая радионуклидная терапия в комбинированных режимах. Ланцет Онкол. 18 , e414 – e423 (2017).

    CAS PubMed Google ученый

  • 167.

    Коэн, З. Р.и другие. Локализованные РНКи-терапевтические средства для химиорезистентной глиомы IV степени с использованием липидных наночастиц с привитым гиалуронаном. САУ Nano. 9 , 1581–1591 (2015).

    CAS PubMed Google ученый

  • 168.

    Mizrahy, S. et al. Профилирование наночастиц на основе липидов, покрытых гиалуроновой оболочкой, направленных на опухоль. Наноразмер 6 , 3742–3752 (2014).

    CAS PubMed Google ученый

  • 169.

    Eliaz, R.E. & Szoka, F.C. Jr. Инкапсулированный в липосомы доксорубицин, нацеленный на CD44: стратегия уничтожения опухолевых клеток, сверхэкспрессирующих CD44. Cancer Res. 15 , 2592–2601 (2001).

    Google ученый

  • 170.

    Parker, N. et al. Экспрессия рецептора фолиевой кислоты в карциномах и нормальных тканях определяется количественным анализом связывания радиолиганда. Анал. Biochem. 338 , 284–293 (2005).

    CAS Google ученый

  • 171.

    Mui, B. L. et al. Влияние скорости десорбции липидов полиэтиленгликоля на фармакокинетику и фармакодинамику липидных наночастиц siRNA. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 2 , e139 (2013).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 172.

    Whitehead, K. A. et al. Разлагаемые липидные наночастицы с предсказуемой активностью доставки миРНК in vivo. Nat. Commun. 5 , 4277 (2014).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 173.

    Yanagi, T. et al. Опосредованный липидными наночастицами перенос миРНК против PCTAIRE1 / PCTK1 / Cdk16 подавляет рост рака in vivo. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 5 , e327 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 174.

    Ganesh, S. et al. РНКи-опосредованное ингибирование бета-катенина способствует инфильтрации Т-клеток и противоопухолевой активности в сочетании с блокадой иммунных контрольных точек. Мол. Ther. 26 , 2567–2579 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 175.

    Schultheis, B. et al. Первое исследование фазы I липосомальной РНК-интерференции терапевтического препарата Atu027 на людях у пациентов с развитыми солидными опухолями. J. Clin. Онкол. 32 , 4141–4148 (2014).

    CAS PubMed Google ученый

  • 176.

    Fehring, V. et al. Доставка терапевтической миРНК в эндотелий легких с помощью нового препарата липоплекса DACC. Мол. Ther. 22 , 811–820 (2014).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 177.

    Михайла Р.и другие. Моделирование кинетики доставки нескольких миРНК, опосредованной липидными наночастицами, для оценки влияния на конкуренцию за Ago2. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 16 , 367–377 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 178.

    Mihaila, R. et al. Математическое моделирование: инструмент для оптимизации доставки миРНК, опосредованной липидными наночастицами. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 7 , 246–255 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 179.

    Zimmermann, T. S. et al. РНКи-опосредованное подавление гена у нечеловеческих приматов. Nature 441 , 111–114 (2006).

    CAS PubMed Google ученый

  • 180.

    Suhr, O. B. et al. Эффективность и безопасность патисирана при семейной амилоидотической полинейропатии: исследование фазы II с несколькими дозами. Orphanet. J. Rare Dis. 10 , 109 (2015).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 181.

    Ву, С. Ю., Лопес-Берестейн, Г., Калин, Г. А. и Суд, А. К. РНКи-терапия: наркотики, не поддающиеся воздействию. Sci. Пер. Med. 6 , 240ps247 (2014).

    Google ученый

  • 182.

    Лю, X. Ориентация на поло-подобные киназы: многообещающий терапевтический подход к лечению рака. Пер. Онкол. 8 , 185–195 (2015).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 183.

    Beg, M. S. et al. Фаза I исследования MRX34, липосомального миметика miR-34a, вводимого два раза в неделю пациентам с развитыми солидными опухолями. Инвест. Н. Лекарства 35 , 180–188 (2017).

    CAS Google ученый

  • 184.

    Струмберг, Д.и другие. Фаза I клинической разработки Atu027, препарата миРНК, нацеленного на PKN3, у пациентов с запущенными солидными опухолями. Int J. Clin. Pharm. Ther. 50 , 76–78 (2012).

    CAS Google ученый

  • 185.

    Streinu-Cercel, A. et al. Исследование фазы 2a, оценивающее активность нескольких доз ARB-1467 у HBeAg-позитивных и негативных субъектов с подавленным вирусом гепатита B. J. Hepatol. 66 , S688 – S689 (2017).

    Google ученый

  • 186.

    Thi, E. P. et al. ARB-1740, терапевтическое средство интерференции РНК при хронической инфекции гепатита B. Заражение ACS. Дис. 5 , 725–737 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 187.

    Ye, X. et al. Терапевтический агент вируса гепатита B ARB-1740 оказывает ингибирующее действие на вирус гепатита дельта в новой модели гуманизированных мышей с двойным инфицированием. Заражение ACS. Дис. 5 , 738–749 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 188.

    Lee, A.C.H. et al. Исследования функций и комбинаций лекарственных препаратов на моделях клеточных культур для AB-729, подкожно вводимого siRNA исследуемого агента для лечения хронического гепатита B. J. Hepatol. 70 , E471 – E471 (2019).

    Google ученый

  • 189.

    Wong, S.C. et al. Совместная инъекция целевого, обратимо маскированного эндосомолитического полимера резко повышает эффективность холестерин-конъюгированных малых интерферирующих РНК in vivo. Nucleic Acid Ther. 22 , 380–390 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 190.

    Wooddell, C. I. et al. Терапевтические препараты РНКи, нацеленные на гепатоциты, для лечения хронической вирусной инфекции гепатита В. Мол. Ther. 21 , 973–985 (2013).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 191.

    Sebestyen, M. G. et al. Направленная доставка in vivo миРНК и агента, высвобождающего эндосомы, в гепатоциты. Methods Mol. Биол. 1218 , 163–186 (2015).

    CAS PubMed Google ученый

  • 192.

    Розема, Д.B. et al. Средства доставки миРНК, запускаемые протеазой. J. Control. Выпуск 209 , 57–66 (2015).

    CAS PubMed Google ученый

  • 193.

    Jin, L. et al. Текущий прогресс в технологии доставки генов на основе химических методов и наноносителей. Тераностика 4 , 240–255 (2014).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 194.

    Wooddell, C. I. et al. Лечение хронически инфицированных пациентов и шимпанзе на основе РНКи показывает, что интегрированная ДНК вируса гепатита В является источником HBsAg. Sci. Пер. Med . 9 , eaan0241 (2017).

  • 195.

    Gish, R.G. et al. Синтетические РНКи-триггеры и их использование в терапии хронического гепатита В с лечебной целью. Антивирь. Res. 121 , 97–108 (2015).

    CAS PubMed Google ученый

  • 196.

    Gane, E. et al. Исследование фазы 1 для оценки безопасности и переносимости возрастающих разовых доз препарата ARC-521 для вмешательства в РНК вируса гепатита В у здоровых добровольцев. J. Hepatol. 66 , S265 – S265 (2017).

    Google ученый

  • 197.

    Schwabe, C. et al. Исследование фазы 1 с однократным и многократным увеличением дозы для оценки безопасности, переносимости, фармакокинетики и влияния ARO-AAT на уровни альфа-1-антитрипсина в сыворотке у здоровых взрослых добровольцев. Гепатология 68 , 1451A – 1452A (2018).

    Google ученый

  • 198.

    Gane, E.J. et al. Первые результаты РНК-интерференции (РНКи) при хроническом гепатите В (ХГВ) с использованием ARO-HBV. Гепатология 68 , 1463A – 1463A (2018).

    Google ученый

  • 199.

    Хорев О. и др. Трехвалентные, содержащие Gal / GalNAc лиганды, сконструированные для рецептора асиалогликопротеина. Bioorg. Med. Chem. 16 , 5216–5231 (2008).

    CAS PubMed Google ученый

  • 200.

    Nair, J. K. et al. Многовалентная миРНК, конъюгированная с N-ацетилгалактозамином, локализуется в гепатоцитах и ​​вызывает устойчивое РНКи-опосредованное молчание генов. J. Am. Chem. Soc. 136 , 16958–16961 (2014).

    CAS PubMed Google ученый

  • 201.

    Dicerna. Модифицированные лигандом двухцепочечные нуклеиновые кислоты. Мировой интеллект. Prop. Орган. WO2016100401A1 , 1–426 (2016).

    Google ученый

  • 202.

    Arrowhead. Нацеленные лиганды. Мировой интеллект. Prop. Орган. WO2018044350 , 1–254 (2018).

    Google ученый

  • 203.

    Крейг К., Абрамс М. и Амиджи М. Последние доклинические и клинические достижения в области конъюгатов олигонуклеотидов. Мнение эксперта. Препарат Делив. 15 , 629–640 (2018).

    CAS PubMed Google ученый

  • 204.

    Lee, A.C.H. et al. Долговременное ингибирование репликации вируса гепатита В и антигенемии с использованием подкожно вводимого агента siRNA в доклинических моделях. J. Hepatol. 68 , S18 – S18 (2018).

    Google ученый

  • 205.

    Тишина. Расширенная платформа GalNAc-siRNA и ее терапевтическое применение https://www.silence-therapeutics.com/media/1799/2018-boston-tides.pdf 1–36 (Silence, 2018).

  • 206.

    Prakash, T. P. et al. Нацеленная доставка антисмысловых олигонуклеотидов в гепатоциты с использованием трехантенного N-ацетилгалактозамина улучшает эффективность у мышей в 10 раз. Nucleic Acids Res. 42 , 8796–8807 (2014).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 207.

    Apponi, L. et al. Стереохимия усиливает фармакологические свойства антисмысловых олигонуклеотидов APOC3. J. Hepatol. 68 , S137 – S137 (2018).

    Google ученый

  • 208.

    van der Ree, M. H. et al. Безопасность, переносимость и противовирусный эффект RG-101 у пациентов с хроническим гепатитом C: двойное слепое рандомизированное контролируемое исследование фазы 1B. Ланцет 389 , 709–717 (2017).

    PubMed Google ученый

  • 209.

    SuzhouRiboLifeScience. Соединение, конъюгаты и их применение, а также их набор. Мировой интеллект. Prop. Орган. WO20111 , 1–271 (2019).

    Google ученый

  • 210.

    Sanhueza, C.A. et al. Эффективное нацеливание на печень за счет поливалентного отображения компактного лиганда для рецептора асиалогликопротеина. J. Am. Chem. Soc. 139 , 3528–3536 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 211.

    WaveLifeSciences. Олигонуклеотидные композиции и способы их использования. Мировой интеллект. Prop. Орган. WO2018223073 , 1–773 (2018).

    Google ученый

  • 212.

    Pasi, K. J. et al. Подкожно вводимый исследуемый терапевтический РНКи, фитусиран (ALN-AT3), нацеленный на антитромбин для лечения гемофилии: промежуточные результаты у пациентов с гемофилией A или B. Гемофилия 22 , 76–76 (2016).

    Google ученый

  • 213.

    Pasi, K. J. et al. Нацеливание антитромбина при гемофилии A или B с помощью РНКи-терапии. N. Engl. J. Med. 377 , 819–828 (2017).

    CAS PubMed Google ученый

  • 214.

    Strat, A. L., Ghiciuc, C. M., Lupusoru, C. E. и Mitu, F. Новый класс лекарств: терапевтическое ингибирование РНКи PCSK9 в качестве специфической терапии, снижающей уровень холестерина ЛПНП. Rev. Med Chir. Soc. Med. Nat. Яссы 120 , 228–232 (2016).

    CAS PubMed Google ученый

  • 215.

    Fitzgerald, K. et al. ALN-PCSsc, исследуемый агент RNAi, который ингибирует PCSK9 с потенциалом для эффективного ежеквартального или, возможно, двухгодичного дозирования: результаты одинарного слепого, плацебо-контролируемого, фазы 1 однократной возрастающей дозы (SAD) и множественной дозы (MD) исследование у взрослых с повышенным уровнем холестерина ЛПНП при включении и выключении статинов. Тираж 132 , 2275–2275 (2015).

    Google ученый

  • 216.

    Hassan, M. FOURIER и PCSK9 RNAi: в направлении увеличения стойкости и эффективности ингибиторов PCSK9. Glob. Кардиол. Sci. Пр. 2017 , 13 (2017).

    Google ученый

  • 217.

    Альнилам. Фаза 1 Исследование ALN-TTRsc02, подкожно вводимого исследуемого РНКи-терапевтического средства для лечения транстиретин-опосредованного амилоидоза http: // www.alnylam.com/wp-content/uploads/2018/03/10.-TTR-SCO2_FINAL.pdf (2018).

  • 218.

    Dindo, M. et al. Молекулярные основы первичной гипероксалурии: ключи к инновационным методам лечения. Мочекаменная болезнь 47 , 67–78 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 219.

    Dicerna. Корпоративный обзор. Jefferies Global Healthcare Conference 2019 . http: //investors.dicerna.com / static-files / 6ca8fc33-2696-459a-b8ca-a8a39ec68903 1-22 (2019 г.).

  • 220.

    Zorde Khvalevsky, E. et al. Мутант KRAS — лекарственная мишень для рака поджелудочной железы. Proc. Natl Acad. Sci. США 110 , 20723–20728 (2013).

    PubMed Google ученый

  • 221.

    Amotz Shemi, E.Z. K. et al. Многоэтапное эффективное распределение лекарств в солидных опухолях. Oncotarget 7 , 39564–39577 (2015).

    Google ученый

  • 222.

    Ramot, Y. et al. Доклиническая оценка безопасности на крысах полимерного матрикса, содержащего препарат миРНК, используемого в качестве местной и пролонгированной системы доставки для терапии рака поджелудочной железы. Toxicol. Патол. 44 , 856–865 (2016).

    CAS PubMed Google ученый

  • 223.

    Golan, T. et al. РНКи-терапия, направленная на KRAS, в сочетании с химиотерапией для пациентов с местнораспространенным раком поджелудочной железы. Oncotarget 6 , 24560–24570 (2015).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 224.

    Шеми, А. и Хвалевский, З. Композиции интерференции РНК, направленные на белок теплового шока 90, и способы их использования. Патент США. Товарный знак Off. US20170283803A1 , 1–20 (2017).

    Google ученый

  • 225.

    Takemoto, H.И Нишияма, Н. Функциональный полимерный носитель для доставки миРНК, который распознает сайт-специфические биосигналы. J. Control. Выпуск 267 , 90–99 (2017).

    CAS PubMed Google ученый

  • 226.

    Guo, S. et al. Тройные комплексы амфифильный поликапролактон-привитый поли (N, N-диметиламиноэтилметакрилат), ДНК и полиглутаминовая кислота-привитой поли (этиленгликоль) для доставки генов. Биоматериалы 32 , 4283–4292 (2011).

    CAS PubMed Google ученый

  • 227.

    Lin, D. et al. Структурный вклад блокированного или привитого поли (2-диметиламиноэтилметакрилата) на наночастицах пегилированного поликапролактона в доставке миРНК. Биоматериалы 32 , 8730–8742 (2011).

    CAS PubMed Google ученый

  • 228.

    Huang, Y. et al. Бинарные и тройные комплексы на основе поликапролактон-графт-поли (N, N-диметиламиноэтилметакрилат) для адресной доставки миРНК. Биоматериалы 33 , 4653–4664 (2012).

    CAS PubMed Google ученый

  • 229.

    Lin, D. et al. Внутриклеточные расщепляемые мезопористые наночастицы диоксида кремния, функционализированные поли (2-диметиламиноэтилметакрилатом), для эффективной доставки миРНК in vitro и in vivo. Наноразмер 5 , 4291–4301 (2013).

    CAS PubMed Google ученый

  • 230.

    Han, S. et al. Влияние гидрофобных компонентов ядра амфифильных наночастиц PDMAEMA на доставку миРНК. Биоматериалы 48 , 45–55 (2015).

    CAS PubMed Google ученый

  • 231.

    Zhang, T. et al. Фторированные олигоэтилениминные наноузлы для эффективного siRNA-опосредованного сайленсинга генов в средах, содержащих сыворотку, за счет эффективного эндосомального ускользания. Nano Lett. 18 , 6301–6311 (2018).

    CAS PubMed Google ученый

  • 232.

    Suma, T. et al. Повышенная стабильность и способность заглушать гены полиионных комплексов, нагруженных миРНК, составленных из производных полиаспартамида с повторяющимся набором аминогрупп в боковой цепи. Биоматериалы 33 , 2770–2779 (2012).

    CAS PubMed Google ученый

  • 233.

    Лю Ю.и другие. Зарядовые конверсионные биомиметические нанокомплексы как многофункциональная платформа для усиления ортотопической глиобластомной РНКи-терапии. Nano Lett. 20 , 1637–1646 (2020).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 234.

    Дэвис, М. Е. Первая нацеленная доставка siPHK у людей с помощью самособирающихся наночастиц на основе полимера циклодекстрина: от концепции до клиники. Мол. Pharm. 6 , 659–668 (2009).

    CAS PubMed Google ученый

  • 235.

    Davis, M. E. et al. Доказательства наличия РНКи у людей в результате системного введения миРНК через наночастицы-мишени. Природа 464 , 1067–1070 (2010).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 236.

    van Zandwijk, N. et al. Безопасность и активность миниатюрных клеток, нагруженных микроРНК, у пациентов с рецидивирующей злокачественной мезотелиомой плевры: открытое исследование с увеличением дозы впервые на людях, фаза 1. Ланцет Онкол. 18 , 1386–1396 (2017).

    PubMed Google ученый

  • 237.

    Zhou, J. et al. Одновременное подавление TGF-beta1 и COX-2 уменьшает гипертрофический рубец кожи человека за счет активации апоптоза фибробластов. Oncotarget 8 , 80651–80665 (2017).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 238.

    Kamerkar, S. et al. Экзосомы способствуют терапевтическому нацеливанию онкогенных KRAS при раке поджелудочной железы. Природа 546 , 498–503 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 239.

    Lu, M. & Huang, Y. Bioinspired экзосомоподобные терапевтические средства и наноплатформы доставки. Биоматериалы 242 , 119925 (2020).

    CAS PubMed Google ученый

  • 240.

    Huang, Y. et al. Системная и нацеленная на опухоль доставка миРНК с помощью циклических NGR и пептидов, содержащих мотивы isoDGR. Biomater. Sci. 4 , 494–510 (2016).

    CAS PubMed Google ученый

  • 241.

    Huang, Y. et al. Системное введение siRNA через cRGD-содержащий пептид. Sci. Отчет 5 , 12458 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 242.

    Kim, S. S. et al. Направленная доставка миРНК к макрофагам для противовоспалительного лечения. Мол. Ther. 18 , 993–1001 (2010).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 243.

    Kumar, P. et al. Трансваскулярная доставка малых интерферирующих РНК в центральную нервную систему. Nature 448 , 39–43 (2007).

    CAS PubMed Google ученый

  • 244.

    Dong, Y. et al. Система доставки siRNA с двойным нацеливанием на дендример для эффективного подавления гена в терапии рака. J. Am. Chem. Soc. 140 , 16264–16274 (2018).

    CAS PubMed Google ученый

  • 245.

    Zhou, J. et al. Системное введение комбинаторных дсиРНК с помощью наночастиц эффективно подавляет инфекцию ВИЧ-1 у гуманизированных мышей. Мол. Ther. 19 , 2228–2238 (2011).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 246.

    Liu, X. et al. Адаптивные наноузлы на основе амфифильных дендримеров как надежные и универсальные системы доставки миРНК. Angew. Chem. Int. Эд. Англ. 53 , 11822–11827 (2014).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 247.

    Cui, D. et al. Регрессия рака желудка путем системной инъекции наночастиц РНК, несущих как лиганд, так и миРНК. Sci. Отчет 5 , 10726 (2015).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 248.

    Lee, T. J. et al. Наночастица РНК как вектор для направленной доставки миРНК в модель глиобластомы мыши. Oncotarget 6 , 14766–14776 (2015).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 249.

    Stewart, J. M. et al.Программируемые микроструктуры РНК для координированной доставки миРНК. Наноразмер 8 , 17542–17550 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 250.

    Xu, Y. et al. Специфическая доставка миРНК дельта-5-десатуразы через наночастицы РНК, дополненные дигомо-гамма-линоленовой кислотой, для подавления рака толстой кишки. Редокс Биол. 21 , 101085 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 251.

    Pi, F. et al. Ориентация наночастиц для контроля загрузки РНК и отображения лиганда на внеклеточных везикулах для регрессии рака. Nat. Nanotechnol. 13 , 82–89 (2018).

    CAS PubMed Google ученый

  • 252.

    Smith, J. A. et al. РНК-нанотерапевтические средства для улучшения реактивности астроглии. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 10 , 103–121 (2018).

    CAS PubMed Google ученый

  • 253.

    Xu, C. et al. Благоприятное биораспределение, специфическое нацеливание и условное эндосомное ускользание наночастиц РНК в терапии рака. Cancer Lett. 414 , 57–70 (2018).

    CAS PubMed Google ученый

  • 254.

    Jasinski, D., Haque, F., Binzel, D. W. & Guo, P. Развитие новой области нанотехнологии РНК. САУ Nano. 11 , 1142–1164 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 255.

    Guo, S. et al. Улучшенная доставка генов и подавление siRNA с помощью наночастиц золота, покрытых полиэлектролитом с обратным зарядом. САУ Nano. 4 , 5505–5511 (2010).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 256.

    Альнилам. Внепеченочные роды. Мировой интеллект. Prop. Орган. WO201

    59A1 , 1–271 (2019).

    Google ученый

  • 257.

    Бисканс А., Коулз А., Эчеверрия Д. и Хворова А. Валентность конъюгатов жирных кислот влияет на фармакокинетику, распределение и эффективность миРНК in vivo. J. Control. Выпуск 302 , 116–125 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 258.

    Biscans, A. et al. Разнообразные липидные конъюгаты для функциональной внепеченочной siRNA доставки in vivo. Nucleic Acids Res. 47 , 1082–1096 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 259.

    Nikan, M. et al. Синтез и оценка паренхиматозного удерживания и эффективности метаболически стабильного конъюгата миРНК О-фосфохолин-N-докозагексаеноил-1-серин в мозге мышей. Bioconjug. Chem. 28 , 1758–1766 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 260.

    Осборн, М.Ф. и Хворова А. Улучшение доставки миРНК in vivo за счет липидной конъюгации. Nucleic Acid Ther. 28 , 128–136 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 261.

    Ostergaard, M. E. et al. Конъюгация гидрофобных фрагментов увеличивает эффективность антисмысловых олигонуклеотидов в мышцах грызунов и нечеловеческих приматов. Nucleic Acids Res. 47 , 6045–6058 (2019).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 262.

    Prakash, T. P. et al. Конъюгация жирных кислот увеличивает активность антисмысловых олигонуклеотидов в мышцах. Nucleic Acids Res. 47 , 6029–6044 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 263.

    Wang, S. et al. Липидные конъюгаты усиливают эндосомное высвобождение антисмысловых олигонуклеотидов в клетки. Nucleic Acid Ther. 29 , 245–255 (2019).

  • 264.

    Schluep, T. et al. Безопасность, переносимость и фармакокинетика инъекции ARC-520, терапевтического средства на основе РНК-интерференции для лечения хронической вирусной инфекции гепатита B, у здоровых добровольцев. Clin. Pharm. Drug Dev. 6 , 350–362 (2017).

    CAS Google ученый

  • 265.

    Корпоративная презентация Dicerna, февраль 2020 г.(2020).

  • 266.

    Arrowhead. ARO-AAT для болезни печени при дефиците антитрипсина альфа-1: прогресс клинических разработок (Arrowhead, 2019).

  • 267.

    Liebow, A. et al. Исследуемая терапевтическая РНКи, нацеленная на гликолатоксидазу, снижает выработку оксалата в моделях первичной гипероксалурии. J. Am. Soc. Нефрол. 28 , 494–503 (2017).

    CAS PubMed Google ученый

  • 268.

    Hill, A. et al. Подкожно вводимое исследуемое терапевтическое РНКи (ALN-CC5), нацеленное на комплемент C5, для лечения ПНГ и опосредованных комплементом заболеваний: результаты предварительного исследования 1/2 фазы у пациентов с ПНГ. Кровь 128 , 5 (2016).

    Google ученый

  • 269.

    Хуанг Ю. Доклинические и клинические достижения терапевтических средств с использованием нуклеиновых кислот, украшенных GalNAc. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 6 , 116–132 (2017).

    CAS PubMed Google ученый

  • 270.

    Huang, Y. & Liang, Z. C. Рецептор азиалогликопротеина и его применение в доставке лекарств, нацеленной на печень. Прог. Biochem. Биофиз. 42 , 501–510 (2015).

    CAS Google ученый

  • 271.

    Haas, M. J. Alnylam прерывает преэклампсию. SciBX: Обмен наукой и бизнесом . 7 , https://doi.org/10.1038/scibx.2014.1170 (2014).

  • 272.

    Wooddell, C. et al. ARO-AAT, подкожное терапевтическое средство на основе РНКи для лечения заболеваний печени, связанных с альфа-1-антитрипсином, демонстрирует реакцию печени на воздействие и эффективность в доклинических исследованиях. J. Hepatol. 68 , S82 – S82 (2018).

    Google ученый

  • 273.

    Wooddell, C. et al. Разработка подкожно вводимых РНКи терапевтических ARO-HBV для лечения хронического вируса гепатита B. J. Hepatol. 68 , S18 – S19 (2018).

    Google ученый

  • 274.

    Butler, A. A. et al. Гипертриглицеридемия, индуцированная фруктозой, у макак-резусов ослабляется рыбьим жиром или вмешательством РНК ApoC3. J. Lipid Res. 60 , 805–818 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 275.

    Гамильтон, Дж.Преодоление проблем терапии на основе РНКи: интервью с Джеймсом Гамильтоном. Ther. Deliv. 9 , 511–513 (2018).

    CAS PubMed Google ученый

  • 276.

    Melquist, S. et al. Нацеливание на аполипопротеин (а) с помощью новой платформы доставки РНКи в качестве профилактического лечения для снижения риска сердечно-сосудистых событий у лиц с повышенным уровнем липопротеинов (а). Тираж 134 , 7 (2016).

    Google ученый

  • 277.

    Боррелли, М. Дж., Юсеф, А., Боффа, М. Б. и Кощинский, М. Л. Новые рубежи в Lp (a) -направленной терапии. Trends Pharm. Sci. 40 , 212–225 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 278.

    Soule, B. et al. Безопасность, переносимость и фармакокинетика BMS-986263 / ND-L02-s0201, новой целевой липидной наночастицы, доставляющей миРНК HSP47, у здоровых участников: рандомизированное плацебо-контролируемое двойное слепое исследование фазы 1. J. Hepatol. 68 , S112 – S112 (2018).

    Google ученый

  • 279.

    Kimchi-Sarfaty, C. et al. Упакованные in vitro псевдовирионы SV40 как высокоэффективные векторы для переноса генов. Гум. Gene Ther. 13 , 299–310 (2002).

    CAS PubMed Google ученый

  • 280.

    Nishimura, M. et al. Терапевтический синергизм между микроРНК и миРНК при лечении рака яичников. Рак Discov. 3 , 1302–1315 (2013).

    CAS PubMed Google ученый

  • 281.

    Landen, C. N. Jr. et al. Терапевтическое нацеливание на ген EphA2 in vivo с использованием нейтральной липосомальной доставки малых интерферирующих РНК. Cancer Res. 65 , 6910–6918 (2005).

    CAS PubMed Google ученый

  • 282.

    Duxbury, M. S. et al.EphA2: детерминанта злокачественного клеточного поведения и потенциальная терапевтическая мишень при аденокарциноме поджелудочной железы. Онкоген 23 , 1448–1456 (2004).

    CAS PubMed Google ученый

  • 283.

    Jensen, S.A. et al. Конъюгаты сферических наночастиц нуклеиновых кислот как основанная на РНКи терапия глиобластомы. Sci. Пер. Med. 5 , 209ra152 (2013).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 284.

    Hwang, J. et al. Развитие проникающей в клетки асимметричной интерферирующей РНК, нацеленной на фактор роста соединительной ткани. J. Invest. Дерматол. 136 , 2305–2313 (2016).

    CAS PubMed Google ученый

  • 285.

    Leachman, S. A. et al. Первое испытание фазы Ib siRNA, направленной на мутации человека, по наследственному заболеванию кожи. Мол. Ther. 18 , 442–446 (2010).

    CAS PubMed Google ученый

  • 286.

    Ли, Д. У., Хуанг, В., Риттенхаус, К. Д. и Джессен, Б. Экспрессия на сетчатке и межвидовая проверка сайленсинга генов с помощью PF-655, малой интерферирующей РНК против RTP801 для лечения глазных болезней. J. Ocul. Pharmacol. Ther. 28 , 222–230 (2012).

    CAS PubMed Google ученый

  • 287.

    Hobo, W. et al. Подавление siRNA PD-L1 и PD-L2 на дендритных клетках увеличивает экспансию и функцию минорных антиген-специфичных CD8 + Т-клеток гистосовместимости. Кровь 116 , 4501–4511 (2010).

    CAS PubMed Google ученый

  • 288.

    van der Waart, A. B. et al. Подавление siRNA лигандов PD-1 на вакцинах из дендритных клеток усиливает экспансию минорных антиген-специфичных CD8 (+) Т-клеток гистосовместимости у мышей NOD / SCID / IL2Rg (нулевых). Cancer Immunol. Immunother. 64 , 645–654 (2015).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 289.

    Libertine, L. et al. RXI-109 для лечения пролиферативной витреоретинопатии (PVR) и других глазных заболеваний. Invest Ophth Vis. Sci. 55 , 3 (2014).

    Google ученый

  • 290.

    Schultheis, B. et al. Комбинированная терапия гемцитабином и Atu027 у пациентов с местнораспространенной или метастатической аденокарциномой поджелудочной железы — исследование фазы Ib / IIa. Онкол. Res. Относиться. 41 , 64 (2018).

    Google ученый

  • 291.

    Golan, T. et al. Фаза I испытания местной доставки siRNA против k-ras в сочетании с химиотерапией местнораспространенной аденокарциномы поджелудочной железы. J. Clin. Онкол. 31 , 1 (2013).

    Google ученый

  • 292.

    Moreno-Montañés, J., Bleau, A.-M. И Хименес, А. И. Тиванисиран, новая миРНК для лечения синдрома сухого глаза. Мнение эксперта. Расследование. Наркотики 27 , 421–426 (2018).

    PubMed Google ученый

  • 293.

    Beatriz, J. et al. Клинические испытания безопасности и эффективности SYL1001, новой короткой интерферирующей РНК для лечения синдрома сухого глаза. Инвест. Офтальмол. Vis. Sci. 57 , 6447–6454 (2016).

    Google ученый

  • 294.

    Moreno-Montanes, J.и другие. Фаза I клинических испытаний SYL040012, небольшой интерферирующей РНК, нацеленной на бета-адренорецептор 2, для снижения внутриглазного давления. Мол. Ther. 22 , 226–232 (2014).

    CAS PubMed Google ученый

  • 295.

    Martinez, T. et al. In vitro и in vivo эффективность SYL040012, нового соединения siRNA для лечения глаукомы. Мол. Ther. 22 , 81–91 (2014).

    CAS PubMed Google ученый

  • 296.

    Triozzi, P. et al. Фаза I клинических испытаний адоптивной клеточной иммунотерапии APN401 у пациентов с солидными опухолями. J. Immunother. Рак 3 , P175 (2015).

    PubMed Central Google ученый

  • 297.

    Loibner, H. et al. Адоптивная клеточная иммунотерапия APN401, аутологичный cbl-b подавляет мононуклеарные клетки периферической крови: данные исследования фазы I у пациентов с солидными опухолями. Дж.Clin. Онкол. 36 , 1 (2018).

    Google ученый

  • 298.

    Seto, A. G. et al. Кобомарсен, олигонуклеотидный ингибитор miR-155, координирует несколько путей выживания, чтобы уменьшить клеточную пролиферацию и выживаемость при кожной Т-клеточной лимфоме. Br. J. Haematol. 183 , 428–444 (2018).

    CAS PubMed Google ученый

  • 299.

    Галлант-Бем, К. Л. и др. Миметик микроРНК-29 (Ремларсен) подавляет экспрессию внеклеточного матрикса и фиброплазию в коже. J. Invest. Дерматол. 139 , 1073–1081 (2019).

    CAS PubMed Google ученый

  • 300.

    Montgomery, R. L. et al. Мимикрия микроРНК блокирует фиброз легких. EMBO Mol. Med. 6 , 1347–1356 (2014).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 301.

    Галлант-Бем, К. Л. и др. Синтетический ингибитор микроРНК-92a (MRG-110) ускоряет ангиогенез и заживление ран в диабетических и недиабетических ранах. Регенерация для восстановления ран. 26 , 311–323 (2018).

    PubMed Google ученый

  • 302.

    Javanbakht, H. et al. Нацеленные на печень одноцепочечные одноцепочечные олигонуклеотиды против HBV с заблокированной нуклеиновой кислотой сильно снижают экспрессию гена HBV in vivo. Мол. Ther.Нуклеиновые кислоты 11 , 441–454 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

    • Европа PMC

    Резюме

    Митохондрии человека содержат собственный геном, кодирующий 13 полипептидов, которые синтезируются внутри органеллы. Молекулярные процессы, которые управляют и облегчают эту митохондриальную трансляцию, остаются неясными. Многие ключевые факторы еще предстоит охарактеризовать, например, те, которые необходимы для прекращения перевода.Все другие системы имеют два класса факторов высвобождения, которые либо способствуют кодон-специфическому гидролизу пептидил-тРНК (класс I), либо не обладают специфичностью, но стимулируют диссоциацию факторов класса I от рибосомы (класс II). Один митохондриальный белок человека был ранее идентифицирован in silico как предполагаемый член факторов высвобождения класса I. Хотя мы не смогли подтвердить функцию этого фактора, мы сообщаем об идентификации другого митохондриального белка, mtRF1a, который способен in vitro и in vivo прекращать трансляцию в кодонах UAA / UAG.Кроме того, истощение mtRF1a в клетках HeLa привело к нарушению роста галактозы и увеличению продукции активных форм кислорода.

    Ключевые слова: РНК

    Введение

    Центральная функция митохондрий — это окислительное фосфорилирование, процесс сопряжения дыхания с производством АТФ. Тринадцать полипептидов, важных для этой функции, кодируются митохондриальным геномом (мтДНК). Таким образом, синтез митохондриального белка занимает центральное место в жизни аэробных эукариотических клеток; однако наше понимание экспрессии митохондриальных генов млекопитающих далеко не полное, особенно в отношении механизмов, управляющих синтезом митохондриального белка.Важно исправить эту ситуацию, поскольку становится все более очевидным, что дефекты митохондриальной трансляции составляют важную подгруппу митохондриальных нарушений (Coenen et al., 2004; Jacobs and Turnbull, 2005; Miller et al., 2004; Smeitink et al., др., 2006; Валенте и др., 2007).

    Аппарат митохондриальной трансляции использует использование кодонов, отличное от универсального кода, при этом некоторые виды расшифровывают AUA как метионин, а большинство превращают универсальный STOP-кодон UGA в триптофан.Таким образом, большинство систем трансляции митохондрий уменьшили количество кодонов терминации с трех до двух (Elzanowski and Ostell, 2000). Хотя митохондриальный код человека также использует эти два изменения, он еще больше варьируется за счет присвоения двух дополнительных кодонов терминации, AGA и AGG, которые обычно кодируют аргинин (Barrell et al., 1979). Как только комплекс трансляции достигает кодона терминации, завершенный белок должен быть отделен от конечной тРНК, рибосомы и родственной ей мРНК.Белки, ответственные за выполнение этих функций, представляют собой факторы высвобождения (RF), которые делятся на два класса (см. Обзор в Kisselev et al., 2003; Poole and Tate, 2000). Класс I является кодон-специфичным с пептидными мотивами, которые различают кодоны STOP. В прокариотических RF это трипептидный мотив SPF или PXT (Ito et al., 2000; Nakamura et al., 2000). Существует также петля / мотив GGQ, облегчающая прекращение трансляции путем гидролиза сложноэфирной связи между тРНК и возникающим полипептидом (Frolova et al., 1999; Seit-Nebi et al., 2001). Факторы цитозольного высвобождения эубактерий и эукариот различаются по составным частям класса I. Эубактерии используют три кодона STOP и требуют двух факторов высвобождения, RF1 и RF2. Оба распознают UAA, но RF1 также взаимодействует с UAG, а RF2 — с UGA. Таким образом, хотя каждый бактериальный RF распознает пару кодонов STOP, оба необходимы для соответствующего терминации трансляции всей популяции мРНК. Большинство эукариот и архебактерий используют одни и те же три стоп-кодона (UAA, UAG и UGA), но каждому организму требуется только один всемогущий белок, названный eRF1 или aRF1, соответственно, который может распознавать все три триплета STOP (Frolova et al., 1999; Konecki et al., 1977). Это оставляет интригующий вопрос о том, похожи ли митохондрии человека более близко на эукариоты и архебактерии и развили один фактор высвобождения, который может распознавать все четыре используемых кодона, или они следуют эубактериальной парадигме двух RF, каждая из которых распознает пару стоп-сигналов. кодоны, которые более точно отражали бы их α-протеобактериальное происхождение.

    До сих пор не был охарактеризован фактор высвобождения митохондрий человека. Кандидат, mtRF1, был предложен несколько лет назад в результате биоинформатического анализа (Zhang and Spremulli, 1998) и с тех пор включен в научную литературу (например, Antonicka et al., 2006; Аскарян-Амири и др., 2000; Булыгин и др., 2002; Chavatte et al., 2003; Фролова и др., 2002; Киселев и др., 2003; Опарина и др., 2005; Петри и др., 2005; Смейтинк и др., 2006). Факторы высвобождения класса I типа RF1 содержат мотив трипептида PXT, ответственный за распознавание кодонов. Однако человеческий mtRF1 демонстрирует гексапептид PEVGLS в этой области.

    Здесь мы сообщаем, что теперь мы идентифицировали альтернативный генный продукт с большим сходством по мотиву распознавания трипептида бактериального RF1.Более того, мы приписываем митохондриальную локализацию и активность высвобождения этому белку, mtRF1a, который проявляет специфическое распознавание основных используемых кодонов, UAA и UAG, что согласуется с тем, что он является фактором высвобождения в митохондриях человека.

    Результаты

    Человеческий mtRF1 — митохондриальный белок

    В настоящее время в ряде работ утверждается, что митохондрии человека имеют единственный фактор высвобождения, mtRF1, который был идентифицирован in silico несколько лет назад (Zhang and Spremulli, 1998).Чтобы определить, действительно ли этот белок является митохондриальным, мы создали конструкцию слияния GFP, C-концевую по отношению к предсказанной N-концевой целевой последовательности mtRF1. Клетки HeLa временно трансфицировали и через 24 часа обрабатывали митотрекером-CMH 2 X ROS для визуализации митохондрий. Согласование сигналов флуоресценции указывает на митохондриальную локализацию слитого белка (А).

    Человеческий mtRF1 представляет собой митохондриальный белок без детектируемой активности фактора высвобождения

    (A) Человеческий mtRF1 нацелен на митохондрии.Клетки HeLa временно трансфицировали в течение 24 часов конструкцией, экспрессирующей 290 N-концевых остатков mtRF1, слитого с GFP. Клетки также окрашивали для визуализации митохондрий (митотрекер CMH 2 X-Ros) и ядер (DAPI). Были получены флуоресцентные изображения, и митохондриальная совместная локализация слитого белка была подтверждена наложением зеленого и красного сигналов на линейном сканировании изображения (линия, видимая на верхней панели). Показано изображение, типичное для трех независимых трансфекций.

    (B) Очищенный mtRF1 не индуцирует терминацию трансляции in vitro. Человеческий mtRF1, лишенный N-концевых 49 остатков, очищали и использовали для оценки терминации трансляции из 5 пмоль рибосом, запрограммированных указанным синтетическим кодоном (400 пмоль). Активность фактора высвобождения измеряли путем гидролиза f [ 3 H] met из его родственной тРНК Met , как подробно описано в дополнительных экспериментальных процедурах. Неограничивающие количества как E. coli RF1 (50 пмоль), так и триплета UAA (400 пмоль) использовали в тандеме в качестве положительного контроля для анализа.Стандартные ошибки рассчитывались минимум из восьми повторов.

    (C) Человеческий mtRF1 не может восстановить респираторную компетентность S. cerevisiae Δmrf1 . Диплоиды, продуцирующие mtRF1 человека или содержащие только вектор, были получены из штамма Δmrf1 , скрещенного с CW252 / A дикого типа. После споруляции аски иссекали и полученные гаплоидные сестринские споры (A – D) оценивали на наличие плазмиды (-урацила), устойчивость к генетицину G418, показывающую делецию MRF1Sc , и рост на неферментируемом источнике углерода (глицерин).

    (D) Человеческий mtRF1 не может восстановить респираторную компетентность S. pombe Δmrf1 . Новый штамм делящихся дрожжей, лишенный эндогенного фактора высвобождения митохондрий NB329 (экспериментальные процедуры), и его изогенный штамм дикого типа NB205-6A трансформировали либо пустым вектором, либо одним, продуцирующим mtRF1 человека. Трансформанты накладывали на минимальную среду без урацила, отобранную для плазмиды, реплицировали на полные планшеты с галактозой или глицерином и инкубировали при 28 ° C.

    Функционирует ли человеческий mtRF1 как фактор высвобождения?

    Чтобы оценить, может ли mtRF1 функционировать как фактор высвобождения, мы приняли подходы in vitro и in vivo.Анализы фактора высвобождения in vitro выполнялись в основном так, как было установлено Caskey с коллегами (Caskey et al., 1971). Вкратце, рибосомы инкубировали с синтетическим триплетом AUG и f [ 3 H] Met-тРНК Met для загрузки сайта Р рибосомы перед добавлением очищенного mtRF1 и синтетического стоп-кодона для оценки. Затем определяли количество свободного f [ 3 H] Met, чтобы указать активность высвобождения. Точный размер N-концевой предследовательности, которая может быть отщеплена от полноразмерного белка при импорте в митохондрии, неизвестен, и прогнозы программ нацеливания варьируются от 17 до 70 остатков.Более того, выравнивание последовательностей указывает на то, что первые 63 аминокислоты N-концевого удлинения mtRF1 не совпадают с бактериальным RF1. Таким образом, чтобы моделировать возможные зрелые полипептиды без потери распознаваемых функциональных доменов, были очищены два белка, несущие N-концевые усечения и повышенную растворимость, mtRF1Δ49 и mtRF1Δ69 (данные не показаны). Они были протестированы против универсальных и митохондриально-специфичных стоп-кодонов, но не было обнаружено активности с кодонами UAA, AGA или AGG (B).

    Для исследований in vivo мы оценили, может ли mtRF1 человека подавлять фенотип, вызванный потерей эндогенного фактора высвобождения из дрожжей. Мутации S. cerevisiae MRF1 вызывают респираторную дисфункцию, связанную с потерей интактной мтДНК (Pel et al., 1992). Такая нестабильность мтДНК, как известно, является результатом дефектов в общем механизме трансляции митохондрий (Myers et al., 1985). Экспрессия всей кДНК mtRF1 человека в гетерозиготном диплоиде Δ mrf1 rho + с последующей споруляцией не дала никаких спор Δmrf1 , которые могли бы расти на неферментируемых источниках углерода (глицерин, C).Точно так же не было восстановления спектров цитохрома, что согласуется с отсутствием синтеза митохондриального белка и сборки респираторного комплекса (данные не показаны). Фактически, споры Δmrf1 , продуцирующие mtRF1 человека, все еще не могли поддерживать свою мтДНК. Это увеличивало вероятность того, что комплементация произошла, но была слишком слабой, чтобы обеспечить поддержание мтДНК, тем самым предотвращая неферментируемый рост. Чтобы решить эту проблему, новый штамм , удаленный mrf1 , был сконструирован в делящихся дрожжах Schizosaccharomyces pombe , petite -отрицательных дрожжах, для которых события потери мтДНК сильно противодействуют.Штамм Δ mrf1Sp показал сниженный рост при 28 ° C на галактозе, которая вызывает дыхание, и он прекратил рост при 36 ° C на той же среде (D, см. Рисунок S4B в дополнительных данных, доступных в этой статье в Интернете), но сохранил мтДНК (рисунок S1). Трансфектанты этого штамма, экспрессирующие кДНК, кодирующую человеческий mtRF1, также не могли дышать, и не было восстановления роста на глицерине / этаноле или галактозе, как показано на D, несмотря на присутствие интактной мтДНК.

    Идентификация альтернативного кандидата в фактор высвобождения митохондрий человека

    Отсутствие активности высвобождения in vitro могло быть связано с необходимостью использования гетерологичных бактериальных рибосом 70S, а не миторибосом 55S.На сегодняшний день невозможно создать воспроизводимый анализ in vitro с миторибосомами млекопитающих, в отличие от дрожжевых компонентов (Askarian-Amiri et al., 2000), что, возможно, объясняется недавними исследованиями криоэлектронной микроскопии, которые показали, что изолированные млекопитающие миторибосомы сохраняют деацилированную мт-тРНК в сайте P (Sharma et al., 2003). Во-вторых, неспособность mtRF1 восстанавливать дыхание в любом из штаммов дрожжей Δ mrf1 может быть объяснена тем, что дрожжевой Mrf1p распознает только UAA / UAG в качестве кодонов терминации (поскольку все мРНК дрожжей содержат UAA или UAG в качестве стоп-кодонов), тогда как те, которые распознаются человеческим mtRF1, потенциально могут быть AGG и AGA.Если это так, то может быть второй фактор высвобождения митохондрий человека. Поиск в человеческих базах данных выявил второго кандидата, которого мы назовем mtRF1a (UniprotKB / TrEMBL Q96EX4). Этот предсказанный полипептид из 380 аминокислот показывает общую идентичность последовательности приблизительно 42% с mtRF1, 34% с mRF дрожжей ( S. pombe , S. cerevisiae , K. lactis ), 40% с бактериальными RF1, и 41% сходства с РФ от близкого эволюционного родственника R.prowazeckii (Andersson et al., 1998; Gray, 1998) (рисунок S2). Более того, mtRF1a содержит мотив PXT, который более похож на другие RF1, содержащий мотив узнавания триаминокислот PKT, а не последовательность гексапептида в mtRF1 ().

    Таблица 1

    Сравнение первичной последовательности, охватывающей мотив распознавания стоп-кодона факторов высвобождения RF1-типа из различных организмов

    11 Митохондриальные ткани1 9002 6 9531 Q 95 411 Q 9531 9531 N 9009 Mitochondrial

    Как и в случае с mtRF1, для mtRF1a была создана конструкция С-концевого слитого белка GFP и временно трансфицирована в клетки HeLa перед окрашиванием митотрекером через 24 часа.Нацеливание на митохондрии было продемонстрировано совместной локализацией сигналов флуоресценции (A). Чтобы подтвердить интрамитохондриальное поглощение, были проведены эксперименты по импорту in vitro с транслированным in vitro 35 S-меченным mtRF1a и изолированными митохондриями (B и дополнительные экспериментальные процедуры). Было показано, что импорт зависит от потенциала митохондриальной мембраны (FCCP, дорожки 4 и 5) и приводит к расщеплению пре-последовательности (дорожки 2 и 3). Созревший белок был устойчив к добавленной протеиназе К, что подтверждает захват митохондриями (дорожка 3).

    Человеческий mtRF1a является фактором высвобождения митохондрий, который распознает кодоны UAA и UAG

    (A) Человеческий mtRF1a нацелен на митохондрии. Клетки HeLa временно трансфицировали (24 часа) конструкцией, экспрессирующей 357 N-концевых остатков mtRF1a, слитых с GFP. Клетки также окрашивали для визуализации митохондрий (митотрекер CMH 2 X-Ros) и ядер (DAPI). Были получены изображения флуоресценции, и митохондриальная совместная локализация гибридного белка была подтверждена наложением зеленого (гибридный белок) и красного (митохондриальный) сигналов, как показано на крайней правой панели.Показанное изображение представляет три независимых повтора.

    (B) Человеческий mtRF1a импортируется в митохондрии и созревает. Полноразмерный 35 S-радиоактивно меченный mtRF1a синтезировали in vitro (дорожка 1) и инкубировали с митохондриями печени крысы. В условиях импорта видны два продукта: полноразмерный препротеин и зрелый белок (дорожка 2). Компоненты (FCCP, протеиназа K) добавляли, как указано.

    (C) Человеческий mtRF1a обнаружен в митохондриях всех проанализированных клеточных линий и тканей.Готовили лизаты клеток Hep G2, HEK293 и HeLa человека (C60 мкг) или митохондрий (M20 мкг) вместе с митохондриями скелетных мышц человека (SkM – M18 мкг) и подвергали их вестерн-блот-анализу с антителами против mtRF1a. Единственный белок приблизительно 40 кДа был виден во всех протестированных типах клеток / тканей и обнаружен исключительно в митохондриальной фракции (не в постмитохондриальных супернатантах, данные не показаны). Не было отмечено перекрестной реактивности с очищенным mtRF1 (данные не показаны).

    (D) Человеческий mtRF1a обладает активностью фактора высвобождения с кодонами UAA и UAG, но не с кодонами UGA.Анализы высвобождения проводили с 50 пмоль mtRF1a и 5 пмоль рибосом, как подробно описано в экспериментальных процедурах. Рибосомы были независимо запрограммированы с помощью пяти триплетных кодонов (400 пмоль), четыре из которых являются кодонами терминации в митохондриях человека (UAA / G, AGA / G), и UGA, который кодирует триптофан в митохондриях, но действует как кодон терминации в цитозоле. Контроль кодонов также не проводился. Стандартные ошибки рассчитывались как минимум из трех или максимум из 11 повторов.

    Предполагается, что любой фактор, участвующий в трансляции митохондриального белка, присутствует во всех типах клеток.Антисыворотки были получены против очищенного рекомбинантного mtRF1a и очищены с помощью аффинности. Митохондриальный белок, выделенный из скелетных мышц человека и различных линий клеток человека, был проанализирован с помощью вестерн-анализа, и было обнаружено, что mtRF1a встречается повсеместно (C). Кроме того, сравнивая экстракты HeLa со стандартной кривой очищенного mtRF1a, мы смогли рассчитать приблизительно 30 000 молекул на клетку (данные не показаны).

    Человеческий mtRF1a является фактором высвобождения трансляции

    Очищенный рекомбинантный mtRF1a тестировали в анализе терминации, описанном выше.Первоначальные анализы показали высвобождение f [ 3 H] Met при использовании UAA или UAG в качестве синтетического стоп-кодона, подтверждая, что mtRF1a может действовать как фактор высвобождения. Условия анализа были оптимизированы для фактора высвобождения митохондрий человека (рисунок S3). Используя эти параметры анализа, человеческий рекомбинантный mtRF1a опрашивали с помощью полной панели кодонов. D четко демонстрирует, что mtRF1a опосредовано кодон-специфическим высвобождением f [ 3 H] Met из терминального комплекса. Имеется значительное распознавание стоп-кодонов UAA и UAG человеческим mtRF1a, но только остаточные некаталитические уровни, сравнимые с теми, которые были получены при отсутствии кодонов для неузнаваемых стоп-кодонов AGA и AGG.Важно отметить, что кодон UGA, кодирующий триптофан в митохондрии человека, не стимулировал активность высвобождения. Удлинение стоп-кодона 3 ‘для включения трех дополнительных остатков аденозина для имитации контекста с поли (A) хвостом не привело к значительным изменениям наблюдаемой активности высвобождения.

    Хотя мтДНК человека использует четыре триплетные последовательности в качестве стоп-сигналов, их использование неравномерно распределяется в конце 13 митохондриальных открытых рамок считывания (ORF) (Anderson et al., 1981). Неканонические стопы AGA и AGG используются только один раз каждый, для MTCOI и MTND6 соответственно.Из оставшихся 11 ORF MTCO2 и MTATP8 используют UAG в качестве стоп-кодонов, а все последние девять используют UAA, кодируемую непосредственно геномом или дополненную добавлением поли (A) хвоста. Таким образом, 11 из 13 транскриптов используют стоп-сигналы, распознаваемые mtRF1a человека.

    Анализы in vivo выполнялись одновременно. Комплементацию mtRF1a человека оценивали в обоих штаммах дрожжей Δ mrf1 , как описано для mtRF1 (). Вестерн-блоттинг клеточных фракций подтвердил митохондриальную локализацию человеческого белка в дрожжах, хотя и на уровне, отличном от уровня дикого типа.В то время как в митохондриях S. cerevisiae был обнаружен только слабый сигнал mtRF1a, сильный сигнал был получен в митохондриях S. pombe , при этом небольшая фракция белка была обнаружена в постмитохондриальной фракции, что позволяет предположить, что в S. pombe белок человека был лучше экспрессирован, более стабилен и / или более эффективно импортировался в митохондрии (рисунок S4A). В отличие от экспрессии mtRF1, присутствие человеческого mtRF1a было достаточным для стабильного поддержания мтДНК в S.cerevisiae Δ mrf1 (данные не показаны) и восстанавливают рост на респираторных субстратах для обоих дрожжей (глицерин для S. cerevisiae , A; галактоза и глицерин при 28 ° C для S. pombe , B и 36). ° C на галактозе для S. pombe , рисунок S4B), что согласуется с наблюдаемым увеличением цитохромов (A и 3B, правые панели) и частичным восстановлением стационарных уровней митохондриальных белков (Cox2, Cyt b , В).

    Человеческий mtRF1a может подавлять респираторную недостаточность Δmrf1 почкующихся и делящихся дрожжей

    (A) Человеческий mtRF1a восстанавливает респираторный рост S.cerevisiae , в которых отсутствует фактор высвобождения митохондрий. Гетерозиготный диплоидный штамм mrf1 (C) трансфицировали пустым вектором или кодирующим mtRF1a человека перед споруляцией и тетрадным анализом, как описано. На правой панели показаны низкотемпературные спектры клеток, выращенных на среде с глюкозой (Δ mrf1 ) или глицерином (WT и Δ mrf1 + HmtRF1a).

    (B) Человеческий mtRF1a может функционировать в митохондриях делящихся дрожжей. Штамм Δmrf1Sp NB329 или изогенный вектор дикого типа трансформировали либо контрольным вектором, либо вектором, продуцирующим mtRF1a.Трансформанты, нанесенные на среду без урацила, реплицировали на среду галактозы или глицерин / этанол и инкубировали при 28 ° C. Спектральный анализ клеток mrf1 (глюкоза), WT и клеток mrf1, экспрессирующих MTRF1a (галактоза), показан на правой панели.

    (C) Человеческий mtRF1a частично восстанавливает уровень продуктов митохондриальных генов в дрожжах. (Левая панель) Вестерн-анализ субъединиц дыхательного комплекса S. cerevisiae Cox2, Atp4, Cyt b из дикого типа + пустой вектор (дорожка 1), Δmrf1Sc + пустой вектор (дорожка 2), Δmrf1Sc + mtRF1a человека (дорожка 3) и Δmrf1Sc + Mrf1Sc (дорожка 4).На правой панели показаны общие клеточные экстракты штамма S. pombe Δ mrf1 , трансформированные либо пустым вектором (дорожка 1), либо плазмидами, продуцирующими человеческий белок mtRF1a (дорожка 2) или Mrf1Sp (дорожка 3), и проанализированы. вестерн-блоттингом с антителами, распознающими S. pombe Cox2 или белок Hsp60 человека в качестве контроля загрузки.

    (D) Митохондриальная трансляция восстанавливается в присутствии человеческого mtRF1a. Это было измерено с включением 35 S-метионина / цистеина, как подробно описано в экспериментальных процедурах.Штаммы были следующими: полоса 1, Δ mrf1Sc NB345 + вектор, кодирующий человеческий mtRF1a; дорожка 2, Δ mrf1Sc NB345 + пустой вектор; дорожка 3, WT NB346 + пустой вектор.

    Трансляция митохондрий в нескольких штаммах S. cerevisiae также отслеживалась с помощью мечения митохондриальных белков in vivo 35 S. Синтез de novo у делеционного мутанта не обнаружен. Напротив, изогенный штамм, продуцирующий дрожжи дикого типа Mrf1p, демонстрировал высокие уровни синтеза белка.Продукция mtRF1a человека также приводила к митохондриальной трансляции, хотя и на более низких уровнях по сравнению со штаммом дикого типа (D). Эти данные подтверждают, что mtRF1a может функционировать для восстановления трансляции в штаммах дрожжей, дефицитных по эндогенным факторам терминации трансляции митохондрий.

    Истощение человеческого mtRF1a вызывает фенотип роста

    Для определения роли человеческого mtRF1a в митохондриях использовали миРНК для истощения фактора в клетках HeLa. Три молекулы миРНК были сконструированы для разных положений транскрипта mtRF1a, и было показано, что каждая из них снижает стационарный уровень фактора высвобождения более чем на 75% (A).Грубый анализ клеточной пролиферации выявил более низкие уровни слияния, когда клетки контролировали в течение 6 дней с каждой миРНК независимо (данные не показаны). Поскольку три дуплекса миРНК давали сходный фенотип, все последующие эксперименты проводили только с миРНК 2. Затем был проведен подробный подсчет клеток для клеток HeLa, обработанных siRNA2 или нецелевой siRNA, культивированных в стандартной среде, способствующей гликолизу DMEM, или в среде, не содержащей глюкозы, с добавлением галактозы для усиления зависимости от окислительного фосфорилирования.Как можно видеть (A), клетки, обработанные siRNA2, показали увеличение времени удвоения популяции, которое было особенно заметно, когда клетки были вынуждены дышать в среде галактозы.

    Истощение mtRF1a человека не оказывает существенного влияния на синтез митохондриального белка человека

    (A) Истощение mtRF1a не влияет на устойчивые уровни белков, кодируемых мтДНК. Клетки HeLa подвергали воздействию молекул миРНК, нацеленных на три различных участка последовательности мРНК, кодирующей mtRF1a (дорожки 1-3), или нецелевой миРНК (миРНК-N, дорожка 4) в течение 6 дней, и получали лизаты клеток (30 мкг). .Контрольные лизаты получали только из олигофектамина (дорожка 5) и необработанных клеток (Con, дорожка 6). Вестерн-блоттинг проводили с антителами против продуктов митохондриальной трансляции (ЦОХ1 цитохром с субъединица 1 оксидазы; СОХ2, цитохром с субъединица оксидазы II; ND6 НАДН CoQ оксидоредуктаза субъединица 6). Порин использовали в качестве контроля с ядерной кодировкой для подтверждения равной нагрузки. Очищенный mtRF1a (5 нг) загружают в дорожку 7. Эксперимент с анти-mtRF1a подвергали чрезмерной экспозиции, чтобы показать уровень истощения.Блот точно отражает три независимых эксперимента.

    (B) De novo синтез митохондриальных белков не зависит от истощения mtRF1a. Синтез цитозольного белка клеток HeLa, выращенных в присутствии siRNA, нацеленной на MTRF1a (siRNA2-mtRF1a) или нецелевой (siRNA-N) в течение 4 дней, ингибировался добавлением эметина, что позволяло включение 35 S-меченых met / cys непосредственно в 13 синтезированных de novo митохондриальных белков. Равные количества общего клеточного белка (20 мкг) отделяли с помощью 15% SDS PAG и подвергали воздействию PhosphorImager, как описано.Полипептиды были обозначены на основе их подвижности, как описано у Chomyn (1996).

    (C) Комплексы OXPHOS присутствуют на нормальных стационарных уровнях в клетках, лишенных mtRF1a. Клетки HeLa подвергали воздействию миРНК mtRF1a (дорожка 1) или нецелевой (дорожка 2) siRNA в течение 6 дней до проницаемости дигитонина и подготовки к BN-PAGE, как описано. После разделения комплексы были идентифицированы с использованием антисыворотки, как подробно описано. Комплекс I, антитело против 39 кДа; комплекс II, антитело против SDH 70 кДа; комплекс III, антитело против ядра 2; комплекс IV, антитело против COX1.

    (D) Респираторное связывание не затрагивается в клетках, лишенных mtRF1a человека. Клетки HeLa (1-2 × 10 6 ), выращенные в нацеленной (siRNA2-mtRF1a) и нецелевой (siRNA-N) siRNA в течение 3 дней, были подвергнуты респирометрии с высоким разрешением, как подробно описано. Стандартные ошибки были рассчитаны по трем показателям респираторного контроля и производительности. UCR сравнивает частоту полностью несвязанного дыхания и частоту дыхания в состоянии покоя, чтобы дать представление о дыхательном резерве, а RCR сравнивает частоту полностью несвязанного дыхания с частотой дыхания в состоянии 4, ингибированном олигомицином, в то время как RCRp объединяет эти отношения, чтобы указать уровень респираторной способности, связанной с фосфорилированием.

    (E) Поли (A) хвост митохондриальной мРНК не подвержен истощению mtRF1a. РНК выделяли из клеток HeLa, лишенных mtRF1a (дорожки 1, siRNA1; дорожки 2, siRNA2; дорожки 3, siRNA3), и обработанных нецелевых контрольных siRNA (дорожки 4) до того, как длину поли (A) хвоста оценивали для нескольких мт-мРНК как описано ранее (Temperley et al., 2003). Профили поли (A) показаны для транскриптов MTCOI , MTCOII , MTND1 и MTND3 .

    Истощение mtRF1a вызывает дефект роста, увеличение продукции митохондриальных ROS и митохондриальную массу

    (A) Истощение mtRF1a препятствует росту клеток.Множественные аликвоты клеток HeLa подвергались воздействию нацеленных (siRNA2-mtRF1a) и нецелевых (siRNA-N) интерферирующих РНК в течение до 6 дней в среде глюкозы (способствующей гликолизу) или галактозы (вызывающей окислительное дыхание) с подсчетом клеток, выполняемым каждый день. Номера ячеек представлены на полулогарифмическом графике. Цифры представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для четырех независимых лунок.

    (B) Уровни супероксида и митохондриальная масса повышены в клетках, лишенных mtRF1a. Клетки HeLa подвергались воздействию миРНК-мишени (белая) и ненаправленной (черная).Супероксид (SOX) измеряли с помощью зондов MitoSOX, а пероксид (DHR) — с дигидрородамином 123. Уровни измеряли на 3 день и сравнивали с уровнями в необработанных контрольных клетках. Кратное увеличение показано как среднее значение ± стандартная ошибка среднего по крайней мере из трех независимых экспериментов (p <0,01 при сравнении нецелевых значений с целевыми значениями для mitoSOX и DHR). Массу митохондрий на клетку измеряли с помощью селективного красителя кардиолипина, NAO. Изменения содержания мтДНК относительно ядерной ДНК рассчитывали с помощью кПЦР генов MTND1 и 18S рДНК и нормализовали для необработанных клеток.

    Истощение mtRF1a не влияет на стабильные уровни митохондриально кодируемой РНК или белка

    Чтобы изучить точный механизм, вызывающий этот фенотип, мы проанализировали митохондриально кодируемую РНК и белок. показывает, что устойчивые состояния митохондриально кодируемых членов комплексов OXPHOS I (ND6) и IV (COXI и COXII) практически не изменились после 3 или 6 дней опосредованного siRNA нокдауна mtRF1a (A). Это согласуется с отсутствием какого-либо влияния на синтез митохондриального белка de novo (B).Одним из следствий было то, что возникающие полипептиды оставались связанными с рибосомами, влияя на сборку возникающих полипептидов в комплексы OXPHOS. Таким образом, для оценки уровней полностью собранных комплексов использовали Blue Native PAGE. После разделения интактных комплексов не было обнаружено видимых различий в стационарном уровне или миграции этих мультисубъединичных ферментов (комплексы I, III и IV, C), что позволяет предположить, что возникающие пептиды в конечном итоге высвобождаются из рибосомы.

    Хотя уровни комплексов OXPHOS были одинаковыми, было возможно, что это повлияло на скорость переноса электронов или связывание с синтезом АТФ, что привело к фенотипу роста.Был проведен полярографический анализ контрольных клеток и клеток, обработанных миРНК, и результаты показаны в D. Не было обнаружено значительных различий в связанных или несвязанных скоростях переноса электронов, и соотношения респираторного контроля были сопоставимы между образцами, что опять же согласуется с высвобождением возникающих и собранный полипептид из рибосомы.

    Важно отметить, что предыдущий отчет продемонстрировал, что потеря кодона терминации мт-мРНК не препятствует синтезу белка, образованию комплексов или активности (Temperley et al., 2003). Таким образом, оказывается, что ни потеря терминирующего кодона, ни истощение фактора высвобождения не влияет на устойчивый или de novo синтез митохондриальных белков человека. В тех транскриптах, в которых отсутствуют кодоны терминации, наблюдалась выраженная трансляционно-зависимая деградация поли (A) хвоста и быстрый оборот (Temperley et al., 2003). Нозерн-анализ (данные не показаны) и MPAT-анализы для MTCO1 , 2 и MTND1 , 3 транскриптов, однако, подтвердили, что истощение mtRF1a не влияет на стабильность mt-мРНК или длину поли (A) хвоста. (E).

    Истощение mtRF1a вызывает увеличение продукции митохондриальных ROS, митохондриальной массы и числа копий мтДНК

    Роль фактора высвобождения состоит в том, чтобы способствовать гидролизу сложноэфирной связи, связывающей образующийся пептид с концевой тРНК. Гидролиз может происходить независимо от фактора, который потенциально может сделать фактор высвобождения избыточным, но эта некаталитическая скорость считается относительно низкой (W.T., неопубликованные данные). Более того, пептидил-тРНК также может «выпадать» из рибосомы (обзор дан в Das and Varshney, 2006), и недавний отчет о митохондриальной пептидил-тРНК гидролазе человека, PTh3 (De Pereda et al., 2004), предполагает, что этот фермент будет гидролизовать комплекс пептидил-тРНК, позволяя рециркулировать тРНК. Поэтому трудно предсказать точный дефект, который может возникнуть при истощении этого фактора в митохондриях человека. Наши первоначальные данные показали, что фенотип роста был очевиден, но это не было связано с каким-либо драматическим влиянием на стабильность мт-мРНК, синтез белка, сборку комплекса OXPHOS или функцию. Если, однако, вновь синтезированные митохондриальные белки не собираются идеально, активность некоторых комплексов OXPHOS может быть незаметно нарушена, что приведет к ускользанию электронов во время естественного переноса электронов и увеличению количества активных форм кислорода.Поэтому продукцию супероксида и пероксида в митохондриях измеряли с помощью mitoSOX и дигидрородамина 123 (DHR), соответственно, на 3-й день опосредованного siRNA истощения mtRF1a. B показывает значительное увеличение этих уровней по сравнению с контролем, который сохранялся до 6 дня (данные не показаны).

    Повышение ROS недавно было задействовано как посредник для усиления митохондриального биогенеза (Moreno-Loshuertos et al., 2006). Уровни митохондриального кардиолипина (количественно с использованием NAO) и количество копий мтДНК оценивали как меру увеличения массы / массы митохондрий.Как показано на B, значительное увеличение было также отмечено при использовании обоих методов, что согласуется с истощением mtRF1a, вызывающим увеличение продукции митохондриальных ROS и митохондриальной массы. Чтобы использовать количество копий мтДНК на клетку в качестве индикатора митохондриальной массы, ДНК была выделена из клеток HeLa после воздействия нецелевых и mtRF1a-направленных миРНК и ПЦР в реальном времени, используемой для количественного определения мтДНК (ND1) относительно ядерной ДНК (18S рДНК). (см. Экспериментальные процедуры). После истощения mtRF1a siRNA, было 2 родственника.2-кратное увеличение уровней мтДНК по сравнению с необработанными контролями (B, mt / nuc), что соответствует 1,6-кратному увеличению, выявленному с помощью NAO (B, NAO).

    Обсуждение

    Мы сообщаем о характеристике фактора высвобождения трансляции митохондрий человека, mtRF1a, на основе следующих критериев: (1) сходство последовательности с известными факторами высвобождения; (2) митохондриальная локализация, импорт и расщепление препротеина; (3) присутствие в митохондриях всех протестированных типов клеток и тканей; (4) демонстрация активности фактора высвобождения in vitro с E.coli рибосомы; (5) устранение респираторного дефицита Δ mrf1 у делящихся и почкующихся дрожжей in vivo; и (6) демонстрация фенотипа роста в человеческих клетках, истощенных по mtRF1a. Изучение первичной структуры mtRF1a выявляет сходство со многими другими последовательностями факторов высвобождения, сохраняющими классический трипептид GGQ сайта взаимодействия пептидил-тРНК в M-домене (Frolova et al., 1999; Song et al., 2000; Рисунок S2) . Существует большее сходство с факторами типа RF1 эубактерий, чем с всемогущим eRF1, что согласуется с тем, что этот белок распознает только кодоны UAA и UAG.Человеческий mtRF1a не проявлял активности с UGA в качестве кодона. У большинства прокариот есть два фактора высвобождения класса I. Оба способны декодировать UAA, в то время как UAG и UGA распознаются только RF1 или RF2 соответственно. Ранее было показано, что в основе этого различения последовательностей лежит трипептидная последовательность в структурно подобной области, PXT в типах RF1 или SPF для RF2 (Ito et al., 2000). MtRF1a несет PKT в положении 206-208, а не гексапептид, обнаруженный в mtRF1, что согласуется с тем, что это фактор высвобождения RF1-типа, обрывающий синтез белка в кодонах UAA и UAG.

    Является ли mtRF1 фактором высвобождения митохондрий? Идентификация mtRF1 была умело проведена с помощью биоинформатического анализа базы данных EST, но без каких-либо данных, поддерживающих локализацию или функцию (Zhang and Spremulli, 1998). Мы показали, что и mtRF1, и mtRF1a локализованы в митохондриях, но только mtRF1a был способен декодировать кодоны UAA / UAG в наших анализах. Кроме того, добавление mtRF1 в анализы высвобождения, запрограммированные либо с mtRF1a, либо с E. coli RF1, не смогло конкурировать за сайт рибосомы A, когда присутствовали UAG / UAA, что позволяет предположить, что mtRF1 был неспособен распознавать эти кодоны (Рисунок S5).Хотя для mtRF1 не наблюдалось ни детектируемой активности высвобождения in vitro, ни подавления респираторного дефицита дрожжей Δ mrf1 , мы предполагаем, что он действительно является фактором высвобождения митохондрий и отвечает за декодирование непознаваемых стоп-кодонов AGG и AGA. Отсутствие активности высвобождения с рибосомами E. coli может быть связано с навязанным использованием гетерологичной системы анализа, поскольку система E. coli естественным образом не заканчивается ни одним из кодонов.Сравнение последовательностей представляет собой убедительный аргумент в пользу этой гипотезы, поскольку он содержит домен GGQ, имеет сильное сходство последовательностей с другими белками RF1-типа и имеет расширение из трех остатков непосредственно на С-конце домена PXT, которое отсутствует во всех компараторах (). что может лежать в основе декодирования AGA / AGG. Кроме того, поскольку дрожжи используют исключительно UAA / UAG в качестве стоп-кодонов, это может объяснить отсутствие наблюдаемой комплементации in vivo.

    Исследования in vivo и in vitro показали, что mtRF1a действительно обладает активностью фактора высвобождения.Экспрессия в штаммах дрожжей, лишенных их эндогенного фактора высвобождения, восстанавливала митохондриальную трансляцию, что указывает на способность декодировать UAA / UAG, в то время как истощение в клетках человека приводило к фенотипу роста и повышенной продукции ROS. Как потеря mtRF1a может привести к увеличению АФК? Основным источником клеточных АФК является митохондриальная цепь переноса электронов, в частности, в местах переноса электронов к респираторным комплексам I и III и от них. Все 13 полипептидов, кодируемых мтДНК человека, являются членами четырех из пяти комплексов, которые связаны с окислительным фосфорилированием.Эти комплексы содержат множество полипептидов, импортированных из цитозоля и интегрированных вместе с протеинами, кодируемыми митохондриями, в сложном и не совсем понятном процессе сборки. 13 митохондриальных полипептидов обладают высокой гидрофобностью, предположительно транслируются на поверхности мембраны и поддерживаются мембранным белком Oxa1, который помогает в процессе сборки (Liu and Spremulli, 2000). В отсутствие терминации трансляции растущие белки будут вставлены в мембрану, но также будут присоединяться к рибосоме через пептидил-тРНК, связанную с Р-сайтом.Понятно, что эта сложноэфирная связь может спонтанно гидролизоваться с течением времени, но активность фактора высвобождения на рибосоме резко ускоряет этот естественный процесс (Schmeing et al., 2005). Однако возможно, что тонкие временные эффекты на процесс сборки после siRNA-опосредованного нокдауна могут приводить к собранным комплексам с незначительными дефектами в переносе электронов, что приводит к повышенной потере электронов в форме ROS. Подобная ситуация недавно была описана для транс- -митохондриальных мышиных цибридов, у которых один и тот же полиморфизм мтДНК в различных ядерных фонах приводил к модуляции продукции ROS и массы митохондриальных клеток без какого-либо драматического воздействия на активность комплекса OXPHOS (Moreno-Loshuertos et al. ., 2006). Вторая возможность, которую мы не учли, заключается в том, что рибосома может останавливаться на сайте терминации и в отсутствие рамки считывания сдвига фактора высвобождения, приводя к С-концевым удлинениям в основном полилизина из-за близости поли (A ) хвост. Во-первых, при единственной характеристике мТ-мРНК человека, не имеющей кодона терминации, мт-мРНК быстро деградировала после трансляции, вероятно, из-за того, что транслирующая рибосома отталкивает природный поли (A) -ассоциированный белок (белки), оставляя голую РНК. склонны к перевариванию РНКазой (Temperley et al., 2003). В исследовании, представленном здесь, нет доказательств снижения стабильности мт-мРНК. Во-вторых, хотя только короткие удлинения полилизина будут добавлены к большинству митохондриальных полипептидов, ATPase 8, напротив, будет существенно увеличиваться в размере, поскольку она транслируется с 5′-части бицистронной RNA14 . После истощения mtRF1a нет доказательств увеличения размера этого или каких-либо вновь синтезированных митохондриальных белков. В-третьих, когда мы использовали антитело, специфичное к полилизину, мы не видим никаких новых митохондриальных продуктов (данные не показаны).

    Таким образом, мы сообщаем об идентификации и биохимической характеристике фактора высвобождения митохондриальной трансляции человека, mtRF1a, который декодирует основные стоп-кодоны UAA и UAG. Теперь это должно быть включено в растущий список факторов трансляции митохондрий, мутации которых могут лежать в основе митохондриальной дисфункции у все большего числа пациентов, для которых еще предстоит определить ядерно-кодируемые мутации.

    Экспериментальные процедуры

    Получение слитых конструкций GFP и GST и клонирование в дрожжевые экспрессирующие векторы

    Точные детали дизайна праймеров и конструкции приведены в дополнительных экспериментальных процедурах.

    Условия роста дрожжей, конструкции плазмид и общих штаммов и анализы комплементации

    Все штаммы дрожжей, использованные в этом исследовании, подробно описаны в таблице S1.

    Дрожжевые среды, общие генетические методы и протоколы трансформации были описаны в Chiron et al. (2005). Вкратце, в то время как среда, содержащая 2% глюкозы, была ферментируемой для обоих дрожжей, неферментируемые условия были достигнуты в средах, содержащих в качестве единственного источника углерода 2% глицерина ( S. cerevisiae ) или S.pombe 3% глицерин / этанол или 2% галактозы и 0,1% глюкозы.

    Получение штамма

    S. pombe Δmrf1

    Было обнаружено, что один белок S. pombe , кодируемый геном Spac2f7.17, имеет высокий уровень идентичности (65%) с обоими E. coli RF1 и S. cerevisiae Mrf1. ORF амплифицировали с помощью ПЦР с использованием библиотеки кДНК в качестве матрицы и клонировали в сайт BamHI экспрессионной плазмиды pTG1754. Штамм S. pombe Δmrf1 :: Kan R (NB329) был сконструирован в штамме реципиента дикого типа NB205-6A (Chiron et al., 2005) с использованием стратегии разрушения ПЦР с олигонуклеотидами гибрида mrf1-Kan R , как описано в (Chiron et al., 2005). ПЦР доказала, что клоны, показывающие замедленный рост на среде с галактозой, содержат правильную вставку. Скрещивание с диким типом с последующим споруляцией и тетрадным анализом показало косегрегацию 2: 2 устойчивости к генетицину и медленный рост галактозы. Трансформация плазмидой mrf1Sp восстанавливала рост на галактозе, показывая, что митохондриальная ДНК не была повреждена в этом штамме.

    Спектроскопический анализ

    Спектры цитохрома регистрировали трансформантов обоих дрожжей, выращенных на твердой среде. Клетки собирали, сушили и смешивали с дитионитом натрия для полного восстановления цитохромов и замораживали в жидком азоте перед регистрацией оптической плотности образцов при длинах волн от 630 до 490 нм (спектрофотометр Cary 400). Пики были следующими для S. cerevisiae или S. pombe соответственно: цитохром c (546 или 548 нм), цитохром c 1 (552 или 554 нм), цитохром b ( 558 или 560 нм), а цитохром а.о. 3 (602 или 603 нм).

    Сверхэкспрессия и очистка митохондриальных и бактериальных белков человека

    Штамм E. coli Rosetta (DE3) pLysS (Novagen) трансформировали конструкциями для сверхэкспрессии митохондриальных RF человека, которые были очищены, как подробно описано в дополнительных экспериментальных процедурах. E. coli RF1 был сверхэкспрессирован и очищен от штамма BL21 pLysS в соответствии с протоколом, описанным у Tate and Caskey (1990).

    Анализ импорта митохондрий

    Реакции (20 мкл), содержащие 10 мкл лизата ретикулоцитов кролика (Promega), смесь для экспресс-мечения белков EasyTag 35 мкКи (NEG-772, PerkinElmer) и 17.Смесь 5 мкМ аминокислот без метионина (Promega) была запрограммирована с помощью 5 мкг транскрибированной in vitro РНК (синтезированной с использованием AmpliScribe, Epicenter) в течение 1 часа при 30 ° C, после чего добавляли 5 мМ холодного метионина и 250 мМ сахарозы с последующим добавлением еще 15 мин инкубации перед ультрацентрифугированием при 125 кг в течение 30 мин при 4 ° C.

    Митохондрии печени крысы выделяли, как описано ранее (McGregor et al., 2001). Каждая реакционная смесь импорта 100 мкл содержала 200 мкг изолированных митохондрий и 5 мкл транслированного in vitro белка в буфере для изоляции (220 мМ маннит, 70 мМ сахароза, 10 мМ HEPES [pH 7.4], 1 мМ MgCl 2 , 1 мМ EGTA) с добавлением 1 мМ АТФ, 1 мМ НАДН, 20 мМ сукцината и 50 мкМ CCCP, как указано. Реакции инкубировали в течение 1 часа при 30 ° C, после чего 5 мкг протеиназы K добавляли к подмножеству реакций с последующей 30-минутной инкубацией на льду. PMSF (1 мМ) добавляли к каждой реакции перед центрифугированием при 13 кг в течение 1 мин при 4 ° C. Осадки промывали в буфере для выделения, репеллировали и ресуспендировали в буфере для диссоциации перед разделением с помощью SDS PAGE. Визуализация осуществлялась анализом PhosphorImage с помощью программного обеспечения ImageQuant (Molecular Dynamics, GE Healthcare).

    Анализ прекращения трансляции in vitro

    Это было выполнено в основном, как описано (Caskey et al., 1971; Tate and Caskey, 1990) с модификациями, подробно описанными в дополнительных экспериментальных процедурах. Чтобы получить f [3H] met-тРНКмет, следующее объединяли для получения указанных конечных концентраций: какодилатный буфер (100 мМ [pH 6,8]), 3,5 мМ лейковорин (Sigma) в качестве донора формила, 20 мкМ аминокислот (Promega ), 0,3 мг N-формилметионин-специфической тРНК (Sigma), 1,2 мМ АТФ, 1 мМ DTT, 10 мМ MgCl2, 3.8 нмоль L- [ метил -3H] метионина (GE Healthcare) и холодный метионин до 21,8 нмоль с аминоацил тРНК синтетазой. Инкубировали 30 мин при 37 ° C. Рибосомный субстрат (количества приведены на 50 мкл анализа) получали путем инкубации рибосом 70S (5 пмоль) с AUG (250 пмоль) и f [ 3 H] met-тРНК met (2,5 пмоль) в 20 мМ Трис. -HCl (pH 7,4), 10 мМ Mg (OAc) 2, 150 мМ NH 4 Cl при 30 ° C в течение 20 мин. Этот «активированный» рибосомный субстрат хранился на льду до исследования факторов высвобождения для активности с выбранными кодонами.Стандартные реакции высвобождения были такими, как описано в дополнительных экспериментальных процедурах, при этом f [ 3 H] в супернатанте количественно определяли как индикатор активности высвобождения.

    Измерение массы свободных радикалов и митохондрий

    MitoSOX (Molecular Probes) получали в ДМСО и разбавляли до 5 мкМ в среде DMEM без сыворотки. Затем клетки инкубировали в течение 10 мин при 37 ° C, промывали перед ресуспендированием в 2 мл сыворотки без DMEM и пропускали через проточный цитометр Partec PAS (Мюнстер, Германия).Были собраны данные прямого и бокового рассеяния, а также автофлуоресценции неокрашенных клеток. Затем гейтинг позволил удалить из анализов обломки и апоптотические клетки. Было обнаружено красное излучение флуоресценции в результате окрашивания MitoSOX, и средняя интенсивность флуоресценции проанализирована с использованием программного обеспечения FloMax. Проточный цитометр калибровали с использованием флуоресцентных микросфер. Каждое измерение проводилось в трех экземплярах на основе 10 000 событий, и эксперимент повторялся в четырех независимых случаях.

    Дигидродамин 123 (DHR, Molecular Probes) или нонилакридиновый оранжевый (NAO, Molecular Probes) ресуспендировали в ДМСО, разбавляли до 30 мкМ (DHR) или 10 мкМ (NAO) в сыворотке без DMEM, добавляли к клеткам и инкубировали. при 37 ° C в течение 30 (DHR) или 10 (NAO) мин. Затем клетки промывали перед ресуспендированием в 2 мл сыворотки без DMEM и испускание зеленой флуоресценции анализировали, как указано выше.

    Относительная количественная оценка количества копий мтДНК

    ПЦР в реальном времени была проведена на ДНК, выделенной из клеток, расщепленных протеиназой K (конечная концентрация 2 мг / мл) в буфере TE (pH 7.4), выпал 1% SDS, экстрагированный фенолом и этанолом.

    Праймер для ПЦР и флуорогенные FAM-зонды для областей митохондрий ND1 (прямой праймер, L3485–3504; обратный праймер, h4532–3553; зонд, L3506–3529; Anderson et al. [1981]) и ядерный 18S (прямой праймер , 1050–1071, обратный праймер 1095–1115, зонд 1074–1093, инвентарный номер M10098) гены были сконструированы с использованием программного обеспечения Primer Express (Applied Biosystems). Каждые 25 мкл реакции проводили дважды на трех независимых образцах.К каждому образцу ДНК (10 нг) добавляли 12,5 мкл TaqMan Universal PCR MasterMix (Applied Biosystems), праймеры (конечные 300 нМ каждый), флуорогенные зонды (конечные 100 нМ) и H 2 О. Был проведен ПЦР и флуоресцентный анализ. с использованием системы определения последовательности Perkin Elmer GeneAmp 5700. Профиль амплификации составлял 50 ° C, 2 мин; 95 ° С, 10 мин; 40 циклов 95 ° C, 15 с и 60 ° C, 1 мин. Число пороговых циклов (Ct) рассчитывали с помощью программного обеспечения GeneAmp 5700 SDS v1.7 (Applied Biosystems).

    С.pombe митохондриальную ДНК экстрагировали из трансформированных клеток, выращенных в минимальной среде без урацила при 28 ° C или 36 ° C, и анализировали с помощью блоттинга по Саузерну с использованием ORF ядерного гена arg1Sp 1,3 kb (номер доступа SPCC777.09c) или плазмиды pDG3, содержащей полная митохондриальная ДНК S. pombe , клонированная на pBR322, как описано у Chiron et al. (2005).

    Респирометрия

    Респирометрия с высоким разрешением выполнялась при 37 ° C с использованием Oroboros Oxygraph-2K (Oroboros Instruments, Инсбрук, Австрия), как описано в Hutter et al.(2004). Приблизительно 0,5–1 × 10 6 клеток добавляли в камеру в 2 мл дыхательного буфера (DMEM без глюкозы, 10% [об: об] FCS, 0,11 мг / мл-1 пирувата натрия, 0,9 мг / мл галактозы). , а обычный поток кислорода в дыхательных путях (R) был установлен в течение 15 минут с автоматическим вычитанием фонового потока с использованием онлайн-программного обеспечения DatLab (Oroboros Instruments, Инсбрук, Австрия). Затем ингибировали АТФ-синтазу (олигомицин, 1 мкг / мл) и измеряли скорость (R —). Затем определяли полностью несвязанный поток (R и ) последовательным титрованием 0.5 мкМ болюсов FCCP до достижения максимальной скорости. Дыхание полностью подавлялось добавлением ротенона (ингибитор комплекса I, конечная концентрация 0,5 мкМ) и антимицина А (ингибитор комплекса III, 2,5 мкМ). При необходимости проводились спорадические реаэрации, чтобы избежать ограничения кислорода во время этих измерений, подсчет клеток производился с использованием небольшой аликвоты клеток в конце эксперимента, а затем скорости нормализовались до пмоль кислорода, потребляемого на 10 6 клеток в единицу времени. . Для оценки относительной связи были рассчитаны три соотношения: коэффициент контроля дыхания (RCR, х Ru / х Ro ), коэффициент контроля разобщения (UCR, х Ru / х R ) как мера респираторная резервная способность и комбинация этих двух соотношений (RCRp, х R — х Ro / х Ru ) для определения доли респираторной способности, связанной с фосфорилированием.

    Статистический анализ

    При необходимости использовали непарный t-критерий Стьюдента для определения значимости значений, как указано в подписях к рисункам. Значения p <0,05 регистрировались как статистически значимые.

    Вирусы | Бесплатный полнотекстовый | Анализ смещения использования синонимичных кодонов в вирусе М картофеля и его адаптация к хозяевам

    Рисунок 1. Значения эффективного числа кодонов (ENC) генов CP ( A ) и NABP ( B ) PVM от разных хозяев.Хозяева пепино, картофеля и томата представлены светло-оранжевым, светло-зеленым и светло-фиолетовым цветом соответственно.

    Рисунок 1. Значения эффективного числа кодонов (ENC) генов CP ( A ) и NABP ( B ) PVM от разных хозяев. Хозяева пепино, картофеля и томата представлены светло-оранжевым, светло-зеленым и светло-фиолетовым цветом соответственно.

    Рисунок 2. Относительная и кумулятивная инерция 40 осей от PCA значений RSCU на основе генов CP ( A ) и NABP ( B ) PVM.

    Рисунок 2. Относительная и кумулятивная инерция 40 осей от PCA значений RSCU на основе генов CP ( A ) и NABP ( B ) PVM.

    Рисунок 3. PCA на основе значений RSCU 59 синонимичных кодонов генов CP ( A ) и NABP ( B ) PVM. Хозяева пепино, картофель и томат представлены красным, зеленым и синим цветом соответственно.

    Рисунок 3. PCA на основе значений RSCU 59 синонимичных кодонов генов CP ( A ) и NABP ( B ) PVM.Хозяева пепино, картофель и томат представлены красным, зеленым и синим цветом соответственно.

    Рисунок 4. Анализ графика ENC генов CP ( A ) и NABP ( B ) PVM с графиком ENC относительно GC3 различных хозяев. Оранжевая линия представляет стандартную кривую, когда систематическая ошибка использования кодонов определяется только составом GC3. Хозяева пепино, картофеля и томата представлены красными, зелеными и синими точками соответственно.

    Рисунок 4. Анализ графика ENC генов CP ( A ) и NABP ( B ) PVM с графиком ENC относительно GC3 различных хозяев. Оранжевая линия представляет стандартную кривую, когда систематическая ошибка использования кодонов определяется только составом GC3. Хозяева пепино, картофеля и томата представлены красными, зелеными и синими точками соответственно.

    Рисунок 5. Анализ графика нейтральности GC3 против GC12 для всех кодирующих последовательностей ( A ) и различных хозяев ( B ) на основе гена CP, а также для кодирующих последовательностей ( C ) и различных хозяев ( D ) на основе генов NABP соответственно.Хозяева пепино, картофеля и томата представлены красными, зелеными и синими точками соответственно.

    Рисунок 5. Анализ графика нейтральности GC3 против GC12 для всех кодирующих последовательностей ( A ) и различных хозяев ( B ) на основе гена CP, а также для кодирующих последовательностей ( C ) и различных хозяев ( D ) на основе генов NABP соответственно. Хозяева пепино, картофеля и томата представлены красными, зелеными и синими точками соответственно.

    Рисунок 6. Показаны смещения AT [A3% / (A3% + T3%)] и GC [G3% / (G3% + C3%)] генов CP ( A ) и NABP ( B ) PVM. Центр графика (обе координаты — 0,5), указывающий положение, в котором нет смещения. Хозяева пепино, картофеля и томата представлены красными, зелеными и синими точками соответственно.

    Рисунок 6. Показаны смещения AT [A3% / (A3% + T3%)] и GC [G3% / (G3% + C3%)] генов CP ( A ) и NABP ( B ) PVM.Центр графика (обе координаты — 0,5), указывающий положение, в котором нет смещения. Хозяева пепино, картофеля и томата представлены красными, зелеными и синими точками соответственно.

    Рисунок 7. Анализ индекса адаптации кодонов (CAI) ( A ) и анализ RCDI относительного индекса деоптимизации кодонов ( B ) генов CP и NABP по отношению к естественным хозяевам. Ось x представляет последовательности, идентифицированные в разных хозяевах.

    Рисунок 7. Анализ индекса адаптации кодонов (CAI) ( A ) и анализ RCDI относительного индекса деоптимизации кодонов ( B ) генов CP и NABP по отношению к естественным хозяевам. Ось x представляет последовательности, идентифицированные в разных хозяевах.

    Рисунок 8. Анализ индекса сходства (SiD) генов PVM CP ( A ) и NABP ( B ) по отношению к использованию синонимичных кодонов естественных хозяев. Хозяева пепино, картофеля и томата представлены светло-оранжевым, светло-зеленым и светло-фиолетовым цветом соответственно.Ось x представляет последовательности, идентифицированные в разных хозяевах.

    Рисунок 8. Анализ индекса сходства (SiD) генов PVM CP ( A ) и NABP ( B ) по отношению к использованию синонимичных кодонов естественных хозяев. Хозяева пепино, картофеля и томата представлены светло-оранжевым, светло-зеленым и светло-фиолетовым цветом соответственно. Ось x представляет последовательности, идентифицированные в разных хозяевах.

    Таблица 1. Относительное значение использования синонимичных кодонов (RSCU) в 59 кодонов, кодирующих 18 аминокислот, в соответствии с генами хозяев белка оболочки М картофельного вируса (PVM CP) и богатого цистеином белка, связывающего нуклеиновые кислоты (NABP).

    Таблица 1. Относительное значение использования синонимичных кодонов (RSCU) в 59 кодонов, кодирующих 18 аминокислот, в соответствии с генами хозяев белка оболочки М картофельного вируса (PVM CP) и богатого цистеином белка, связывающего нуклеиновые кислоты (NABP).

    Виды Последовательность Идентичность Номер доступа Цитохондохондриальный
    E.coli H R V Q R V P A T — — — E S G R I H T S 18/18 P07011 Цитозольный
    Человек H R V Q R P E V G L S S R M Q R I H T G 10/21 BC042196 Митохондриальная
    Человек H R V Q R V P K T — — — E K Q G R V H T S 15/18 BC011873 Митохондриальные ткани
    H R V Q R V P A T — — — E S Q G R I H T S 18/18 CAB Цитозольный
    Paracoccus denitrificans H R V V P E T — — — E S G G R I H T S 16/18 YP_
  • 1
    		•  Цитозольная
    Bacillus subtilis H R V R P
    P E T — — — E S G G R I H T S 16/18

    31

    		 CAA Цитозольный
    Rickettsia prowazekii H R V Q R I P E T E T — E — S Q G R I H T S 16/18 Q9ZD21 Цитозольный
    Kluyveromyces lactis H R V Q R V P A T — — S E — K G R T H T S 16/18 P41767 Митохондриальная
    Saccharomyces cerevisiae R I P S T — — — E T K G R T H T H S 15/18 P30775 Митохондриальная
    Schizosaccharomyces pombe H R V R T P A T — — — E T K G R V T H S 14/18 CAA Митохондриальный
    Caenorhabditis elegans H R V Q R V R V — — — — — D S R M H T S 11/18 O44568
    9515 900U 1652932 1,4
  • 26326 326 326 C15 965 965 965 965 965 AC 1,85 0,8 965 965 GCA 965 GCA 1,441 326 900 0,66 965 2965 0,83111

    Таблица 2. Корреляционный анализ между GRAVY, ARO, ENC, GC3 S , GC и первыми двумя осями основных компонентов.

    Таблица 2. Корреляционный анализ между GRAVY, ARO, ENC, GC3 S , GC и первыми двумя осями основных компонентов.

    Кодон а.о. CP NABP
    Картофель Помидор Пепино Все Картофель Помидор Пепино 931 931 931 0.89 0,63 0,65 0,73 1,98 1,8 1,96 1,96
    UUC F 1,38 1,35 1,27 0,02 0,2 0,04 0,04
    UUA 0 0,3626 0,02 0,15 1,7 1,6 1,96 1,84
    UUG L 1,18 0,93 0,96 1,04 0,81 0,81 0,81
    CUU L 0,48 0,26 0,29 0,36 1,63 2,4 2,05 1.93
    CUC L 0,89 1,03 1 0,96 0,52 0,2 0 0,2
    CUA L 1 1,38 1,23 0,63 0,4 0,02 0,27
    CUG L 2,1 2,41 2.36 2,27 0,7 0,6 0,12 0,37
    AUU I 0,64 0,52 0,13 0,3332 1,13 0,3332 1,07 1,1
    AUC I 1,17 1,47 1,74 1,53 1,05 0.67 0,65 0,72
    AUA I 1,18 1,01 1,13 1,14 0,81 1,26

    27

    		57326673269 GUU V 0,54 0,42 0,48 0,5 0,09 0 0 0,02
    GUC V 0.63 0,54 0,5 0,55 0,52 0,4 0,4 0,42
    GUA V 0,5 0,81 0,55 0,54 0,81 0,8 0,82 0,87
    GUG V 2,33 2,24 2,47 2,41 2.36 2,8 2,77 2,69
    UCU S 0,83 0,81 0,72 0,76 326 900 2,38 2,23
    UCC S 0,76 0,72 0,71 0,73 0,9 0.64 0,27 0,44
    UCA S 0,88 0,94 1,07 0,99 1,4 1,61 1,58 1,54
    1,48 1,37 1,44 0,23 0 0,01 0,06
    AGU S 0,31 0,4 0.62 0,49 1,6 1,71 1,77 1,72
    AGC S 1,7 326 1,7 326 1,7 326 900 1,59 0,03 0 0 0,01
    CCU P 0,7 0,55 0,69 0.69 2,02 1,7 1,68 1,75
    CCC P 0,56 0,58 0,43 0,49 0,49 0,49 0,75
    CCA P 1,24 1,39 1,59 1,45 1,18 1,5 1.51 1,44
    CCG P 1,51 1,47 1,28 1,38 0,19 0 0,03 0,015 1,99 1,95 1,92 2,68 2,76 3,05 2.95
    ACC T 0,42 0,24 0,37 0,37 0,93 1,16 0,95 0,97
    ACA 0,88 0,19 0 0 0,04
    ACG T 0,72 0,8 0,89 0,83 0.19 0,07 0 0,04
    GCU A 1,51 1,57 1,34 1,42 32 1,42 32 32 2,3 2,26
    GCC A 0,86 0,78 0,94 0,9 0,05 0.05 0,14 0,12
    GCA A 1,03 1,03 1,17 1,17 1,11 0,48 0,66 0,41 0,44
    0,62 0,54 0,57 1,43 0,91 1,15 1,19
    UAU Y 0,99 1.08 1,01 1,01 1,13 0,86 0,84 0,91
    UAC Y 1,01
  		•  1,01
  		• ,99 0,87 1,14 1,16 1,09
    CAU H 0,77 0,4 0.46 0,56 0,88 0,53 0,72 0,74
    CAC H 1,23 1,6 1,54 1,54 1 1 1,47 1,28 1,26
    CAA Q 0,74 0,58 0,44 0.56 1,37 2 2 1,89
    CAG Q 1,26 327329 327 0,63 0 0 0,11
    AAU N 1,18 1,34 1,29 1.25 1,64 1,33 1,34 1,4
    AAC N 0,82 0,66 0,71 0,66 0,71 0,6
    AAA K 0,76 0,75 0,62 0,68 0,31 0,53 0,53 0.49
    AAG K 1,24 1,25 1,38 1,32 1,69 1,69 327327 1.47 327 1.47 329
    GAU D 1,24 1,32 1,45 1,37 1.97 1,78 2 1,98
    GAC D 0,76 0,68 0,55 0,63 0,02 0,02 0,02
    GAA E 0,7 0,68 0,66 0,68 0,73 0,8 0,78 0,77
    GAG E 1.3 1,32 1,34 1,32 1,27 1,2 1,22 1,23 0,71 0,72 1,58 1,62 1,66 1,64
    UGC C 1.28 1,17 1,29 1,28 0,42 0,38 0,34 0,36
    CGU R 0,6 0,6 1,16 1,37 1,37 1,32
    CGC R 1,11 0,81 0,78 0,9 1,07 0.91 0,91 0,95
    CGA R 0,93 1,47 1,5 1,3 0,59 0,74 0,52 0,56
    0,56
    CG 0,56 0,53 0,53 0,16 0 0 0,03
    AGA R 0,82 0,69 0.69 0,74 1,3 1,26 1,34 1,32
    AGG R 1,96 2,16 2,24 9006 2,24 31 2,24 73 1, 2,24 73 1,71 1,85 1,82
    GGU G 1,28 1,01 1.15 1,19 2,09 2,57 2,85 2,66
    GGC G 0,8529 0,8529 0,14 0,01 0,21
    GGA G 0,9 1,01 1 0,96 0,75 0.71 0,57 0,62
    GGG G 1,02 1,03 0,86 0,93 0,31 0,57 0,57 0,51
    r
  • 9 0,125 965 290,2723 9 0,125
    • Gene ENC GC3s GC Axis1 Axis2
    r P r P r r P P
    CP Соус 0,17691 * 0,0309 −0,00431 нс 0, −0,01278 нс 87702 0,14168 нс 0,0848 −0,29638 ** 2,42 × 10 −4
    Aromo 0,27855 ** 5,82 × 10 31 −4 ** 9,73 × 10 −4 −0,23363 ** 0,00414 0,39558 ** 5,94 × 10 −7 −0,19631 * 0,01642
    0,01642
    NABPvy −0.26677 ** 0,00298 −0,48469 ** 1,54 × 10 −8 −0,4726 ** 3,88 × 10 −8 −0,62506 ** 1,41 × 10 −14 −0,16583 нс 0,06793
    Aromo −0,15843 нс 0,08135 0,21532 * 0,01723 0,21532 * 0,017230,21532 * 0,01723 0145 9145 9145

    1 **

    		 2,47 × 10 −7 0,30524 ** 6,29 × 10 −4

    Предпосылки, молекулярная генетика и предполагаемые механизмы мозжечковой болезни, непрогрессирующие мозжечковые атаксии

    Автор

    Кэтлин Мюррей, доктор медицины Врач-резидент, отделение неврологии, Медицинский колледж Морсани Университета Южной Флориды

    Кэтлин Мюррей, доктор медицины, является членом следующих медицинских обществ: Alpha Omega Alpha, Американская академия неврологии

    Раскрытие информации: ничего расскрыть.

    Соавтор (ы)

    Кельвин Фенелон, MS Координатор клинических исследований, Отдел неврологии, Исследовательский центр атаксии USF

    Раскрытие: Ничего не разглашать.

    Вай Вай Л. Миллер, MD Клинический инструктор, кафедра неврологии, Медицинский колледж Морсани Университета Южной Флориды

    Раскрытие: Ничего не разглашать.

    Тереза ​​Энн Зесевич, доктор медицины, FAAN Профессор неврологии, доцент фармакологии и молекулярной терапии, Медицинский колледж Морсани Университета Южной Флориды; Лечащий врач отделения неврологии больницы общего профиля Тампы; Сотрудник Американской академии неврологии

    Тереза ​​Энн Зесевич, доктор медицины, FAAN является членом следующих медицинских обществ: Американская академия неврологии, Американская медицинская ассоциация, Общество двигательных расстройств, Исследовательская группа Паркинсона

    Раскрытие информации: не раскрывать.

    Специальная редакционная коллегия

    Франсиско Талавера, фармацевт, доктор философии Адъюнкт-профессор, Фармацевтический колледж Медицинского центра Университета Небраски; Главный редактор Medscape Drug Reference

    Раскрытие информации: Получил зарплату от Medscape за работу. для: Medscape.

    Флориан П. Томас, доктор медицины, доктор наук, магистр медицины, магистр медицины Председатель Института неврологии и Отдел неврологии, директор Национального центра рассеянного склероза и Центра передового опыта Фонда наследственной невропатии Медицинского центра Университета Хакенсак; Председатель-основатель и профессор кафедры неврологии Медицинской школы Хакенсак-Меридиан Университета Сетон-Холл; Почетный профессор кафедры неврологии Медицинской школы университета Сент-Луиса; Главный редактор журнала «Медицина спинного мозга»

    Флориан П. Томас, доктор медицинских наук, магистр наук, магистр медицины, является членом следующих медицинских обществ: Академия специалистов по травмам спинного мозга, Американская академия неврологии, Американская неврологическая ассоциация, Консорциум Центров рассеянного склероза, Национальное общество рассеянного склероза, Сигма Си, Общество чести научных исследований

    Раскрытие: нечего раскрывать.

    Главный редактор

    Селим Р. Бенбадис, доктор медицины Профессор, директор Комплексной программы эпилепсии, отделения неврологии и нейрохирургии, Общая больница Тампа, Медицинский колледж Морсани Университета Южной Флориды

    Селим Бенбадис, доктор медицины, является членом следующих медицинских обществ: Американская академия неврологии, Американская академия медицины сна, Американское общество клинической нейрофизиологии, Американское общество эпилепсии, Американская медицинская ассоциация

    Раскрытие информации: Служить (d) в качестве директора, должностного лица, партнера, сотрудника, советника, консультанта или попечителя для: Альянса, Bioserenity, Ceribell, Eisai, Greenwich, LivaNova, Neurelis, Neuropace, Nexus, RSC, SK life science, Sunovion
    Служить (d) в качестве докладчика или члена бюро докладчиков для: Alliance, Aquestive, Bioserenity, Eisai , Гринвич, LivaNova, Neurelis, SK life science, Sunovion
    Получил исследовательский грант от: Cerevel, LivaNova, Greenwich, SK biopharmaceuticals, Takeda.

    Дополнительные участники

    Фреди Дж. Ревилла, доктор медицины, FAAN, FANA Клинический профессор, Медицинский факультет Университета Южной Каролины, Гринвилл; Заведующий отделением неврологии, UMG Neuroscience Associates, Prisma Health-Upstate

    Фреди Дж. Ревилла, доктор медицины, FAAN, FANA является членом следующих медицинских обществ: Американской академии неврологии, Американской неврологической ассоциации, Huntington Study Group, International Parkinson and Общество двигательных расстройств, Исследовательская группа Паркинсона, Общество неврологии

    Раскрытие информации: нечего раскрывать.

    Родриго О Кулджис, доктор медицины Эстер Лихтенштейн, профессор психиатрии и неврологии, директор отделения когнитивной и поведенческой неврологии отделения неврологии Медицинской школы Университета Майами

    Родриго О Кулджис, доктор медицины, является членом следующих медицинских обществ : Американская академия неврологии, Общество неврологии

    Раскрытие: Ничего не раскрывать.

    Рамья Рагхаван Студент кооператива, Университет Цинциннати

    Раскрытие: Ничего не нужно раскрывать.

    Благодарности

    Шерил Р. Гринберг, доктор медицины Профессор кафедры педиатрии, отделение медицинской генетики, Детская больница Виннипега, Медицинский факультет Университета Манитобы, Канада

    Раскрытие: Ничего не раскрывать.

    Мандар С. Джог MD Профессор кафедры неврологии Университета Западного Онтарио; Директор программы по двигательным расстройствам, Лондонский центр медицинских наук, Лондон, Онтарио, Канада

    Мандар С. Джог является членом следующих медицинских обществ: Общества двигательных расстройств, Королевского колледжа врачей и хирургов Канады и Общества неврологии

    .

    Раскрытие: Ничего не раскрывать.

    Асури Прасад, MBBS, MD, FRCPE, FRCPC Доцент кафедры педиатрии и клинической неврологии медицинского факультета Университета Западного Онтарио; Консультант, Детская больница Западного Онтарио

    Асури Прасад, MBBS, MD, FRCPE, FRCPC является членом следующих медицинских обществ: Американская академия неврологии, Американская академия педиатрии, Американское общество эпилепсии, Общество детской неврологии, Королевский колледж врачей и Королевский колледж врачей и хирургов. Канады

    Раскрытие: Ничего не раскрывать.

    Читра Прасад, доктор медицины, FRCPC, FCCMG, FACMG Директор службы обмена веществ, Детская больница, Лондонский центр медицинских наук; Доцент кафедры генетики, метаболизма и педиатрии, Медицинский факультет Университета Западного Онтарио, Канада

    Читра Прасад, доктор медицины, FRCPC, FCCMG, FACMG является членом следующих медицинских обществ: Американская академия педиатрии, Американский колледж медицинской генетики, Американское общество генетики человека, Канадское педиатрическое общество, Королевский колледж врачей и хирургов Канады, и Общество наследственных нарушений обмена веществ

    Раскрытие информации: отсутствие финансового интереса Нет Нет

    Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

    Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

    Настройка вашего браузера на прием файлов cookie

    Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

    • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
    • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
    • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
    • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
    • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

    Почему этому сайту требуются файлы cookie?

    Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

    Что сохраняется в файле cookie?

    Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

    Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

    .

    Author: alexxlab

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *